白花蛇舌草研究论文

【摘要】白花蛇舌草是一种具有清热解毒、利尿消肿等作用的中药,可用于治疗肿瘤、 各种炎症、皮肤病等多种疾病。近年对其研究颇多,本文就近年来白花蛇舌草的化学成分、 药理作用和临床应用方面的研究进展作一综述,为其更深入的研究和应用提供依据。 【关键词】白花蛇舌草;化学成分;药理作用;临床应用 白花蛇舌草,又名蛇舌草、甲猛草、舌针草、白花十字草等,为茜草科耳草属植物白花蛇 舌草 HedyotisdiffusaWilld.[Oldenlandiadiffusa(Willd.)Roxb.]的带根全草,是一年生草本植物。 在我国云南、广东、广西、福建、浙江、江苏、安徽、湖南、湖北等地均有生长,夏秋采集, 洗净,切段,鲜用或晒干。其性寒、味甘,归心、肝、脾、大肠、小肠经,具有清热解毒、利尿 消肿、活血止痛、解毒散结等功效。内服用于肺热咳喘、咽喉肿痛、水肿、热淋、肠痈痢 疾、湿热黄疸、癌肿等,外用治疮疖痈肿,毒蛇咬伤[1~3]。为民间常用中草药。 白花蛇舌草的化学成分主要有蒽醌类、萜类、黄酮类、甾醇类、烷烃类、有机酸类、 多糖类、香豆精类和生物碱类等。现代药理研究证明,白花蛇舌草具有调节免疫活性、抗化 学诱变、抗肿瘤、抗菌抗炎、抗氧化等作用。近年来对该药物的化学成分和药理活性以及 临床应用做了大量工作,研究日趋深入。现将其研究进展综述如下。 1 化学成分 1.1 蒽醌类为 2-甲基-3-羟基蒽醌(2-methy-3-hydroxyanthraquinone)、2-甲基-3-甲氧基 蒽醌(2-methy-3-methoxyanthraquinone)、2-甲基-3 羟基-4-甲氧基蒽醌(2-methy-3-hydro4-methoxyanthraquinone)、2,3-二甲氧基-6-甲基蒽醌(2,3-dimethoxy-6methyanthraquinone)[4,5]。 1.2 萜类为车叶草苷(asperuloside)、车叶草苷酸(asperulosideacid)、去乙酰基车叶草 苷酸(deacetylasperulosideacid)、都槲子酸(geniposidicacid)、鸡屎藤次苷(scandoside)、 鸡屎藤次苷甲酯(scandosidemethylester)、6-O-对羟基桂皮酰鸡屎藤次苷甲酯(6-O-phydroxycinnamoylscandosidemethylester)、6-O-对甲氧基桂皮酰鸡屎藤次苷甲酯(6-O-pmetho-xycinnamoylscandosidemethylester)、6-O-阿魏酰桂皮酰鸡屎藤次苷甲酯(6-Oferuloylscandosidemethylester)、熊果酸(ursolicacid)、齐墩果酸(oleanolicacid)[6~11]。 1.3 黄酮类为槲皮素(quercetin)、槲皮素-3-O-吡喃葡糖苷(quercetin-3-Oglucopyranside)、槲皮素-3-O-槐糖苷(quercetin-3-O-sophoroside)、山柰酚-3-O-[2-O-(6O-E-阿魏酰基)-β-D-吡喃葡糖苷]-β-D-吡喃半乳糖苷(kaempferol-3-O-[2-O-(6-O-E-ferloyl)β-D-glucopyranosyl]-β-D-galactoypranoside)、槲皮素-3-O-[2-O-(6-O-E-阿魏酰基)-β-D-吡 