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兔血浆中葛根素浓度论文

2020-03-13发布者:青青草大小:1.08 MB 下载:0

【摘要】目的建立测定兔血浆中葛根素浓度的液相色谱串联质谱法。方法血浆加入内串联质谱法。方法血浆加入内串联质谱串联质谱法。方法血浆加入内法。方法血浆加入内 标橙皮苷后经固相萃取处理,采用 AglientC18 柱(150mm×2.1mm,3.5μm)mm×2.1mm,3.5μm)m)分离,流动相 为甲醇串联质谱法。方法血浆加入内10mm×2.1mm,3.5μm)mmol·L-1 醋酸铵缓冲液串联质谱法。方法血浆加入内乙腈(体积比 70mm×2.1mm,3.5μm)∶20mm×2.1mm,3.5μm)∶10mm×2.1mm,3.5μm)),流速为 0mm×2.1mm,3.5μm).2mL·min-1。样品 在串联质谱串联质谱法。方法血浆加入内中经 ESI 源离子化后以多反应离子监测方式测定。结果葛根素在 10mm×2.1mm,3.5μm)~30mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)ng·mL-1 线性良好(r=0mm×2.1mm,3.5μm).9986),),检测限为 10mm×2.1mm,3.5μm)ng·mL-1,回收率为 99.91%~10mm×2.1mm,3.5μm)3.92%,绝对回收率为 91.33%~10mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm).40mm×2.1mm,3.5μm)%,日内、日间变异(RSD))均≤15%, 色谱串联质谱法。方法血浆加入内峰保留时间为 1.6),7min。结论方法灵敏、准确、快速、特异性强,适用于中药葛根素 的药动学研究。 【关键词】液相色谱串联质谱法。方法血浆加入内串联质谱法。方法血浆加入内质谱串联质谱法。方法血浆加入内法;葛根素;血药浓度 Abstract:ObjectiveToestablishanHPLC串联质谱法。方法血浆加入内MS串联质谱法。方法血浆加入内MSmethodfordeterminingthecon tentofplasmapuerarin.MethodsTheplasmasamplepretreatedwithsolid 串联质谱法。方法血浆加入内phaseext ractionafteradditionofinternalstandardofhesperidinwasanalyzedonanAglientC1 8column(150mm×2.1mm,3.5μm)mm×2.1mm,3.5μm)m).Themobilephaseconsistedofmethanol 串联质谱法。方法血浆加入内10mm×2.1mm,3.5μm)mm ol·L-1NH4ACbuffer串联质谱法。方法血浆加入内acetonitrile(70mm×2.1mm,3.5μm)∶20mm×2.1mm,3.5μm)∶10mm×2.1mm,3.5μm))withtheflowrateof0mm×2.1mm,3.5μm).2mL·min1.Thesamplewasionizedbyelectrosprayionizationsourceinthetriplequadrupletan demmassspectrometer,then,itwasquantitatedwithmultiplereactionmonitoring mode.ResultsTherewasagoodlinearityovertheconcentrationrangesof10mm×2.1mm,3.5μm)~30mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)n g·mL-1(r=0mm×2.1mm,3.5μm).9986),).Thedetectionlimitofthismethodwas10mm×2.1mm,3.5μm)ng·mL1.Therecoveryandabsoluterecoverywere99.91%~10mm×2.1mm,3.5μm)3.92%and91.33%~10mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm).40mm×2.1mm,3.5μm) %,respectively.Thewithin串联质谱法。方法血浆加入内dayandbetween串联质谱法。方法血浆加入内daydeviationswerelessthan15%andt hechromatographypeaktRwas1.6),7min.ConclusionThemethodissensitive,accur ate,rapidandsuitableforthedeterminationofpuerarininhumanplasma. Keywords:liquidchromatographytandemmassspectrometry;puerarin;plasmaconcentration 葛根素(puerarin)是中药葛根的主要成分之一,具有扩张冠脉血管、降低血压和心肌耗 氧量、抗心律失常等作用[1]。