红景天药材鉴定论文

【摘要】红景天药材来源复杂，临床用药品种混乱。为确保临床用药的安全有效，该 文对近十年来红景天药材的鉴定研究进展归纳总结，为红景天药材的品种、品质研究及该 属植物资源开发和利用提供资料。 【关键词】红景天鉴定研究资源开发 Abstract： Hongjingtianhasacomplicatedorigininourstatemarket.Toensurethequality,thisr eviewsumsuptheidengtificationstudiesintherecenttenyearsforthequalityevalua tion.Meanwhile,themessagefortheusageoftheseresourcesisprovided. Keywords：Hongjingtian;Identificationstudies;Resourcesdevelopment 红景天药用历史悠久，素有“黄金人参”“神仙草”之称。药理研究表明红景天属植物具有 抗缺氧、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、抗疲劳、增强记忆力等作用［1］。我国红景天属植 物来源复杂，商品药材种类多，但不同种类红景天疗效不尽相同［2］，相似功效的种类 由于药用成分及含量存在差异，品质也不一样，个别品种还含有有毒成分［3］。为确保 红景天药材的使用安全有效，对红景天药材的分类和正确鉴定就尤为重要。本文将近十年 来有关红景天药材的鉴定概况作一综述。 1 生境及资源概况 景天科（Crassulaceae）红景天属（红景天属（Rhodiola）红景天属（植物，全世界约有 90 种，主要分 布于北半球高寒地带［4］。多分布于喜马拉雅地区、亚洲西部至北部，经朝鲜、日本至 北美洲，中国为红景天属植物的分布中心。我国红景天植物有七十余种，主要分布在西南、 西北、华北、华中及东北地区，西南及西北地区种类多，蕴藏量较大。其中，西藏产三十 余种，资源分布较丰富，种类及蕴藏量均占世界首位，有 6 种为西藏特产；其次为云南和 四川，分别为 28 种和 26 种，蕴藏量仅次于西藏；青海、新疆、甘肃蕴藏量较大；河北、 黑龙江、吉林蕴藏量较少。 多数红景天都分布在海拔 2500～5000m 之间，少数种分布在 2000m 以下，有些种 分布高度达 5000m 以上。在东北及华北地区，没有较高的山地，红景天分布的种数也很 少，虽然只有 6 种红景天，但是都分布在海拔 1700～2400m，1700m 以下几乎没有红 景天分布。 2 鉴定研究进展 2.1 品种研究 2.1.1 传统研究中药性状鉴定和显微鉴定为中药鉴定的传统方法。在中药鉴定中占有 十分重要的地位，在红景天药材鉴定上，是简单有效的。我国红景天属植物较多，但是各 种红景天传统鉴定研究并不多，目前，做过鉴定研究的有大花红景天［5］、高山红景天 ［6,7］、狭叶红景天［8］、菱叶红景天［9,10］、长鞭红景天［11］、蔷薇红景天 ［12］等。见表 1。表 1 红景天主流商品性状检索表（略）红景天属（ 原药材性状鉴定可以区分大部分红景天，但是蔷薇红景天和狭叶红景天之间区别并不 十分明显，加之药材加工增加了性状鉴定的难度，因此显微鉴定是性状鉴定的必要补充。 各种红景天粉末制片鉴别不明显，根茎横切面均为双子叶植物的正常构造，区别不大。 相比而言，根茎横切面具有较明显的鉴别特征，可以依据髓部异常维管束的排列方式、多 少，木栓组织环的有无、位置、形状和数量等鉴别不同品种红景天药材［13］（见表 2）红景天属（。