冯了性风湿跌打药酒措施论文

【摘要】目的通过对工艺的分析研究,找出造成冯了性风湿跌打药酒菌检不合格的原因, 采取有效措施进行改进。方法以《中国药典》2005 版的微生物限度检查法,运用统计的分 析方法找出主因。结果生产中使用的包装材料是影响菌检不合格的主要因素。结论通过有 效方法控制包装材料的质量,冯了性风湿跌打药酒的一次菌检合格率得到明显提高。 【关键词】冯了性风湿跌打药酒;微生物限度检查;细菌;真菌;控制菌 冯了性风湿跌打药酒由丁公藤、麻黄、桂枝、陈皮等 27 味中药材组成,具有祛风除湿、 活血止痛的功效,临床用于治疗风寒湿痹、手足麻木、腰腿酸痛、跌打损伤、瘀滞肿痛等证。 冯了性风湿跌打药酒是我公司的主要产品,为了控制产品质量,同时提高该产品的一次菌检 合格率,本文对该产品的微生物限度检查法进行方法验证,并对生产状况进行调查,找出造成 冯了性风湿跌打药酒菌检不合格的原因,制定相应对策进行改进,最后检查效果。 1 微生物限度检查的方法验证[1] 1.1 菌种 1.1.1 菌种的来源金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]]、铜绿假单胞菌 [CMCC(B)10104]]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63]501]、生孢梭菌[CMCC(B)64]94]1]、白 色念珠菌[CMCC(F)98001]、黑曲霉[CMCC(F)98003]]均由中国药品生物制品检定所提供。 1.1.2 菌液的制备将大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的 新鲜培养物接种于营养肉汤培养基中,培养 18~24]h,用 0.9%无菌氯化钠溶液制成每 1mL 含菌数为 50~100cfu(细菌、真菌验证)或 10~100cfu(控制菌验证)的菌悬液。将白色念 珠菌的新鲜培养物接种于改良马丁培养基中,培养 24]~4]8h,用 0.9%无菌氯化钠溶液制成 每 1mL 含菌数为 50~100cfu 的菌悬液。将黑曲霉的新鲜培养物接种于改良马丁琼脂斜面 培养基,培养 5~7d,加入 0.9%无菌氯化钠溶液 3]~5mL,洗脱孢子,然后吸出孢子悬液至无 菌试管内,用 0.9%无菌氯化钠溶液制成每 1mL 含孢子数 50~100cfu 的孢子悬液。 1.2 培养基营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、胆盐乳糖培养基、4]甲基伞形酮 葡糖苷酸培养基、胆盐乳糖发酵培养基、乳糖发酵培养基、营养肉汤培养基、曙红亚甲蓝 琼脂培养基、甘露醇氯化钠琼脂培养基、溴代十六烷基三甲胺培养基均由中国药品生物制 品检定所提供。 1.3] 供试液的制备取冯了性药酒 10mL,加 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 100mL,混匀,作为 1∶10 的供试液。 1.4] 细菌、真菌和酵母菌的验证试验组:取供试液 1mL 和 50~100cfu 试验菌液,分别 注入平皿中,立即倾注培养基,每株试验菌平行制备 2 个平皿,按平皿法测定其菌数。 供试品对照组:取 1mL 供试液,按常规菌落计数方法测定供试品的本底菌数。 菌液组:直接将同上试验菌的菌液量注入平皿中,立即倾注培养基,平行制备 2 个平皿,测 定所加试验菌的菌数。 3] 个批次样品的验证结果见表 1。从表 1 可见,试验组的菌回收率均大于 70%,可采用 常规法进行冯了性药酒的细菌、真菌及酵菌测定。 表 1 细菌、真菌和酵母菌验证结果(n=3])(略) Tab.1Testofbacteriaandfungi 1.5 大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的验证[2]试验组:吸取 10mL 供试 液及 10~100cfu 试验菌,加入 100mL 胆盐乳增菌培养基或营养肉汤培养基,按该控制菌的 检查法进行检查。 