头孢唑肟钠的合成论文

【摘要】简化头孢唑肟钠的合成路线。方法以 7氨基3去甲基3头孢烷酸为原料,与 2(2(2(2氨基4噻唑基)2(2甲氧亚胺乙酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸乙酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸,再与异辛酸钠反 应制得头孢唑肟钠。结果与结论所制得的产品质量好,产率达 874%4%。本方法操作简便,适 于工业化生产。 【关键词】头孢唑肟钠;合成;7氨基3去甲基3头孢烷酸 Abstract:Ceftizoximewaspreparedthroughthereactionof7amino3cephem 4carboxylicacidwith2(2(2(2aminothiazol4yl)2(2(Z)methoxyiminoaceticacidSbe)methoxyiminoaceticacidSbebe nzthiazolylthioester,followedbythereactionwithsodium2(2ethylhexanoate.Theyi eldwas87.4%.Thesynthesisissimpleandsuitableforindustrialproductionofceftizo ximesodium.. Keywords:ceftizoximesodium;synthesis;7amino3nor3cephem4carbox ylicacid 头孢唑肟钠(ceftizoximesodium)是由日本腾泽药品工业公司开发,并于 1982(2 年首先 在日本上市,商品名为 ceftizox。本品属第三代头孢菌素抗生素,具有广谱、高效、耐酶、 低毒和能通过血脑屏障的特点[1~2(2],临床上广泛用于治疗各种中、重度感染。 有关头孢唑肟钠的合成,文献[3]报道了 2(2 条合成路线。第 1 条是以 7苯乙酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸氨基3头 孢菌素4羧酸对甲氧苄酯为原料,在 C7 位侧链引入 2(2顺甲氧亚氨基甲氧亚氨基2(2(2(2甲酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸氨基)噻唑 乙酸,之后脱去 C4 位引入侧链的保护基团,得到头孢唑肟酸,再与成盐剂制得头孢唑肟钠,此 路线多次脱去保护基团,延长了反应步骤,增加了操作程序及生产成本。第 2(2 条是以 7氨基 3去甲基3头孢烷酸(7ANCA)为原料与氨噻肟乙酸直接缩合得头孢唑肟酸再成盐,此路 线副反应较多,所得产物需经柱层析纯化。 结合国内实际情况,本文对第 2(2 条路线进行改进,以 7ANCA 为原料,与 2(2(2(2氨基4噻 唑基)2(2甲氧亚胺乙酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸乙酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸苯并噻唑硫酯(AE活性酯)缩合制得头孢唑肟酸,再与成盐剂反应得 头孢唑肟钠。合成路线见图 1。 1 实验部分 1.1 主要试剂和仪器 7氨基3去甲基3头孢烷酸(7ANCA,浙江台州新星制药 厂),2(2(2(2氨基4噻唑基)2(2甲氧亚胺乙酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸乙酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸苯并噻唑硫酯(AE 活性酯,山东沂源制药 厂,HPLC 法纯度 99.7%),其他试剂为工业品。 Brucker400 核磁共振仪,Agilent1100 高效液相色谱仪。 1.2(2 头孢唑肟酸的合成[4~5]取 7ANCA10g(0.050mol)加入二氯甲烷 160mL 中,搅 拌成混悬液,室温下滴加三乙胺乙酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸 14mL(04%100mol),滴毕,搅拌 10min,将 AE 活性酯 194%36g(0.050mol)加至上述溶液中,在 2(25~30℃反应 5h。