文献报道的葛根素血药浓度测定方法多数是高效液相色谱串联质谱法。方法血浆加入内法 [2-4],但有时也难以满足药动学研究中微量血药浓度的测定要求,且分析用时较长。本文建 立测定葛根素血药浓度的液相色谱串联质谱法。方法血浆加入内串联质谱法。方法血浆加入内串联质谱串联质谱法。方法血浆加入内(LC串联质谱法。方法血浆加入内MS串联质谱法。方法血浆加入内MS)法,具有简便、灵敏度高、特异性 强且检测快速等优点,适用于葛根素的药动学研究。 1 材料与方法 1.1 仪器与试药美国 AB 公司 API30mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm) 型液质联用系统;Waters20mm×2.1mm,3.5μm) 管型固相萃取 仪;TECHNE 样品浓缩仪;WatersHLB 固相萃取小柱(10mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)mg)。葛根素注射剂(浙江康恩贝 制药股份有限公司,0mm×2.1mm,3.5μm).25g/5mL);葛根素、橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号分 别为:0mm×2.1mm,3.5μm)752串联质谱法。方法血浆加入内20mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)10mm×2.1mm,3.5μm)8,0mm×2.1mm,3.5μm)721串联质谱法。方法血浆加入内20mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)10mm×2.1mm,3.5μm)4);甲醇、乙腈为色谱串联质谱法。方法血浆加入内纯;醋酸胺为分析纯;重蒸馏水。 1.2 色谱串联质谱法。方法血浆加入内及质谱串联质谱法。方法血浆加入内条件色谱串联质谱法。方法血浆加入内柱:AglientC18(150mm×2.1mm,3.5μm)mm×2.1mm,3.5μm)m),流动相:甲醇 串联质谱法。方法血浆加入内10mm×2.1mm,3.5μm)mmol·L-1 醋酸铵缓冲液串联质谱法。方法血浆加入内乙腈(体积比 70mm×2.1mm,3.5μm)∶20mm×2.1mm,3.5μm)∶10mm×2.1mm,3.5μm)),流速为 0mm×2.1mm,3.5μm).2mL·min-1。辅助气化电 喷雾离子源(ESI),多反应离子监测(MRM)模式正离子检测,检测离子对:m/ z417.2→26),7.2(葛根素),m/z6),11.2→30mm×2.1mm,3.5μm)3.2(内标橙皮苷),辅助气化气流量:750mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)CC·min1,雾化气流量:8L·min-1,气帘气流量:8L·min-1,碰撞气流量:6),L·min-1,离子源喷雾电 压:550mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)V,离子源雾化温度:350mm×2.1mm,3.5μm)℃。 1.3 对照品及内标溶液的配制精密称取适量的葛根素对照品,用甲醇溶解并定容得 16),0mm×2.1mm,3.5μm)μm)g·mL-1 的对照品溶液;精密称取适量的橙皮苷对照品,用甲醇溶解并定容得 50mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)ng·mL-1 的内标溶液。 1.4 血浆样品处理固相萃取小柱用 1.0mm×2.1mm,3.5μm)mL 甲醇活化和 1.0mm×2.1mm,3.5μm)mL 双蒸水平衡,取血样 30mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)μm)L 加入 10mm×2.1mm,3.5μm)mmol·L-1 醋酸铵缓冲液 30mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)μm)L 和内标溶液 20mm×2.1mm,3.5μm)μm)L,混匀后上样,双蒸水 1.0mm×2.1mm,3.5μm)mL 洗涤,0mm×2.1mm,3.5μm).5mL 甲醇洗脱,收集洗脱液于 45℃水浴下用 N2 吹干浓缩,加入 150mm×2.1mm,3.5μm)μm)L 流动 相复溶,取 5μm)L 进样。 