喃葡糖苷]-β-D-吡喃半乳糖苷(quercetin-3-O-[2-O-(6-O-E-ferloyl)-β-D-glucopyranosyl]-β-Dgalactoypranoside)、槲皮素-3-O-[2-O-(6-O-E-阿魏酰基)-β-D-吡喃葡糖苷]-β-D-吡喃葡糖 苷(quercetin-3-O-[2-O-(6-O-E-ferloyl)-β-D-glucopyranosyl]-β-D-glucopyranoside)、山柰 酚-3-O-(2-O-β-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃半乳糖苷(kaempferol-3-O-(2-O-β-Dglucopyranosyl)-β-D-galactopyranoside)、槲皮素--3-O-(2-O-β-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃半 乳糖苷(quercetin-3-O-(2-O-β-D-glucopyranosyl)-β-D-galactopyranoside)[5,6,12]。 1.4 甾醇类为 β-谷甾醇(β-sitosterol)、β-谷甾醇-β-D-葡萄糖苷(β-sitosterol-β-Dglucoside)、豆甾醇(stigmasterol)、豆甾醇-5,22-二烯-3β,7α-二醇(stigmasta-5,22-diene3β,7α-diol)、豆甾醇-5,22-二烯-3β,7β-二醇(stigmasta-5,22-diene-3β,7β-diol) [4,5,8~11,13]。 1.5 其他有三十一烷(hentriacontane)[9]、对香豆酸(p-coumaricacid)[10]、4,4 二羟基古柯间二酸(4,4-dihydroxy-truxilicacid)[11]、另外还有多糖类等[14,15]。 2 药理作用 2.1 对免疫功能的作用机体的免疫分为细胞免疫和体液免疫即非特异性免疫和特异性 免疫,高超等[16]研究发现白花蛇舌草不仅可提高荷瘤鼠细胞免疫功能,同时对 B 细胞介导的 体液免疫具有增强作用,其机理可能为白花蛇舌草清除脾脏产生过量的活性氧,减轻脾细胞内 线粒体等细胞器损伤,并促进脾细胞增殖,从而提高荷瘤鼠免疫功能。王宇翎等[17]发现白花 蛇舌草总黄酮(15、30、60mg/kg)促进免疫功能低下小鼠由 ConA 或 LPS 诱导的脾淋巴细 胞的增殖反应,并提高小鼠血清 IL-2 和 IFN-γ 的含量;白花蛇舌草总黄酮(60mg/kg)促进免疫 功能低下小鼠脾脏 IgM 抗体形成,并升高抗肿瘤药物(环磷酰胺或阿糖胞苷)所致的小鼠白细 胞减少,表明白花蛇舌草总黄酮具有增强机体特异性免疫和非特异性免疫功能的作用。吴厚 铭等[15]研究表明白花蛇舌草中提取的多糖具有显着的增强免疫活性作用。 2.2 抗化学诱变作用白花蛇舌草具有明显的抗诱变活性,对黄曲霉素 B1 及苯并吡引起的 沙门菌属 TA100 的染色体突变回复有明显抑制作用,并能抑制黄曲霉素 B1 与 DNA 的结合, 抑制其生物转化,且白花蛇舌草抗诱变作用有一定的量效关系[18]。 2.3 抗肿瘤作用高超等[19]发现白花蛇舌草可抑制人宫颈癌 Hela 细胞的生长,其效果与 药物的浓度和作用的时间相关,倒置显微镜下 Hela 细胞出现细胞凋亡的形态学改变,流式细 胞仪检测到凋亡峰,白花蛇舌草作用后细胞内 ROS 水平下降,而突变型 p53 表达降低。表明 一定浓度的白花蛇舌草对人宫颈癌 Hela 细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能 与细胞内 ROS 水平和 p53 基因调控有关。