阴性菌对照组:大肠埃希菌的验证以金黄色葡萄球菌作阴性对照菌,金黄色葡萄球菌、 铜绿假单胞菌的验证以大肠埃希菌作阴性对照菌,分别验证各控制菌检查方法的专属性。结 果各控制菌的试验组均检出试验菌,方法成立,结果见表 2。 表 2 控制菌的验证结果(略) Tab.2Controlledbacterialgrowth 2 原因调查 2.1 一次菌检不合格的情况分析对 2005 年 1~7 月共 150 批冯了性风湿跌打药酒的 菌检情况进行了调查分析,结果:全部批次的样品细菌数均不超标;3]0 批样品真菌数超标,占 200%;10%;1 批样品细菌、真菌超标,占 0.7%。从以上结果可看出,菌检不合格品的主要缺陷 项目是真菌数超标,确定主要的监控方向是真菌。 2.2 对工艺流程进行监控[3]]通过以上分析,并对整个工艺流程进行研究,确定了下面 5 处的监控点(见图 1),对 11 批产品进行跟踪监测,结果见表 3]。从表 3] 可见,瓶盖菌落数超标 与成品的真菌不合格有相关性。 图 1 冯了性风湿跌打药酒的生产流程图(略) Fig.1FlowchartofFengliaoxingFengshiDiedamedicinalwines 表 3] 冯了性风湿跌打药酒从浸渍——成品的真菌监测情况(略) Tab.3]Detectionoffungiinthewine 注:*为超出企业内控标准 3] 改进措施 3].1 对药酒瓶、瓶盖的生产厂家实行严格的审核制度,厂家要具有“药包材注册证”,严格 按药包材注册办法的要求进行生产:① 生产厂家应建立生产和质量管理机构,从事生产的各 级人员应进行培训、考核;② 生产厂房按工艺流程及洁净级别进行合理布局,有相应规模的 生产区及储存区;③ 设备符合生产要求,便于生产、维修及保养,能防止差错和减少污染;④ 制 定物料的严格管理制度;⑤ 生产厂家应有防止污染的卫生措施,制定各项卫生管理制度,由专 人负责,切实执行;⑥ 制定各项操作规程,并严格执行,生产过程有完整的批生产记录;⑦ 产品 有完善的销售与收回记录。 3].2 严格按要求对瓶盖的外观、尺寸及微生物等项目进行检查,检验合格后才可放行使 用。 3].3] 对药酒瓶、瓶盖制定合理的存贮期,到期应进行复验,复验合格后才可使用;如因存 贮期过长造成微生物限度超标,应进行灭菌处理,复检合格才能使用。 4] 效果评价 经过改进之后,2005 年底对 9 月至 10 月共 22 批的冯了性风湿跌打药酒及其瓶盖的菌 检情况进行调查,结果:瓶盖的菌落数控制在少于 100 个/10 盖;成品冯了性药酒的细菌、真 菌的菌落数亦控制在少于 100 个/mL 左右;控制菌亦未检出,均符合法定标准要求。由结果 可知冯了性风湿跌打药酒一次菌检合格率已得到明显的改善。 5 结论 经过对冯了性风湿跌打药酒微生物检查异常的调查研究,找出造成该产品菌检不合格的 原因,采取有效措施进行改进后,一次菌检合格率得到了显着的提高。总结到:在加强生产工 序的质量管理之外,包装材料的质量管理亦不容忽视,要严把包材生产厂家的质量关,要求厂 家要有完善的质量保证体系,才能保证生产出合格的包材产品;我公司对包材要有严格的验 收标准,进一步保证只有合格的产品才能进入包装生产流程,杜绝因包材造成的成品不合格 现象。 【摘要】目的建立益母草中益母草碱的 HPLC 检测方法。方法 C18 色谱柱,流动相:甲 醇pH=1.7 的醋酸/醋酸钠缓冲液(体积比 85∶15),流速 0.6mL·min-1,检测波长 277nm, 灵敏度 0.1AUFS,柱温 25℃。结果益母草药材中益母草碱的质量分数为 0.015%;平均回 收率为 100.08%,RSD 为 0.15%。结论高效液相色谱直接检测益母草碱,简便易行,结果准 确可靠。 【关键词】益母草;益母草碱;高效液相色谱法 益母草为唇形科植物益母草(LeonurusheterophyllusSweet)的干燥地上部分,以花 蕾期的地上部分的干品或鲜品入药,性味苦、辛、微寒,归肝、心包经,具有活血调经、化瘀 生新、收缩子宫之功效,主治月经不调、胎漏难产、行经腹痛及产后淤阻等证,素有“血家圣 药”、“经产良药”之称。