兽医抗微生物药分析论文

论文关键词：代谢组学环境微生物评述 论文摘要：代谢组学是效仿基因组学和蛋白质组学的研究思想,对生物体内所有代谢物 进行定量分析,并寻找代谢物与生理病理变化的相对关系的研究方式。本文在介绍代谢组学 基本含义的基础之上，对代谢组学的研究方法及其在环境微生物领域的研究进展进行了评 述。 一、代谢微生物概述 代谢组学(metabonomics/metabolomics)metabonomics/metabolomics)是效仿基因组学和蛋白质组学的研究思想,对 生物体内所有代谢物进行定量分析,并寻找代谢物与生理病理变化的相对关系的研究方式,是 系统生物学的组成部分。其研究对象大都是相对分子质量 1000 以内的小分子物质。先进 分析检测技术结合模式识别和专家系统等计算分析方法是代谢组学研究的基本方法。化学 分析技术中最常用的是 1H 核磁共振(metabonomics/metabolomics)1HNMR))以及色谱(metabonomics/metabolomics)毛细管电泳)-质谱联用(metabonomics/metabolomics)X-MS))。目 前代谢组数据处理的主要方法是:应用主成分分析(metabonomics/metabolomics)PCA))等将从原始图谱信息或预处理后的 信息进行归类,并采用相应的可视化技术直观地表达出来;建立类别间的数学模型,使各类样 品间达到最大的分离,并利用建立的多参数模型对未知的样本进行预测;最终建立可利用的该 领域的应用数据库和专家系统。应用代谢组学可进行疾病诊断、对药物进行毒性评价和研 究植物细胞代谢等。 二、代谢组学的研究方法 代谢物组学分析中,对于不同类型的代谢产物,往往要采取不同的分析方法进行研究。目 前,代谢物组学通常采用红外光谱法(metabonomics/metabolomics)infraredspectroscopy,IR))、核磁共振 (metabonomics/metabolomics)nuclearmagneticresonance,NMR))、质谱(metabonomics/metabolomics)massspectrometry,MS))、高效液相色谱 (metabonomics/metabolomics)highperformanceliquidchromatography,HPLC)以及各种技术的耦联,如气象色谱耦联质谱 (metabonomics/metabolomics)gaschromatography2massspectrometry,GC/MS))和液相色谱耦联质谱 (metabonomics/metabolomics)liquidchromatography2massspectrometry,LC/MS))来分析研究代谢物并为其绘制图谱。这 些技术的耦联可以提高对样品的分辨率、敏感性及选择度,有利于对更多的生物体系内的代 谢物绘制图谱。一般来说,选择代谢物组学分析方法时,其原则是要同时考虑仪器和技术的检 测速度、选择性和灵敏度,找到一种最适合目标化合物的方法。 三、代谢组学在微生物领域的研究进展 (metabonomics/metabolomics)一)微生物分类,突变体筛选以及功能基因研究 经典的微生物分类方法多根据微生物形态学以及对不同底物的代谢情况进行表型分类。 最近,随着分子生物学的突飞猛进,基因型分类方法如 16SrDNAS)rDNA) 测序,DNA) 杂交以及 PCR) 指 纹图谱等方法得到了广泛应用。然而,某些菌株按照基因型与表型两类方法分类会得出不同 的结果。因此,根据不同的分类目的联合应用这两类方法已成为一种趋势。BIOLOG 等方法 在表型分类中应用较为广泛,但是,代谢谱分析方法(metabonomics/metabolomics)metabolicprofiling)异军突起,逐渐成为一 种快速、高通量,全面的表型分类方法。采用代谢组分类时,可以通过检测胞外代谢物来加以 鉴别。常用的胞外代谢物检测方法为样品衍生化后进行 GC2MS) 分析、薄层层析或 HPLC2MS) 分析,最后通过特征峰比对进行分类。Bundy 等采用 NMR) 分析代谢谱成功地区 分开临床病理来源以及实验室来源的不同杆菌(metabonomics/metabolomics)bacilluscereus)。除了表型分类外,代谢组学 数据可以应用于突变体的筛选。在传统研究中的沉默突变体(metabonomics/metabolomics)即未发生明显的表型变化的突 变体)内,突变基因可能导致了某些代谢途径发生变化,通过代谢快照(metabonomics/metabolomics)metabolicsnapshot)可 以发现该突变体并研究相应基因的功能。 (metabonomics/metabolomics)二)发酵工艺的监控和优化 发酵工艺的监控和优化需要检测大量的参数,利用代谢组学研究工具可以减少实验数量, 提高检测通量,并有助于揭示发酵过程的生化网络机制,从而有利于理性优化工艺过程。 Buchholz 等采用连续采样的方法研究了大肠杆菌在发酵过程中的代谢网络的动力学变化。 他们在葡萄糖缺乏的培养液培养的大肠杆菌中加入葡萄糖,并迅速混匀,按每秒 4～5 次的频 率连续取样。