林圣云等[1]发现 U937 细胞经白花蛇舌草醇提取 物作用后,呈时间和剂量依赖性。光镜观察可见细胞膜完整、核碎裂、凋亡小体等形态学特 征,DNA 电泳呈现典型的梯形条带,流式细胞仪分析证实 0.5、1、2、4mg/ml 的白花蛇舌草 醇提取物使 U937 细胞发生凋亡率分别为 4.18%,56.96%,82.43%,56.41%。表明白花蛇舌 草醇提取物抗肿瘤效应强,同时抑制 U937 细胞的增殖及诱导细胞凋亡。苏春燕等[20]用白 花蛇舌草水提取物对抗环磷酰胺模型小鼠的白细胞减少,对白细胞的回升有一定的促进作用。 王顺启等[3]把白花蛇舌草作用于肝癌细胞 SMMC-7721 后 36h,观察到有 1 个基因的表达上 调,14 个基因的表达下调,证实白花蛇舌草对肝癌细胞的作用是通过影响多基因的表达改变 实现的。 2.4 抗菌抗炎作用边才苗[2]研究结果证明白花蛇舌草对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、 绿脓杆菌有杀灭作用,以乙醇提取物为最好,丙酮提取物其次,水提取物最差。对白色念珠菌 的抑杀作用以水提取物最好,乙醇和丙酮提取物的差别不大。另有研究表明白花蛇舌草高浓 度水煎剂对兔实验性阑尾炎有较好疗效。王宇翎等[21]研究发现白花蛇舌草总黄酮 (15、30、60mg/kg)对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀和醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高有一 定的抑制作用;白花蛇舌草总黄酮(12、24、48mg/kg)对大鼠松节油气囊肉芽增生和新鲜蛋 清诱导大鼠足爪肿胀亦有明显的抑制作用;在体外,白花蛇舌草总黄酮对球菌和杆菌均具有不 同程度的抑菌和杀菌作用,且对球菌的作用优于杆菌。表明白花蛇舌草总黄酮具有抗炎及抗 菌作用。有实验证明白花蛇舌草能提高网状内皮系统的吞噬功能,刺激网状内皮细胞增生,增 强吞噬细胞的活力[22]。 2.5 抗氧化作用高超等[23]研究发现化疗+白花蛇舌草组小鼠肝、脾和骨髓组织的 ROS/ MDA 水平和 GSH-px/CAT 活性较单纯化疗组明显降低,脾脏超微结构变化明显减轻。表明 白花蛇舌草具有抗氧化损伤作用,可减轻化疗药物引起的荷瘤鼠正常组织的副损伤。王转子 等[24]对白花蛇舌草多糖的研究发现白花蛇舌草多糖在一定的剂量范围内对脂质过氧化有 明显的抑制作用,对负氧自由基有明显的清除作用,对 SOD 活力影响明显,且与剂量关系不大。 于新等[25]研究了白花蛇舌草的水、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、石油醚提取物在花生油中 的抗氧化活性及有效成分,结果显示这 6 种溶剂的提取物均有抗氧化作用,以丙酮提取物的抗 氧化作用最强,白花蛇舌草提取物的抗氧化成分以黄酮、萜类、蒽醌类、酚类化合物为主。 2.6 其他作用白花蛇舌草还具有神经保护、安定降温、抑制精子生长、调节胃肠功能 等作用。其成分谷甾醇有镇咳祛痰作用并能降低胆固醇。 3 临床应用 3.1 治疗肝炎、胆囊炎肖典军[26]以白花蛇舌草、金钱草、益母草治疗乙型病毒性肝炎, 治疗率为 100%。刘敏等[27]重用白花蛇舌草组方治疗慢性肝炎纤维化 40 例,收到满意疗效。 王昶之[28]以白花蛇舌草为主治疗 2 例胆囊炎患者,全部治愈。 