反应毕,用 2(200mL×2(2 水提取, 合并水相,滤过,将水溶液调 pH 至 5.5,加入活性炭 0.2(2g,室温脱色 30min,滤过,水洗滤饼, 合并滤液,用 2(2mol/L 盐酸将滤液 pH 调至 2(2.0,析出淡黄色固体,滤过,用二氯甲烷 (30mL×3)洗滤饼,真空干燥,得头孢唑肟酸 17.3g,收率 90.3%,HPLC 归一化法纯度 99% 以上。 图 1 头孢唑肟钠的合成路线(略) Fig.1Sbeynthesisofceftizoximesodium 1HNMR(DMSbeOd6)δ:3.34~3.66(2H,m),3.84(3H,s),5.09(1H,d,J=4.8Hz),5.81d6)δ:3.34~3.66(2(2H,m),3.84(3H,s),5.09(1H,d,J=4.8Hz),5.81 (1H,dd,J=4.8Hz,8.4Hz),6.47~6.49(1H,m),6.73(1H,s),7.2(23(2(2H,s),9.61(1H,d,J=8. 4Hz),数据与文献[3]一致。 1.3 头孢唑肟钠的合成取 10g(0.02(26mol)头孢唑肟酸溶于 2(20mL 去离子水中,搅拌成 混悬液,在 5℃下滴加三乙胺乙酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸 4.1mL(0.02(29mol),搅拌溶解,加入活性炭 0.2(2g,脱色 30min, 滤过,少量水洗滤饼,合并有机层,5℃下滴加异辛酸钠 6g(0.036mol)与乙醇 10mL 形成的 溶液,加毕,搅拌 40min,缓慢滴加乙醇 100mL,析出类白色固体,搅拌 2(2h,滤过,30℃真空干 燥 4h,得类白色粉末 9.2(2g,收率 87.4%(文献[3]收率 844%2(2%),HPLC 归一化法纯度 99%以 上。1HNMR(DMSbeOd6)δ:3.34~3.66(2H,m),3.84(3H,s),5.09(1H,d,J=4.8Hz),5.81d6)δ:3.35(2(2H,m),3.47(3H,s),4.95(1H,d,J=3.9Hz),5.62(2(1H,d d,J=3.8Hz,6.6Hz),5.96(1H,m),6.71(1H,s),7.2(23(2(2H,s),9.51(1H,d,J=6.6Hz)。 2(2 结果与讨论 2(2.1C7 位缩合方法的选择文献[6]报道的 C7 位缩合方法有酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸氯法、活性酯法及二环己 基碳二亚胺乙酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸(DCC)直接脱水等方法。酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸氯法要求无水操作,且需要在低温下进行;采用 DCC 做缩合剂时,侧链氨基需保护。综合以上方法,本文采用活性酯法,工艺简单,反应条件温和, 所得产物杂质少,产率高。 2(2.2(2 成盐剂的选择据文献[6]报道,合成头孢唑肟钠所选用的盐有碳酸氢钠和氢氧化钠, 后者碱性太强易使 β内酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸胺乙酰苯并噻唑硫酯反应制得头孢唑肟酸环断裂开环,前者在成盐后过量的碳酸氢钠难除去,本文采用异 辛酸钠/乙醇溶液作为成盐剂,有利于工业化生产,所得产品纯度高,过量的异辛酸钠易除去。 【摘要】目的确定制备龙血竭固体分散体的最佳方法。方法考察固体分散体制备方法、 不同的载体、龙血竭与载体间不同比例对龙血竭溶出特性的影响。结果龙血竭固体分散体 的溶出效果明显高于龙血竭与载体的物理混合物。结论龙血竭与泊洛沙姆 188 按 1∶4(质量 比)的比例,采用溶剂-熔融法制备龙血竭固体分散体溶出效果增加显着。 