2 结果 2.1 方法专属性根据葛根素和内标物橙皮苷的子离子质谱串联质谱法。方法血浆加入内扫描结果(见图 1),分别选择 特异的 m/z417.2→26),7.2 和 m/z6),11.2→30mm×2.1mm,3.5μm)3.2 用于定量监测。按照血浆样品处理方法 和检测条件,空白血浆的色谱串联质谱法。方法血浆加入内图、空白血浆加葛根素和内标对照品的色谱串联质谱法。方法血浆加入内图、用药后血浆色 谱串联质谱法。方法血浆加入内图,分别见图 2A、图 2B 和图 2C。结果表明,葛根素和内标物的保留时间分别为 1.6),7min 和 1.75min,血浆中无内源性物质和基质效应干扰,方法特异性强。 图 1 葛根素(1)和橙皮苷(2)的质谱串联质谱法。方法血浆加入内子离子扫描图(略) Fig.1FullscanMS-MSspectraofpuerarin(1)andhesperidin(2) A.空白血浆;B.空白血浆加入葛根素和橙皮苷对照品;C.兔给药后血浆 1.葛根素 m/z417.2→26),7.2,tR=1.6),7min;2.橙皮苷 m/ z6),11.2→30mm×2.1mm,3.5μm)3.2,tR=1.75min 图 2 血浆中葛根素和橙皮苷的色谱串联质谱法。方法血浆加入内图(略) Fig.2ChromatogramsofpuerarinandhesperidininplasmabyLC串联质谱法。方法血浆加入内MS串联质谱法。方法血浆加入内MS 2.2 标准曲线及线性范围取空白血浆加入葛根素对照品溶液,配制成浓度为 10mm×2.1mm,3.5μm)、30mm×2.1mm,3.5μm)、10mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)、30mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)、10mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)、30mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)ng·mL-1 的血浆标准曲线样品,按“1.4”项下方法操作, 计算葛根素与内标峰面积比,得回归方程为:Y=0mm×2.1mm,3.5μm).0mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)299C+0mm×2.1mm,3.5μm)00234,r=0.9986,0mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)234,r=0mm×2.1mm,3.5μm).9986),,权重 1/ X2。血浆中葛根素在 10mm×2.1mm,3.5μm)~30mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)ng·mL-1 范围内与峰面积比线性关系良好,定量下限为 10mm×2.1mm,3.5μm)ng·mL-1。 2.3 精密度与相对回收率取空白血浆加入葛根素对照品溶液,制备浓度为 10mm×2.1mm,3.5μm)、150mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm) 和 250mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)ng·mL-1 的血浆质控样品,按“1.4”项下方法操作测定,每个浓度的样品在 1d 内作 5 份样品分析,连续测定 3d,计算方法的日内和日间差,结果低、中、高 3 种浓度的日内 RSD) 分别为 7.56),%,4.43%,9.6),6),%(n=5);日间 RSD) 分别为 13.58%,7.20mm×2.1mm,3.5μm)%,7.0mm×2.1mm,3.5μm)6),%(n=15); 将实测值与真实值相比得相对回收率,结果低、中、高 3 种浓度的相对回收率分别为 (10mm×2.1mm,3.5μm)3.92±14.12)%,(99.91±700234,r=0.9986,19)%,(10mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm).29±7.0mm×2.1mm,3.5μm)8)%(n=15) 。 