3.2 治疗癌症邵晨东[29]重用白花蛇舌草组成复方煎剂治疗晚期非小细胞肺癌 58 例,健 康状况提高或稳定 47 例。王黎军等[30]重用白花蛇舌草组成复方涤痰化瘀通窍汤治疗脑部 肿瘤 34 例,结果治愈 7 例,显效 13 例,稳定 10 例,疗效满意。沈晔华等[31]重用白花蛇舌草组 成清胰消积方为治疗组治疗 32 例晚期胰腺癌,动脉灌注化疗 28 例为对照组,治疗 1 个月后中 药组延长生存期优于化疗对照组。 3.3 治疗白血病肖倩重[32]用白花蛇舌草组成复方煎剂配合化疗治疗白血病 38 例,毒副 作用低于对照组,治疗组总缓解率高于对照组。胡乃平等[33]治疗白血病经验介绍解毒抗癌 常用药有白花蛇舌草。吴晓玲等[34]介绍复方解毒片(白花蛇舌草、大青叶、山慈姑等)可抑 制恶性白血病细胞的生长,诱导白血病细胞的凋亡。 3.4 治疗胃炎杨承第等[35]用蛇草延胡汤治疗浅表性胃炎有效率 96.3%。张建明等[36] 用白花蛇舌草组成复方治疗慢性胃炎 2 例,疗效显着。马健等[37]用白花蛇舌草治疗糜烂性 胃炎。 3.5 治疗盆腔炎、附件炎蒋利亚[38]重用白花蛇舌草组成复方内服配合灌肠治疗 50 例 慢性盆腔炎,结果患者包块消失,炎症痊愈,总有效率 96.0%。魏春青[39]重用白花蛇舌草组方 治疗阴道炎 110 例,总有效率 96.4%。 3.6 治疗皮肤病任爱民[40]用白花蛇舌草治疗顽固性脓疱疮。王学林[41]用白花蛇舌草 治疗皮肤瘙痒症。徐爱琴等[42]治疗痤疮重用白花蛇舌草清热解毒,调理冲任,疗效满意。 3.7 治疗肾病、系统性红斑狼疮董飞侠等[43]中药治疗频发性肾病综合征 30 例,临床证 实白花蛇舌草对炎症细胞生物合成分泌的细胞因子具有双向调节作用,内可清除湿热瘀毒,外 可抵御外邪入侵。张琼等[44]治疗气阴两虚型肾病时常用白花蛇舌草。吴国琳、陈爱平等 [45,46]在治疗系统性红斑狼疮时加用白花蛇舌草疗效显着。 3.8 治疗过敏性紫癜性肾炎张君利[47]用白花蛇舌草治疗过敏性紫癜性肾炎之气虚血瘀 证,姚玉洲[48]利用白花蛇舌草治疗成人过敏性紫癜性肾炎,效果良好。 3.9 其他白花蛇舌草在治疗口腔溃疡、小儿夜啼、咳喘、传染性单核细胞增多症、骨 髓增生异常综合征、干燥综合征等疾病也有显着疗效。 4 展望 白花蛇舌草药源广,价格低廉,副作用少,应用广泛,疗效确切,今后对白花蛇舌草的研究可 从以下几个方面进行:(1)加强药理研究,为临床合理应用提供科学依据;(2)进一步分离研究有 效成分,开发高效低毒的新药;(3)进行剂型改造与研制复方中成药;(4)开发具有预防保健作用 的免疫增强剂和化妆品。 【摘要】乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV))感染已成为危害人类健康的重要疾病。目 前,临床上抗 HBV) 药物主要以干扰素、核苷类似物、免疫调节药物为主,此外,中草药及其有 效成分抗 HBV) 治疗也占有重要的地位。本文对抗 HBV) 的药物作用机制、研究、应用情况 做一综述,以便明确其发展趋势及今后的研究方向,从而推动新型高效药物的研发。 【关键词】乙型肝炎病毒;抗病毒药物;干扰素;核苷类似物;中草药 世界卫生组织估计全世界大约有 20 亿乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV))感染者,其中 3.5~4 亿为 HBV) 慢性感染者,每年由于急慢性 HBV) 感染而死亡的人数达到 100 万,并呈上升 趋势。