表 2 红景天主流商品根茎横切面检索表（略）红景天属（ 2.1.2 色谱研究现代色谱用于中药鉴定，为中药鉴定开辟了一条新思路。传统鉴定方 法在实际工作中，有一定的局限性，它需要具有一定的专业知识背景的科研人员，从某种 程度上，不利于红景天药材的质量标准现代化。近年来，不少科研工作者将现代分析仪器 和方法、技术运用到红景天药材的品种鉴别上，拓宽了红景天的鉴定研究范围。 薄层色谱：复方红景天冲剂含有高山红景天、淫羊藿等 7 位中药组成的复方制剂，组 分多，干扰大。刘玉珍等［14］对其采用 70%乙醇提取，正丁醇萃取，D-101 大孔树脂 纯化后 TLC 鉴别，提高了鉴别效率，有利地控制了产品的质量。胡馨等［15］将红景天片 剂研细，用 70%乙醇超声处理，过滤，滤液蒸干，用甲醇溶解，作为供试液，硅胶 G 板， 展开剂甲醇：氯仿 1:4，5%香草醛硫酸溶液，105℃烘数分钟，亦能将红景天有效的鉴别。 高效液相色谱：王强等［16］运用 Rp-HPLC 对采集于中国天山地区玫瑰红景天、条 叶红景天、优美红景天等 10 种野生红景天属植物进行分析，将色谱图根据聚类分析和相 似度分析处理结果，能正确区分出这 10 种红景天。 核磁共振谱：王思宏等［17］采用赵天增总提取物通用方法，薄层层析处理后，运用 液-质联机，对比分析长白山地区高山红景天和长白红景天，两者的谱图轮廓相似，说明高 山红景天和长白红景天有亲缘关系，但是高山红景天有效成分红景天苷特征明显的核磁共 振特征图谱，而长白红景天有效成分红景天苷特征不明显的核磁共振特征图谱红景天苷的 特征吸收不明显，以此鉴定高山红景天真伪。 红外光谱：王思宏等［18］通过实验分别对长白山地区的野生和栽培高山红景天和长 白红景天石油醚，氯仿，甲醇提取物进行了傅里叶变换红外光谱法测定。结果表明，长白 山地区的野生和栽培高山红景天和长白红景天的红外光谱图谱有明显不同，亦可作为鉴别 其品种或评价其质量的一种手段。 2.1.3 分子生物技术随着现代分子生物技术的迅猛发展，分子生物技术逐渐深入到中 药鉴定领域。它的出现为中药品种鉴定提供了有效的手段。 倪念春等［19］运用 PCR 产物直接测序法测定大花红景天与长鞭红景天、云南红景 天等云南常见药用红景天及景天属的长丝景天的核糖体内转录间隔区序列并作同源性分析， 序列比较的结果表明：红景天属样品的 ITS 序列与长丝景天有显著差别；红景天属内各种 序列差异虽小，却存在显著而稳定的差别，从而准确鉴定出各种药用红景天植物。 虞泓等［20］利用 RAPD 技术对云南常见药用红景天原植物的 3 个种 6 个居群 59 个 个体进行了随机引物扩增，对红景天不同种、不同居群间的亲缘关系和遗传多样性进行了 探讨。该实验通过红景天居群的遗传多样性及基因型的聚类分析，明确区分了不同种的红 景天属植物，并且表明 RAPD 分子标记对同种红景天不同居群有较好的鉴别力。 胡挺松等［21］采用 RAPD 技术对红景天属 4 种药用植物进行分子水平鉴定。从红景 天的 RAPD 扩增结果显示：用 OPA4 等作随机扩增引物进行随机扩增时，可得到识别这些 物种基因组 DNA 的多态片段，从而将 4 种红景天属植物区分开。 2.2 品质研究红景天的品质取决于有效成分的种类及含量。红景天的有效成分主要有 红景天苷及苷元酪醇、多糖类、黄酮类、挥发油类、氨基酸和微量元素。 2.2.1 红景天苷及酪醇红景天苷是红景天属植物的主要有效成分，测定红景天苷含量， 目前作为评价红景天属植物药用价值的主要指标。 包文芳等［22］采用高效液相层析法对国产蔷薇红景天、高山红景天、小丛红景天和 长白红景天野生品种的根茎重及蔷薇红景天的不同部位、不同采集时间、不同处理方法的 样品中红景天苷的含量进行分析，总结了红景天苷含量变化的大致规律，对红景天资源的 开发利用有一定的参考价值。