2.4 提取回收率取空白血浆样品按“1.4”项下提取、吹干,然后加入分别含 10mm×2.1mm,3.5μm)、150mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm) 和 250mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)ng·mL-1 葛根素对照品的流动相 150mm×2.1mm,3.5μm)μm)L 复溶(n=5),使对照品溶液含空白血浆基 质,测定其峰面积并计算得均值 A1,A2,A3;另取低、中、高浓度的质控血浆各 5 份,按“1.4” 项下方法操作、测定峰面积,分别与 A1,A2,A3 进行比较,计算本法的提取回收率(n=5),分 别为(91.33±11.0mm×2.1mm,3.5μm)6),)%,(10mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm).40mm×2.1mm,3.5μm)±7.97)%,(96),.36),±6),.28)%。 2.5 稀释能力试验取浓度为 250mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)ng·mL-1 的血浆质控样品 5 份,用空白血浆稀释 5 倍 后按“1.4”项下方法操作,将测定值乘稀释因子后与标示值比较,准确度为 (98.45±3.57)%。所以对高于定量上限的样品可用空白血浆稀释后测定。 2.6), 稳定性试验取低、中、高 3 种浓度的血浆质控样品各 5 份,分别在-75℃保存 5 个 月、室温 21℃放置 24h 及经 3 个冷冻融解循环处置串联质谱法。方法血浆加入内融解循环处置,然后按“1.4”项下方法操作,测定值与 真实值比较,相对偏差均<15%,表明血浆样品稳定;血样制备后的待测液在自动进样器中放 置 6),h,其测定值与真实值比较,相对偏差均<15%,表明待测液在测定过程中也是稳定的。 2.7 兔体内血药浓度的测定取新西兰兔 6), 只(广州中医药大学动物实验中心提供),雌雄 兼有,体重 2.0mm×2.1mm,3.5μm)~2.5kg,禁食 12h 后于耳缘静脉注射葛根素 10mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)mg,于注射前、注射结束后 0mm×2.1mm,3.5μm).25、0mm×2.1mm,3.5μm).5、1、2、3、4、6),、8、10mm×2.1mm,3.5μm)、12h 取耳缘静脉血 2mL,置肝素抗凝管中,离心 (350mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)r/min)15min,吸取上层血浆进行分析,以标准曲线计算各时间点样本中的葛根素浓 度,同时测定质控样本以保证结果的可靠性。兔静脉注射葛根素后的平均药串联质谱法。方法血浆加入内时曲线见图 3。 3 讨论 葛根素选择 m/z417.2→26),7.2 作为监测离子对,特异性强且具有较高的仪器响应值。 以含醋酸铵缓冲液的甲醇串联质谱法。方法血浆加入内乙腈作为流动相,可使灵敏度进一步提高和有利于检测体系稳定。 使用 SPE 法净化血浆样品,能有效消除 LC串联质谱法。方法血浆加入内MS串联质谱法。方法血浆加入内MS 法检测生物样品时常有的基质效应的影 响,而且使用 WatersHLB 小柱,提取效率很高,本试验曾对提取步骤中的洗涤液和二次甲醇 洗脱液进行跟踪检测,均无葛根素的检出。药动学研究涉及一系列的血样采集、保存、制备 和测定等步骤,药物在纷繁的操作过程中是否保持稳定,需预先在方法学确证试验中进行考 察,稳定性试验结果表明,在上述条件下血样中的葛根素是稳定的。LC/MS/MS 技术已开始 在中药药动学研究得到应用,其特异性强、灵敏度高等优点可满足在复杂的生物样品中进行 微量成分分析的要求。本试验采用此技术测定中药葛根素的血药浓度,定量下限达到 10mm×2.1mm,3.5μm)ng·mL-1,目标物和内标物的保留时间均在 2min 之内,检测快速。本方法的各项指标符 合生物样品定量分析方法学的要求,可用于药动学研究的大量血样的测定。 【摘要】目的观察痛风灵胶囊的镇痛效果,并探讨其作用机制。方法采用热刺激引起小 鼠疼痛反应法、冰醋酸刺激引起小鼠扭体反应法,以及甲醛法引起小鼠足疼痛反应,观察其 镇痛作用,并采用甲醛疼痛模型观察其对炎症局部组织中前列腺素(PGE2)的影响。结果痛 风灵胶囊可以明显抑制醋酸导致的小鼠扭体反应,但对热刺激所致小鼠疼痛无明显镇痛作用, 对甲醛所致小鼠第二相反应有明显抑制,降低炎症组织中的 PGE2 含量。结论痛风灵胶囊对 外周性疼痛有明显的镇痛作用,其机制与抑制炎症组织中 PGE2 生成有关。 