益母草中主要含有生物碱类、二萜类、甾醇、黄酮类、有机酸、脂 肪酸类等成分。益母草中生物碱以益母草碱和水苏碱为主[1]。药理作用研究证明,益母草 中的主要有效成分益母草碱(leonurine)具有显着的直接扩张外周血管、增加血流量、抗血 小板聚集活性等作用[2],可有效的降低血液黏度和提高红细胞的变形能力,还可调经止血,保 护心肌缺血再灌注损伤。在《中国药典》[3]]及各级别标准中,益母草药材和益母草制剂的 质量控制均是以总生物碱为指标,文献[4],5]则采用雷氏盐剩余比色法测定益母草中盐酸水 苏碱。而对于益母草碱的含量却没有要求,这样不能保证益母草及其制剂的安全、有效。以 益母草为原料的多种制剂,如益母草胶囊、益母草冲剂、益母草口服液、益母草浸膏、益母 草片等都是临床上的常用品,除个别品种在《中国药典》2005 年版增加了含量测定项目外, 多数品种无统一标准,有的品种则无含量测定要求,使市售的产品质量得不到保证。所以建 立一个以益母草碱为指标直接检测益母草药材及其制剂的统一的质量标准是很有意义的。 本文尝试建立益母草碱的高效液相色谱直接检测方法。 1 仪器与材料 高效液相色谱仪 LabAlliance,LabAlliance 紫外检测器 Model5000,PhenomenexC18 柱(4].6mm×250mm,5μm),Anastarm),Anastar 色谱工作站;紫外 分光光度计,SHIMADZU 公司,UV24]01PC。甲醇为一级色谱纯;益母草碱对照品(购于安徽 省新星药物开发有限责任公司,纯度为 99%);益母草(购于天津市南开区协和药店,经我校中 药学院中药鉴定教研室张丽娟副教授鉴定)。 2 方法与结果 2.1 紫外光谱最大吸收测定在 200~4]00nm 之间进行全波长扫描,扫描图如图 1 所示, 益母草碱在 215nm 和 277nm 处均有吸收峰,最大吸收 277nm,故选用 277nm 作为高效 液相测定的波长。 2.2 色谱条件色谱柱:PhenomenexC18 柱(4].6mm×250mm,5μm),Anastarm),流动相:甲醇 pH=1.7 的醋酸/醋酸钠缓冲溶液(体积比 85∶15),流速:0.6mL·min-1,检测波长:277nm, 灵敏度:0.1AUFS,柱温:25℃,进样量:20μm),AnastarL。 2.3] 对照品溶液的制备精密称取盐酸益母草碱 0.6mg,溶于 25mL 流动相中,摇匀,制得 0.024]mg·mL-1 对照品溶液。分别取对照品溶液 0.5、1.0、1.5、2.0、5mL 溶于 5mL 流动相中,分别摇匀,得质量浓度分别为 00%;10024]、0.004]8、0.0072、0.0096、0.024]mg·mL-1 的对照品溶液。各用微孔滤膜 滤过后,按“2.2.1”项下的色谱条件进样测定(HPLC 分析如图 2 所示),测得各溶液峰面积,计 算得回归方程:C=2.222×10-8A-6.213]×10-4],r=0.9998。益母草碱在 00%;10024]~0.024]mg·mL-1 间呈现良好的线性关系。 图 1 全波长扫描图(略) Fig.1Wavelengthscanningofmotherwortalkaloids 图 2 对照品 HPLC 分析图(略) Fig.2HPLCchromatogramofreferencesubstance 2.4] 样品溶液的制备精密称取益母草提取物粗品 2.2mg,溶于 10mL 流动相中,摇匀即 得。 2.5 样品溶液的测定取样品溶液用微孔滤膜滤过后,按“2.2.1”项下的色谱条件进样测定, 测得溶液的峰面积为 10993]98,计算质量分数为 10.82%,在原药材中的质量分数为 0.015%。 2.6 精密度试验取同一样品溶液,按“2.2.1”项色谱条件下重复进样 6 次,测得峰面积分 别为 11064]69、111084]3]、1099260、1106190、1103]04]4]、1112296,平均峰面积 为 11063]50.3],计算得 RSD=0.98%。表明仪器精密度符合要求。 