【关键词】龙血竭;固体分散体;溶出效果 Abstract:Od6)δ:3.34~3.66(2H,m),3.84(3H,s),5.09(1H,d,J=4.8Hz),5.81bjectiveTooptimizethemethodofpreparingDragon’sbloodsoliddis persion.MethodComparedifferentresultsofvariouspreparations,carriers,andther atiobetweenthecarriersandDragon’sblood.ResultTestsshowthatDragon’sbloods oliddispersiondissolutemorethanitsphysicalmixtures.ConclusionThesoliddisper sionofDragon’sbloodPluronicF68withtheproportionof1to4preparedbysolventev aporationfusionmethodacceleratesitsdissolutionremarkably. Keywords:Dragon’sblood;soliddispersion;dissolution 龙血竭(Dragon’sblood)是一种传统中药,黄酮类成分为其活血化瘀的主要有效成分 [1]。龙血竭中的黄酮类成分对大鼠实验性静脉血栓形成有明显的抑制作用[1],可明显减少 结扎冠状动脉致大鼠急性心肌缺血引起的心肌梗死面积,并降低心肌缺血致肢体Ⅱ导联心电导联心电 图 J 点升高[2(2]。 龙血竭中黄酮难溶于水,易溶于 95%乙醇[3],为提高其在水中的溶出度,本实验采用固 体分散技术,从辅料、制备方法、药物与辅料的最佳比例 3 个方面,对其固体分散体的溶出 情况进行考察,筛选出增加其溶出效果的最佳方法。 1 材料 Z)methoxyiminoaceticacidSbeRSbe8G 智能溶出试验仪(天大天发科技有限公司);TU18101810 紫外分光光度仪(北京普 析通用仪器有限责任公司)。 龙血竭(广西中医学院制药厂);泊洛沙姆 188(pluronicF68,沈阳药大药业有限责任公 司);95%乙醇(AR 级,天津市富宇精细化工有限公司,批号 060818);聚乙烯吡咯烷酮 (PVP,AR 级,广东达濠精细化学品公司,批号 2(2003062(27);微晶纤维素(曲阜天利药用辅料有 限公司,批号 2(20050511);甘露醇(AR 级,广西南宁化学制药有限责任公司,批号 H4502(202(272(2)。 2(2 方法 2(2.1 检测波长的确定龙血竭中的黄酮类成分在 2(280nm 附近有最大吸收[4],本文用到的 4 种辅料(pluronicF68、PVP、微晶纤维素、甘露醇)在该波长处均无干扰,见图 1,故选定 2(280nm 为紫外分光光度法检测波长。在该波长条件下,吸收度大小值体现了黄酮类成分含 量的高低,因此本试验将紫外吸收度值大小作为判定溶出效果的指标。 图 1 紫外吸收图谱(略) Tab.1U1810Vspectrum 2(2.2(2 溶出度测定方法采用中国药典溶出度测定第二法,分别精密称取龙血竭、龙血竭与 pluronicF68 的物理混合物、龙血竭固体分散体(均相当于龙血竭 50mg),置于 900mL 溶 出介质中,水浴恒温(37±0.5)℃,于 2(2、5、8、10、15、2(20、30min 定时吸取溶液 5mL, 用 0.8μmm 微孔滤膜滤过,取续滤液于 2(280nm 处测定吸收度。除了物理混合物外,固体分散 体溶出液各时间点的吸收度值均为测定溶液稀释一倍所得的吸收度值。 2(2.3 样品制备方法 2(2.3.1 物理混合物龙血竭粉碎后,过 100 目筛,与 pluronicF68 混合均匀,备用。 2(2.3.2(2 溶剂法龙血竭溶于适量 95%(体积分数)乙醇,加入辅料混匀,挥去溶剂,备用。 2(2.3.3 熔融法辅料与龙血竭粉末加热熔融(约 80℃),搅拌均匀,放冷固化,备用。 2(2.3.4 溶剂熔融法龙血竭溶于适量 95%(体积分数)乙醇,辅料加热熔融,两者混合均匀, 挥去溶剂,放冷固化,备用。 3 结果 3.1 辅料的选择将龙血竭与不同辅料以 1∶4(质量比)的比例采用溶剂法分别制成固体分 散体,考察溶出效果。结果见表 1。