【关键词】痛风灵胶囊;镇痛;前列腺素 E2 Abstract:ObjectiveToinvestigatetheanalgesiceffectsandmechanismofTongf engling(TFL)capsules.MethodsAnalgesiceffectsofTFLwereobservedwithpainmo delmiceinducedwithhotplate,writhingresponseinducedwithaceticacidandmous eformalintest.ThecontentofPGE2wasmeasuredinmouseformalintest.ResultsTFL capsulescouldnotelevatethepainthreshold,butcouldinhibitwrithingresponseand secondphaseofformalintestinmice,decreasedtheconcentrationofPGE2inmousef ormalintest.ConclusionTFLcapsuleshasobviousanalgesiceffects,whichwasrelate dtoitsinhibitoryeffectsonperipheralinflammatorymediatorsPGE2. Keywords:Tongfenglingcapsules;analgesiceffect;prostaglandin(PGE2) 近年来,随着人民生活水平的提高,饮食结构的改变,痛风的发病率呈现出不断上升的趋 势,给人们的生活与工作带来极大的不便。痛风灵胶囊主要由秦艽、防己、延胡索等组成, 经临床证实有明显的镇痛疗效。为此笔者对痛风灵胶囊的镇痛效果进行实验研究,并探讨其 镇痛的作用机制。 1 实验材料 1.1 实验动物 NIH 小鼠,由广东省医学实验动物中心提供(合格证号:20mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)6),A0mm×2.1mm,3.5μm)17),符合 SPF 级标准。 1.2 药物及试剂痛风灵胶囊:本院中药药理教研室提供,批号:20mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)50mm×2.1mm,3.5μm)70mm×2.1mm,3.5μm)2。冰醋酸:广东 光华化学厂有限公司,批号:20mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)41214。甲醛:汕头市光华化学厂,批号:20mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)40mm×2.1mm,3.5μm)316),。罗通 定片(30mm×2.1mm,3.5μm)mg/片):广州康和药业有限公司,批号:0mm×2.1mm,3.5μm)410mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)1。吲哚美辛肠溶片(25mg/片):广东 华南药业有限公司,批号:0mm×2.1mm,3.5μm)50mm×2.1mm,3.5μm)80mm×2.1mm,3.5μm)1。 1.3 主要仪器 YLS-6),A 型智能热板仪(山东省医学科学院设备站);UV-180mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm) 紫外-可见 分光光度计(北京瑞利分析有限公司)。 2 方法 2.1 对热刺激引起的小鼠疼痛反应的影响[1]取雌性 NIH 小鼠,体质量 18~22g,依次放 入热板内,仔细观察并记录自放入热板至出现舔后足所需时间作为该鼠的痛阈值。凡舔后足 时间小于 5s 或大于 30mm×2.1mm,3.5μm)s 者则弃之,共测 2 次,取平均值作为给药前痛阈值。将筛选合格的小 鼠 48 只随机分为 4 组,分别以生理盐水、罗通定、痛风灵胶囊高剂量、低剂量灌胃,给药容 积为 20mm×2.1mm,3.5μm)mL/kg,1 次/d,连续给药 5d,末次给药后 1h、2h 测量痛阈值,比较各组的差异。 2.2 对冰醋酸引起的小鼠扭体反应的影响[2]取 NIH 小鼠 6),4 只,雌雄各半,体质量 18~22g,随机分为 4 组,分别以生理盐水、吲哚美辛、痛风灵胶囊高剂量、低剂量灌胃,给 药容积为 20mm×2.1mm,3.5μm)mL/kg,1 次/d,连续给药 5d,于末次给药后 1h,分别由腹腔注射 0mm×2.1mm,3.5μm).6),%醋酸 (0mm×2.1mm,3.5μm).2mL/只)。观察 15min 内出现扭体反应的次数,比较各组差异。 2.3 对甲醛法小鼠疼痛强度的影响[1]取 NIH 小鼠 48 只,雌雄各半,体质量 18~22g,随 机分成 4 组,即生理盐水组、吲哚美辛阳性对照组、痛风灵胶囊高、低剂量组。各实验组小 鼠每日灌胃给药 1 次,给药容积为 20mm×2.1mm,3.5μm)mL/kg,对照组给予等量的生理盐水,连续 5d,末次给药 后 1h,各小鼠右后足跖皮下注射 2.5%甲醛生理盐水溶液 50mm×2.1mm,3.5μm)μm)L/只,立即观察 1min,10mm×2.1mm,3.5μm)min,20mm×2.1mm,3.5μm)min,30mm×2.1mm,3.5μm)min,40mm×2.1mm,3.5μm)min 时的疼痛反应,每时间段观察 45s,记录该 45s 内出现 的最高痛级,并按分级标准评定受试动物的疼痛强度,比较组间差异。