刘世明等［23］采用 HPLC 法检测狭叶红景天贮存期红景天 苷的含量，实验表明放置时间增长，红景天苷含量随之降低，归纳出狭叶红景天最佳放置 年限为 1 年，超出这个期限，其药用价值可能降低。 谷会岩等［24］采用高效毛细管电泳法对采集于两个野生产地不同居群和两个人工栽 培地的高山红景天中红景天苷的含量进行了对比研究，实验结果表明，人工栽培高山红景 天和自然环境下高山红景天中红景天苷含量有差异，不同天然居群高山红景天中红景天苷 含量也有差异。 红景天苷在波长 223.8nm 处有最大吸收，安丰等［25］将 8 种红景天属植物用甲醇 提取，以硅胶 GF254 薄层板，氯仿甲醇水（甲醇甲醇水（水（26∶14∶3）红景天属（为展开剂，分离出红景天苷后， 以紫外分光光度法于测定红景天苷含量，发现有的红景天品种间的红景天苷含量相差很大。 吴锦健等［26］采用重氮盐比色法测定三种不同红景天药材中酚性成分的含量，结果 发现红景天苷的含量高山红景天＞蔷薇红景天＞狭叶红景天。 2.2.2 多糖及黄酮类多糖广泛存在于自然界，是多种中草药有效成分之一，具有多种 生物活性，是理想的免疫增强剂，它能促使 T 细胞、B 细胞、NK 细胞等免疫细胞的功能， 还能促进白介素、干扰素、肿瘤坏死因子的产生。黄酮类化合物具有降血脂、抗血栓、抗 氧化、降糖等多种生物活性。 兰卫等［27］从玫瑰红景天中提取有效成分总黄酮和多糖，并用分光光度法测定其含 量，其中多糖含量为(3.90±0.0872)%，总黄酮的含量为(21.60±0.3122)%。李伯祥等 ［28］采用薄层甲醇水（紫外法对小丛红景天中的草质素甲醇水（7甲醇水（O甲醇水（a甲醇水（L甲醇水（鼠李糖苷（rhodionin）红景天属（、素 质素甲醇水（7甲醇水（O甲醇水（（3”甲醇水（O甲醇水（βD甲醇水（D甲醇水（葡萄糖基）红景天属（甲醇水（a甲醇水（L甲醇水（鼠李糖苷（rhodiosin）红景天属（及总黄酮进行了含量分析， 结果分别为 0．69％，0．34％和 1．32％。孙萍等［29］运用微波技术用水提醇沉法提 取狭叶红景天多糖，用酚-硫酸比色法测定多糖含量。测得狭叶红景天中多糖含量 3.90%，平均回收率为 98.88%，RSD=1.36(n=3)。 2.2.3 氨基酸和微量元素 红景天除含有本身特有的化学成分（红景天苷及苷元酪醇、酪萨维）红景天属（外还含有 21 种 微量元素及 18 种氨基酸，其中 7 种人体必需氨基酸。阮晓等［30］测定新疆 6 种红景天 属植物的根及根茎中微量元素和 20 种氨基酸含量。结果表明 6 种红景天根及根茎中所含 9 种微量元素及 20 种氨基酸的种类和含量差异较大。 近年来，从菱叶红景天和狭叶红景天中分离出了毒性成分（heterodendrin）红景天属（和百脉 根苷（lotaustralin）红景天属（等生氰苷部分，因此对该属植物中此类成分的存在我们应给予足够 的重视。康胜利等［31］采用苦味酸试纸法和银量法对采于青海省东部地区的 9 种红景天 属植物的生氰苷进行了定量分析，结果表明狭叶红景天中含量最高。此外还发现，生氰苷 的含量与产地、生态环境量有关。 3 资源保护 目前，红景天的市场需求量日益增加。虽然我国红景天蕴藏量丰富，但是国内外对红 景天药材的深入开发、应用，大量野生资源的采挖、收购，红景天生态环境的特殊，天然 更新较差，更新的速度远远满足不了开发应用的需要，有限的红景天野生资源日趋减少。 