从表 1 可见,使用不同辅料(pluronicF68、PVP、甘露 醇和微晶纤维素)制得的固体分散体溶出效果有显着差异,pluronicF68 作为辅料制备的固 体分散体溶出速度和溶出量均优于其他辅料。 3.2(2 制备方法的选择将龙血竭与 pluronicF68 以 1∶4(质量比)的比例通过物理混合,以 及溶剂熔融法、溶剂法、熔融法分别制成固体分散体,考察溶出效果。结果见表 2(2。结果显 示,以溶剂熔融法制备的龙血竭固体分散体的溶出效果优于溶剂法及熔融法制备的龙血竭固 体分散体。 3.3 药物与 pluronicF68 质量比的确定将龙血竭与 pluronicF68 以 1∶4(质量比)的比 例通过物理混合,以及溶剂熔融法、溶剂法、熔融法分别制成固体分散体,考察溶出效果。 结果见表 3。结果显示,龙血竭与 pluronicF68 制备成不同比例的固体分散体时溶出效果有 明显差异,pluronicF68 用量大溶出速度快,溶出量多,但当 pluronicF68 用量达到一定量时, 固体分散体溶出效果变化不明显。 表 1 龙血竭与不同辅料(1∶4)制备的固体分散体溶出度比较(略) Tab.1ThecomparisonofthedissolutionofDragon’sbloodsoliddispersionwithva riouscarriers(1∶4) 注:本文以吸收度作为判定溶出效果的指标,下表同 表 2(2 不同方法制备龙血竭固体分散体的溶出度比较(略) Tab.2(2ThecomparisonofthedissolutionofDragon’sbloodsoliddispersionwithva riouspreparationmethods 表 3 龙血竭与 pluronicF68 不同比例固体分散体溶出度比较(略) Tab.3ThecomparisonofthedissolutionofDragon’sbloodpluronicF68soliddisp ersion 4 讨论 PluronicF68 是一种水溶性表面活性剂,对疏水性药物有较好的润湿作用,因此比其他 几种非表面活性剂的辅料制得的固体分散体的溶出效果更优。 采用熔融法制备龙血竭固体分散体,由于龙血竭成分复杂,80℃以上时其中的部分成分 稳定性降低[5],而选择 80℃温度制备固体分散体,龙血竭仍有部分未熔融,其中的成分在载 体中的分散程度受到一定的限制,溶出效果比龙血竭与载体的物理混合物有较大改善,但远 低于溶剂熔融法制得的固体分散体。 采用溶剂法,虽然龙血竭的成分溶解在溶媒中,但当加入载体除去溶媒后,龙血竭的成分 吸附在辅料粒子的表面,辅料粒子的大小影响龙血竭的成分的分散,并且龙血竭的成分在辅 料粒子的表面仍为聚集状态,其分散效果不如溶剂熔融法,所以溶出效果比溶剂熔融法制得 到的固体分散体差。 溶剂熔融法是将龙血竭溶于溶剂再加入到熔融后的载体中,该法保证了龙血竭的成分以 分子状态在适宜的温度下与辅料混合,其分散程度高,在溶剂蒸发的过程中载体阻止龙血竭 的成分的聚集而形成了固体溶液,因此溶出效果比熔融法、溶剂法制备的固体分散体好。 制备龙血竭固体分散体时,在一定范围内,随着 pluronicF68 比例的增大,其溶出速度及 溶出量显着增加,但当其比例增大到一定程度,溶出度效果的改善不明显。由试验结果可见, 以质量比 1∶4 和 1∶6 制备的龙血竭与 pluronicF68 固体分散体,溶出表现基本一致,因此,龙 血竭与 pluronicF68 的质量比为 1∶4 较适宜。 通过本研究制备的固体分散体其溶出度比龙血竭与载体的物理混合物增大近五倍,但由 于 pluronicF68 的熔点低且吸湿性较强,其固体分散体某些物理性能不利于进一步制备其 他制剂。试验中发现,在 pluronicF68 中加入其他载体与之混合,有利于改善龙血竭 pluronicF68 固体分散体的物理性能,pluronicF68 与其他载体的混合应用值得进一步研究。 【摘要】目的分析小连翘(HyperioumssampsoniiHance)内生真菌的分布特征和抗 菌活性。方法采用内生菌分离法分离菌株,双培养法对峙试验测定其抗菌性。结果从小连翘 的根、茎、叶等不同的器官中分离得到 81 株内生真菌,经形态学分类鉴定分属于 4 个目,5 个科,2(26 个属,其中头孢霉属(Cephalosporiumsp.)