而我国是乙肝大国,占据其中的 1/3,有 1.2 亿 HBV) 携带者。从数据而知,乙肝病毒感 染已成为危害人类健康的重要疾病,因此对 HBV) 感染者有效的抗 HBV) 治疗在全世界特别是 在我国显得尤为迫切。 国内外在治疗 HBV) 感染研究中,认为 HBV) 的持续感染是造成乙肝慢性化的主要原因,且 可导致病情发展、恶化至肝硬化、HBV) 相关性肝细胞癌。因此,抗病毒治疗是慢性乙肝治疗 的关键,被认为是迄今为止治疗 HBV) 感染最基本的病因治疗,以抑制肝炎病毒复制为依据。 本文就抗 HBV) 药物的研究进展做一综述。 1 干扰素(interferon,IFN) IFN 是机体感染病毒时,宿主细胞通过抗病毒应答产生的一组结构类似、功能相近的低 分子糖蛋白,是抗病毒感染最重要的一种细胞因子[1]。主要分为 α、β 和 γ 三型,其中 IFN-α 和 β 具有直接抗病毒作用。自 1992 年 IFN-α2b 被批准用于治疗病毒性肝炎以来,迄今为止 仍是被 FDA 批准的首先药物。目前全球获准上市的 IFN 有 12 个,以 IFN-α 居多,其临床疗效 无明显差异。IFN 的抗病毒机制包括免疫调节作用和直接抗病毒作用,并以前者为主[2]。近 年发现,IFN 在还有抗肝纤维化的作用。目前,IFN-α 在抗 HBV) 治疗中的问题是效果有限,抑 制病毒复制但难以清除病毒,而且停药后有复发现象。近年来国内外均倾向于采用重组干扰 素,激素撤除合并干扰素疗法以及干扰素与其他抗病毒药物结合疗法治疗 HBV) 感染。如聚 乙二醇 IFN-α[3]是聚乙二醇(PEG)与重组 IFN 仅结合形成的长效干扰素。 2 核苷类似物(nucleosideanalogue) HBV) 为双股 DNA 病毒,其复制需经过逆转录过程,该类药物可抑制 HBV)-DNA 逆转录酶 活性,从而达到破坏病毒的作用。 2.1 拉米夫定(lamivudine,LMV))是一种嘧啶核苷类抗病毒药,作为酶底物 dCTP 竞争性 抑制剂,通过抑制病毒逆转录酶及 DNA 多聚酶,终止病毒 DNA 链延长,故可使 HBV)-DNA 很 快减少。清除 HBe 和促进 HBeAg/抗 HBe 的血清转换,减少血液和肝脏内的病毒载量。 SchmilovitzWeiss 等[4]的临床研究表明,给急性重型肝炎患者口服 LMV) 后,能有效、迅速地 抑制 HBV)-DNA 的复制,使患者获得病毒学、肝组织学和肝脏生化功能的改善,且患者耐受性 好,无明显不良反应。但长期用 LMV) 易导致的 HBV) 突变株而降低疗效,且价格较贵,口服吸 收率低,停药后极易产生“反跳”现象”现象,且 YMDD 的存在影响肝病理的改善。 2.2 阿德福韦(adefovir,ADV))是为无环腺嘌呤核苷单磷酸,可绕过第一步磷酸化,后者常 常是核苷类药物在细胞内转化的关键步骤并影响药效。它不需要转化成三磷酸形式,只要二 磷酸形式就能抑制 HBV)-DNA 聚合酶与逆转录酶。体内外研究表明,ADV) 可明显抑制 HBV) 野生型和 LMV) 诱导病毒变异株的复制。对由 LMV) 耐药病毒株引起的急性或亚急性重型肝 炎,较早加用 ADV),能减缓或终止病情恶化,降低病死率[5]。目前尚未发现有对 ADV) 耐药的 病毒株,故其有望成为治疗对其他核苷类似物耐药病毒株的有效药物。 2.3 其他恩替卡韦(entecavir,ETV))、替比夫定(Telbivudine,LdT)已经批准上市,其他一 些核苷类抗病毒药物如克拉夫定(clevudine)Ⅰ 期临床研究已经完成。