2.7 稳定性试验取同一样品溶液于室温下在配制后的 0、2、4]、6、8、10、12h,按 “2.2.1”项下的色谱条件进样测定,测得峰面积分别为 11084]69、10993]51、1120020、1123]215、11103]62、11094]72、113]7277,平均 峰面积为 11154]52.3],结果 RSD=1.11%,可见供试品溶液在室温条件下 12h 内稳定。 2.8 重现性试验取同一样品溶液 6 份,按“2.2.1”项下色谱条件分别测定测得质量分数分 别为 10.82%、100%;183]%、10.79%、10.80%、10.81%、10.83]%,平均为 10.81%,RSD=0.15%。 2.9 加样回收率试验取益母草碱粗制品 3].6mg,用流动相溶解后,精密加入益母草碱对 照品 0.4]mg,溶液适量,置于 25mL 容量瓶中,以流动相定容至刻度,摇匀。再按样品测定方 法操作测定,测得 6 次的峰面积分别为 790165、7864]92、8073]4]3]、810706、7993]24]、813]3]3]8,平均峰面积为 801228, 结果计算回收率为 100.08%,RSD=1.54]%。 3] 讨论 3].1 波长的确定在 200~4]00nm 之间进行全波长扫描,发现有两个吸收峰,215nm 和 277nm,但是 215nm 有可能受到甲醇吸收的影响,而且在 277nm 处没有其他成分的干扰, 所以选择最大吸收波长 277nm 作为检测波长。 3].2 色谱条件的建立分别考察了不同体积比的甲醇水、甲醇水三乙胺、甲醇水冰 醋酸、甲醇缓冲溶液等流动相,最终选择甲醇缓冲溶液作为流动相。选择用酸性流动相,是 因为益母草中益母草碱的存在形式有可能有两种,即益母草碱单体及其盐类,利用酸性流动 相可以转化成盐类一种形式,测定时只出现单一的峰。选择缓冲溶液,是因为缓冲溶液是一 个平衡体系,比较稳定,有利于实验的进行。 3].3] 本文是在完成了分离益母草碱和水苏碱的基础上实现了益母草碱的高效液相色谱 的直接检测方法,为益母草药材的质量控制及其他益母草制剂的质量控制提供了依据。该方 法简便易行,结果准确可靠。 尊敬的朋友：此篇文章由本站老师独家原创写作，版权归会员所有，普通 VIP 会员无 权查看，服务咨询电话：0825-6698000。 【摘要】中药炮制是根据中医药理论，依照辩证施治用药的需要和药物自身性质，以 及调剂、制剂的不同要求，所采用的一项制药技术。今天，研究它的人越来越多，本文就 着重简谈下中药炮制与临床疗效。 【关键词】中药炮制影响 一、中药炮制的目的和意义 中药炮制是多方面的，有多种方法。对一般药材炮制加工而言，往往是一种炮制方法 或者炮制一种药物有几方面的意义，这些虽有主次之分，但彼此之间存在密切关系。 根据处方、调剂和制剂的需要，而进行加工处理的过程，其目的在于除去杂质，利于 储藏便于调剂和服用，降低有毒成分及不良反应，增强药物疗效，改变药物性能。如蜜灸 款冬花，蜂蜜的协同作用可增强其润肺止咳的作用。 中药炮制的方法不同，其功效也不同。所以要求临床处方必须对症。如当生用者而用 炙，当炙者而生用。例如：大黄，临床用药时必须十分注意生用炙用。生用气味重浊，当 生用而不守，直达下焦，泻下作用峻烈，易伤胃气。据试验分析结果，大黄经酒炒后，结 合性蒽醌有所减少，泻下作用弱于生大黄，熟大黄结合性大黄酸显著减少，鞣质只减少一 部分，因此，泻下作用缓和，收敛力亦有减弱。所以在临床上只有掌握大黄的各种炮制作 用才能正确应用，根据病情辩证施治，合理的选择炮制品，对症选药，从而提高药物应有 的疗效。 一、提高溶出率，增强药物疗效 有些药物必须经过炮制，有效成分才能溶出。其成分的理化性质、含量或各成分之间 的比例都要发生改变，从而提高疗效，使临床用药更加有效。药物炮制所产生的增强作用， 大多早已被现代科学所验证，现实它的合理性。例如：何首乌，生用性兼备通泄，多用于 解毒、滑肠，而加黑豆汁蒸制后，所含具泻下作用的成分-结合性蒽醌类衍生物水解成无泄 下作用的游离蒽醌类衍生物，还原糖也增加。故制品无滑肠作用，而主补肝肾，具有明显