因此对红景天资源，我们应保护原有野生资源，选择合理的采收方法，做到采收与资源保 护相结合，并建立资源保护区，保护区内的资源禁止或控制采挖；可以用无性繁殖或有性 繁殖方法，将野生红景天变为家栽；同时也可以建立人工的种源繁殖基地，选育优育品种， 进行异地引种或推广栽培，保证红景天原料的供应；利用诱导愈伤组织分化成植株的方法 也可作为快速繁殖红景天的有效手段。此外，利用植物细胞培养技术筛选出快速生长又能 产生红景天有效生物活性成分的愈伤组织、细胞系来大规模生产药用成分，也是解决红景 天供不应求的有效方法之一。 4 结语 红景天在清肺热、抗肿瘤、抗衰老、心血管方面的作用已经越来越引起人们的重视。 对于红景天药材的鉴定研究，品种研究是其基础，因此有必要综合运用传统鉴定、色谱鉴 定及分子生物技术对野生资源的种类、亲缘关系、分类地位、野生资源的生境、药材道地 性等情况进行考察研究，并力求建立红景天属植物的种质资源库，保护有限的红景天资源。 在此基础上，进行人工栽培、组织及细胞培养等工作，缓解野生资源日趋锐减的矛盾，并 深入研究其化学成分及药理作用，在保证品质的基础上，扩大红景天的药用价值。 【关键词】枳椇属植物化学成分药理活性 鼠李科枳椇属 HoveniaThunb.植物全世界有 3 种，2 个变种，主要分布于中国、朝 鲜、日本和印度。我国除东北、内蒙古、新疆、宁夏、青海和台湾外，各省区均有分布 ［1］。枳椇属植物始载于《唐本草》，以果实、木汁、木皮入药，现由《中国人民共和 国卫生部药品标准·中药材》收载。到目前为止，国内对该属植物的化学成分和药理活性研 究不多，主要集中在日本和韩国等国家。从 20 世纪 70 年代以来，研究的植物有北枳椇 HoveniadulcisThunb.、枳椇 HoveniaacerbaLindl.和毛果枳椇 HoveniatrichocarpaChunetTsiang3 个种，植物研究的主要部位以叶和种子为主，到目 前为止共从该属植物中分离出 70 多种成分，主要为三萜皂苷类和黄酮类化合物；药理研 究表明，三萜类和黄酮类为该属植物的活性成分，具有抗甜味、抑制组胺释放和保肝解酒 等作用。为了进一步深入对枳椇属植物进行综合的研究和开发利用，笔者对近年来有关枳 椇属植物的研究进行了收集。现综述如下。 1 化学成分 1.1 三萜皂苷类该类成分在枳椇属植物中广泛存在，也是其活性成分之一。如已发现 的 hodulosidesⅠ-Ⅴ，hodulosidesVII-X，saponinC2，saponinE，saponinH 和 jujubosideB。经实验表明，它们具有显著的抗甜味活性［2，3］。据报道 hovenidulciosideA1，hovenidulciosideA2，hovenidulciosideB1 和 hovenidulciosideB2 有显著的抑制组胺的释放作用［4］。已发现的这些三萜皂苷类在 结构上都属于达马烷型或变型的达马烷型三萜皂苷，具体化合物及存在的植物见图 1、表 1。 1.1.1 该属植物所得的三萜皂苷的波谱特征红外光谱：该属的三萜皂苷类化合物，双 键吸收峰在 1655cm甲醇水（1，羰基吸收峰在 1730cm-1，其中四环三萜在红外指纹 A 区： 1355～1392cm-1 和 B 区：1245～1330cm-1 都有一个较强的吸收峰，另外以Ⅲ型结型结 构为母核的皂苷在 1768cm甲醇水（1 处有五元内酯吸收峰，915cm甲醇水（1 和 827cm甲醇水（1 有环氧化物 的特征吸收峰。 1H-NMR：该属植物皂苷比较有特征的质子信号为双键质子，甲基质子和糖端基质子。 如Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ型结均有 7 个甲基氢质子信号，其 δ 值一般在 0.7～1.8ppm，而与双键相连的 甲基质子比其它五个要低场,δ 值大于 1.5ppm，Ⅲ型结 B 中只有 4 个高场区的甲基质子信号， 烯氢的化学位移值一般在 5.0ppm 左右，糖的端基质子常出现在 δ4.0～6.5ppm，还可以 根据其偶合常数来判断端基构型，测试的溶剂会影响化学位移值，如在 C5D5N 中比在 DMSO甲醇水（d6 中低场 0.7ppm 左右。 13C甲醇水（NMR：枳椇属植物中所得的四种类型的苷元的 13C甲醇水（NMR 的化学位移值数据见 表 2。 1.2 黄酮类到目前为止，从枳椇属植物得到的黄酮类化合物结构主要为黄酮醇（苷）红景天属（、 黄烷醇和二氢黄酮醇，其具体化合物及存在的植物部位见表 3。黄酮类化合物为枳椇属植 物保肝作用的活性成分，已报道的有日本学者 Yoshikawa 从北枳椇的种子和果实中得到 (+)甲醇水（二氢杨梅黄酮［10］、HovenitinsⅠ甲醇水（Ⅲ［11］，韩国学者从韩国产的北枳椇的果实中 得到解酒毒活性成分 hovenodulinol［12］，以及从韩国产的北枳椇的叶和茎中得到抗菌 活性成分 HovenidineB6［13］。表 1 枳属植物中发现的三萜皂苷类化合物（略）红景天属（ 1.3 苯丙素类据报道，苯丙素类化合物存在于枳椇属植物毛果枳椇 hoveniatrichocarpaChunetTsiang 中，YoshikawaK 等［8，18，19］从日本产的毛 果枳椇 hoveniatrichocarpaChunetTsiang 的树皮中得到 14 种苯丙素类化合物，分别 为 hovetrichosideA甲醇水（H 及它的苷元的两个对映体、ceanothetricacid、 (+)甲醇水（lyoniresinol-3a甲醇水（O甲醇水（βD甲醇水（D甲醇水（glucopyranoside、(甲醇水（)甲醇水（lyoniresinol甲醇水（3a甲醇水（O甲醇水（βD甲醇水（D甲醇水（glucopyranoside、CitrusinB。 1.4 生物碱类 1973 年，MakotoT 等［20］从北枳椇根皮中分离得到肽类生物碱：异 欧鼠李碱（frangulanine）红景天属（和枳椇碱 A（去 N甲醇水（甲基异欧鼠李碱， des甲醇水（N甲醇水（methylfrangulanine)、枳椇碱 B，其中异欧鼠李碱对诱导线粒体溶胀肿瘤有离子 选择性。金宝渊等［21］从北枳椇的种子中提取到 βD-carboline 生物碱化合物 perlolyrine 即黑麦草碱和异欧鼠李碱。 1.5 其它成分据李克明等［22］报道北枳椇子种子含脂肪高达 7%，其中有 5 个不饱 和脂肪酸，22 个饱和脂肪酸，含量较高的有△9 十八烷酸甲酯（26.24%）红景天属（、十八烷酸甲 酯（14.72%）红景天属（、十八烯酸甲酯（7.99%）红景天属（、9甲醇水（氧代壬酸甲酯(7.20%)、十九烷酸甲酯 (4.79%)和二十八烷酸甲酯（1.97%）红景天属（等，枳椇叶含有 3甲醇水（O甲醇水（香豆酰奎宁酸 (3甲醇水（O甲醇水（coumaroylquinicacid)4甲醇水（羟基-N-甲基脯氨酸(4-hydroxy甲醇水（N甲醇水（methylproline) ［23］。韩国学者从韩国产的北枳椇的叶中得到抗菌的活性成分 3甲醇水（（Z）红景天属（甲醇水（dodecenedioicacid［24］。Yoshikawa 等［25］从绒毛枳椇叶中分得芳香苷 KenpsoideA、B 和倍半萜 icarisideC1。表 2 枳椇属植物四种苷元 13C 的化学位移值［2 ～4，8］（略）红景天属（ 2 药理活性及应用