恩曲他滨 (emtricitabine,FTC)和替诺福韦(tenofovir)正在Ⅲ期临床研究中。另外期临床研究中。另外,如利巴韦林(病毒 唑,ribavirin)、阿糖腺苷及其单磷酸盐、阿昔洛韦(无环鸟苷,acyclovir)、膦甲酸酯 (phosphonoformate,foscarnet,PFA)、聚肌胞(双链多聚核苷酸,Poly:C)等也是直接或间接作 用于病毒 DNA-P 的广谱抗病毒药,在慢性病毒性肝炎的治疗上也取得了一定的疗效,但也具 有易复发等缺点。同时,很多新的核苷类抗病毒药物正在进行抗 HBV) 的评估,继续研究设计 新的核苷类似物也可防备耐药突变株的出现[6]。无论如何,这类药物为抗 HBV) 的研究提供 了新的希望。 3 中草药及其有效成分 许多具有抗 HBV) 的中草药被发现,受到国内国外的高度关注和广泛研究。总的来说,中 草药一般同时具有多种活性:能减轻肝损伤症状,丙氨酸转氨酶(ALT)活力下降,并能促进肝细 胞再生,使肝组织坏死区迅速修复;或者抑制 HBV)-DNA 聚合酶,在 DNA 水平上阻断病毒的复 制;或者具有 HBsAg 结合活性,阻断病毒颗粒装配成有浸染活性的病毒颗粒。国外学者从大 量中草药中筛选了很多具有抑制 HBV) 表面抗原和 HBV)-DNA 聚合酶作用的草药,而且研究 发现具有 HBV)-DNA 聚合酶抑制作用的草药还有刺激产生肿瘤坏死因子(TNF)的作用。有人 对 60 种中药的抗 HBV) 作用进行了体外实验研究,发现有 28 种对 HBV)-DNA 抑制率达 50% 以上,18 种达 25%~50%,主要为清热解毒药,其中部分可降解 HBV)-DNA。 3.1 苦味叶下珠 1982 年印度学者 Thyagajan 等首次报道苦味叶下珠 (PhyllanthusamarusL)体外对 HBsAg 有灭活作用[7],叶下珠为大戟科叶下珠属植物叶下珠 PhyllanthusurinaiaL 的干燥全草,具有清热解毒、明目等功效,主要治疗腹泻下痢、尿路感染、 肝炎等[8,9]。刘庄等[10]的研究表明不同叶下珠品种和制剂在体外均有不同程度的抗 HBV) 活性,而未显示明显的细胞毒性,相同剂量下,药物对 HBsAg 和 HBeAg 的抑制较对 HBV)DNA 抑制效果好,提示药物对病毒颗粒产生的抑制不仅在转录前水平,可有对 mRNA 翻译水 平、蛋白分泌等环节也有影响。 3.2 垂盆草中药垂盆草 SedumsarmentosumBunge 为景天科景天属多年生草本植物,又 名地蜈蚣草、佛甲草,我国分布广泛。它具有清热解毒,抗菌消炎作用[11]。广泛的临床应用 已证明垂盆草及其制剂具有显着的抗肝炎作用。1979 年方圣鼎等分得一水溶性氰苷类成分: 2-氰基-4-O-β-D-葡萄糖反丁烯-2-醇,并指出其为抗肝炎活性成分[12]。诸国华等[13]研究发 现垂盆草甙是抗肝炎的活性成分;其水溶性成分具有调节机体免疫能力的作用[14]。 3.3 水芹水芹(OenanlbeJapanica)在临床中对高血压、高脂血症、心脑血管疾病患者 具有防治作用。研究发现,水芹甲醇撮物(100mg/kg)可明显降低血浆中脂质过氧化产物丙二 醛的含量,保护超氧化物歧化酶的活性[15]。水芹[16]可以通过减少肝脏脂质过氧化产物生 产是 CC14 所致的肝细胞空泡样变性、线粒体肿胀、粗面内质网扩张等病理损害减轻,抑制 HBV)-DNA 的复制,从而达到抗病毒的效果。