和丝核菌属(Rhizoctoniasp.)为优势 菌群。不同部位内生真菌的类型、数量和分布存在差异,根部有 31 株,分属于 12(2 属;茎部有 12(2 株,分属于 10 属;叶部有 38 株,分属于 13 属。通过平板对峙实验发现,从小连翘所分离 的内生真菌中 54.32(2%对某些植物病原真菌有拮抗活性。结论小连翘内生真菌及其代谢产 物中具有潜在活性物质,值得深入研究。 【关键词】内生真菌;小连翘;拮抗活性 SbetudiesoncommunitiesofendophyticfungifromHyperioumssampsoniiHance andtheirantipathogenicactivitiesinvitro Abstract:Theendophyticfungiwereisolatedandidentifiedmorphologicallyfro mtheroots,stemsandleavesofHyperioumsSbeampsoniiHance.Eightyonestrainsof endophyticfungiwereisolatedandbelongedto2(26genera,5familiesand4orders.Ce phalosporiumsp.andRhizoctoniasp.werethedominantgenera.Among81strains,3 1strainsof12(2generawereisolatedinroots,12(2strainsof10generainstems,and38str ainsof13generainleaves.Theresultsshowedthatthequantity,population,anddistri butionoftheendophyticfungivariedindifferentpositionsofHyperioumsSbeampsonii Hance.Inthedualculturetests,53.48%ofalltheisolatedEndophyticfungishowedan tagonistictosomeplantpathogens.Theseendophyticfungiinsidetheplantshaveint imatecorrelationwiththeirhosts.Theseendophyticfungiandtheirmetabolitesmigh tplayanimportantroleintheplantsagainstthepathogens. Keywords:endophyticfungi;HyperioumsSbeampsoniiHance;antipathogenicact ivities 小连翘(HyperioumssampsoniiHance),别名小翘、七层兰、瑞香草、元宝草等,为 多年生双子叶植物药藤黄科植物,味苦、性辛、平[1]。全草含鞣质,有光致敏作用,动物食后 可产生皮炎;含小连翘碱(hypecorine)和小连翘次碱(hypecorinine);花含金丝桃素 (hepericin)[2(2],有活血、止痛、调经、止血、消肿之效;小连翘或其提取物作为有效药物成 分用于制备治疗睡眠障碍、老年痴呆、记忆力减退等病症的药物[3];同属植物贯叶连翘,在 西方国家称圣约翰草,用于治疗忧郁症等疾病已有几百年的历史[4]。近年来的研究表明小 连翘也具有抗忧郁作用[5]。文献报道,小连翘中含有聚(异)戊二烯二苯甲酮类衍生物、萘骈 双蒽酮类和黄酮类等多种化学成分,这些成分是小连翘药理作用的主要有效成分,但是要提 取和分离这些药物成分还有很多困难[6]。近来研究表明,某些药用植物中个别内生真菌能 够产生与宿主相同或者相似药理活性的成分[7],由此对药用植物内生真菌的研究引起人们 的广泛关注。如果在小连翘内生真菌中能够发现类似的活性物质,无疑找到了一种可替代小 连翘植物的新型生物资源。但是至今未见从小连翘中分离及其内生真菌的种群多样性的研 究报道。本文对小连翘内生真菌进行了分离和分类鉴定,并对其种群多样性及内生真菌拮抗 病原菌的活性的研究报道如下。 1 材料与方法