评分方法:舔、咬或抖 足 3 分,提足 2 分,跛行 1 分,走动自如 0mm×2.1mm,3.5μm) 分。 2.4 对甲醛致小鼠足肿胀组织中 PGE2 含量的影响[2]取 NIH 小鼠 48 只,雌雄各半,体 质量 18~22g,随机分成 4 组,即生理盐水组、吲哚美辛阳性对照组、痛风灵胶囊高、低剂 量组,各实验组小鼠每日灌胃给药一次,给药容积为 20mm×2.1mm,3.5μm)mL/kg,对照组给予等量的生理盐水, 连续 5d,末次给药后 1h,各小鼠右后足跖皮下注射 2.5%甲醛生理盐水溶液 50mm×2.1mm,3.5μm)μm)L/只,24h 后处死小鼠,距右踝关节上 1cm 处剪下右足,称重,剥皮后浸泡于 5mL 生理盐水中 1h,以 150mm×2.1mm,3.5μm)0mm×2.1mm,3.5μm)r/min 离心 10mm×2.1mm,3.5μm)min,吸取上清液 0mm×2.1mm,3.5μm).5mL,加入 0mm×2.1mm,3.5μm)00234,r=0.9986,5mol/L 氢氧化钠-甲醇溶液 2mL,在 50mm×2.1mm,3.5μm)℃水浴箱中水浴异构化 20mm×2.1mm,3.5μm)min,加甲醇稀释至 20mm×2.1mm,3.5μm)mL,于紫外分光光度计 278nm 处测定 吸收值,并按下述公式计算 PGE2 含量:PGE2 含量(μm)g/g)=(E278×13.13×Vt×D))/W。比 较各组间差异[注:Vt=PGE2 浸泡液总体积,D)=稀释倍数,W=右下肢重量 (g),E278=278nm 处的吸收值)]。 2.4p;统计学处理采用 SPSS11.5 统计软件包进行方差齐性检验、方差分析(ANOVA), 以 P<0mm×2.1mm,3.5μm).0mm×2.1mm,3.5μm)5 为差异有显着性。 3 结果 3.1 对热刺激引起的小鼠疼痛反应的影响给药 2h 后,罗通定组与生理盐水组比较,差异 有显着性(P<0mm×2.1mm,3.5μm).0mm×2.1mm,3.5μm)5),痛风灵胶囊高剂量、低剂量与生理盐水组比较差异无显着性,表明痛风 灵胶囊对热刺激引起的小鼠疼痛反应无明显镇痛作用。见表 1。 表 1 痛风灵胶囊对热板刺激引起的小鼠疼痛反应的影响(略) Tab.1AnalgesiceffectofTongfenglingcapsulesonthepaininducedwithhotplat einmice 与生理盐水组比较:**P<0mm×2.1mm,3.5μm).0mm×2.1mm,3.5μm)1(t 检验) 3.2 对冰醋酸引起的小鼠扭体反应的影响吲哚美辛组,痛风灵高、低剂量组与生理盐水 组比较,差异有非常显着性(P<0mm×2.1mm,3.5μm).0mm×2.1mm,3.5μm)1),表明痛风灵胶囊对醋酸刺激引起的小鼠疼痛反应有明 显镇痛作用。见表 2。 3.3 对甲醛法小鼠疼痛强度的影响[1]致炎 20mm×2.1mm,3.5μm)min,吲哚美辛组、痛风灵高、低剂量组 与生理盐水组比较,差异显着,表明痛风灵对甲醛所致小鼠第二相反应有明显抑制。见表 3。 表 2 痛风灵胶囊对冰醋酸引起的小鼠扭体反应的影响(略) Tab.2AnalgesiceffectofTongfenglingcapsulesonthepaininducedwithacetica cidinmice 与生理盐水组比较:**P<0mm×2.1mm,3.5μm).0mm×2.1mm,3.5μm)1(t 检验) 表 3 痛风灵胶囊对甲醛法小鼠疼痛强度的影响(略) Tab.3AnalgesiceffectofTongfenglingcapsulesonpainreactioninducedwithfor malininmice 与生理盐水组比较:*P<0mm×2.1mm,3.5μm).0mm×2.1mm,3.5μm)5,**P<0mm×2.1mm,3.5μm).0mm×2.1mm,3.5μm)1(t 检验) 3.4 对甲醛致小鼠足肿胀组织中 PGE2 含量的影响吲哚美辛组、痛风灵高剂量组与生 理盐水组比较,差异显着,表明痛风灵可降低炎症组织中的 PGE2 含量。见表 4。 表 4 痛风灵胶囊对甲醛致小鼠足肿胀组织中 PGE2 含量的影响(略) Tab.4EffectofTongfenglingcapsulesonPGE2levelinmouseformalintest 与生理盐水组比较:*P<0mm×2.1mm,3.5μm).0mm×2.1mm,3.5μm)5(t 检验) 4 讨论 中医认为,痛风是由于脾肾亏虚,湿浊毒邪滞留肌肉关节,从而引起关节肿大、畸形[3]。 痛风灵胶囊方中秦艽、防己、延胡索等均具有较强的镇痛作用,而且秦艽与延胡索配伍可增 强其镇痛作用。
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