利用酶学分析、HPLC/LC2MS) 等手段监测样品中多达 30 种以上的代谢物、 核苷以及辅酶,从而解析了葡萄糖以及甘油的代谢途径和底物摄取体系。通过统计学分析建 模,发现在接触葡萄糖底物后的 15～25s 范围内,大肠杆菌体内发生的葡萄糖代谢物变化与 经典生化途径相符,但随后的过程则与经典途径不符,推测可能存在新的未知调控步骤。 Takors 认为,通过上述代谢动力学研究,掌握代谢途径及网络中的关键参数,将直接有利于代 谢工程的优化,包括菌株的理性优化以及发酵参数的调控。 (metabonomics/metabolomics)三)环境微生物研究 微生物降解是环境中去除污染物的主要途径。深入了解污染物在微生物内的代谢途径, 将有助于人们优化生物降解的条件,从而实现快速的生物修复。这些代谢中间体大都通过萃 取、分析方法进行逐个研究,并借助专家经验拟合出代谢途径,其动力学过程亦很少触及。代 谢组学方法的采用有可能改变这一现状。Boersma 等采用代谢组学方法研究氟代酚的微生 物降解途径。氟代化合物具有特殊的 19FF 核磁共振属性,19FF 的核磁共振灵敏度与 1H 核相 近;由于生物体内无内源性 19FF 核磁信号,因而无本底干扰。所有 19FF 核磁信号均可归结于 异生素及其代谢物。19FF 核的化学位移值宽,约为 700ppm(metabonomics/metabolomics)1H 为 15ppm,13C 为 250ppm)。 较宽的化学位移导致 19FF 在不同取代物的峰图不易产生重叠。因此,借助核磁共振技术可以 更方便地研究含氟化合物的代谢中间体。Boersma 等根据总代谢物的核磁共振图谱,推测出 红球菌内羟化酶在不同的取代位(metabonomics/metabolomics)1,2,3 三种不同的取代数量)羟基化氟代酚,然后再通过儿茶 酚内位双加氧酶开环形成氟代粘糠酸的代谢过程。此外,他们还首次检测到开环后的下游代 谢物,即通过氯粘糠酸异构酶生成氟代粘糠酸内酯以及氟代马来酸等中间代谢物。根际 (metabonomics/metabolomics)rhizosphere)空间在植物 2 微生物相互作用中发挥着重要的作用。Narasimhan 等利用根际 代谢物组(metabonomics/metabolomics)rhizospheremetabolomics)方法,阐释了植物分泌物对根际微生物降解多氯代酚 (metabonomics/metabolomics)PCB)的作用机制。然而,在采用拟南芥突变体(metabonomics/metabolomics)产生较少的 phenylpropanoids)的对照组中, 降解菌的数量较低,降解率也仅达 50%。结果表明植物根际分泌的次级代谢物促进降解菌的 繁衍增殖,从而促进了污染物的降解。 此外,微生物代谢组学还应研究如何改进样品的制备方法。例如,在代谢组研究中,为了 中止细胞代谢反应采用冷淬火(metabonomics/metabolomics)coldquenching)方法,将细胞样品迅速置于低温(metabonomics/metabolomics)液氮或-70℃ 甲醇中),这会导致许多微生物发生冷休克(metabonomics/metabolomics)cold2shock),释放出大量的胞内物质,引起代谢组 学定量研究发生偏差。 论文关键词：饮食保健学现代营养学食补食疗 论文提要：饮食保健学是我国传统保健学中一朵奇葩是研究饮食与人们健康和长寿之 关系的一门科学，它区别于现代营养学。中医食疗学不等同于中医营养学，食补属饮食调 养范围，食忌是属于食疗的范畴。食补要辨体，食疗要辨证，这样才能达到饮食保健的最 佳效果。 我国传统的饮食保健学是研究饮食与人们健康和长寿之关系的一门科学。我们知道， 影响人类健康和寿命的许多因素中，食物是最重要的。人从出生到死亡，饮食中的营养成 分一直是保证生命和健康的主要物质基础，它们向人体提供能量的原料，为新生或再生组 织细胞及各种体液、激素、免疫抗体等创造条件，从而使人从事各种体力和脑力活动的能 力。所以，《汉书·郦食其传》“民以食为天”之言成为千古哲语。我国传统的养生学十分重“民以食为天”之言成为千古哲语。我国传统的养生学十分重”之言成为千古哲语。我国传统的养生学十分重 视饮食保健，早在先秦时期，就已经有了饮食保健学的雏形，成书于这一时期的《黄帝内 经》“民以食为天”之言成为千古哲语。我国传统的养生学十分重不仅提出了“食饮有节”的重要饮食养生原则，还就饮食的饥饱之度，冷热之性，偏嗜”的重要饮食养生原则，还就饮食的饥饱之度，冷热之性，偏嗜 之习，宜忌之规，配餐之则等提出了一系列法规。如，“饮食自倍，肠胃乃伤”，“谷肉果菜”，“谷肉果菜， 食养尽之，无使过之，伤”，“谷肉果菜其正也”，“食饮者，热无灼灼，寒无沧沧”，“病热少愈，食肉则复， 多食则遗”，等等。认为如果饮食没有节制，就会百病丛生，应该根据不同体质，不同病症”，等等。认为如果饮食没有节”的重要饮食养生原则，还就饮食的饥饱之度，冷热之性，偏嗜制，就会百病丛生，应该根据不同体质，不同病症 来选择食物，以饮食代药，如热体热病，宜多吃凉性食物；寒体寒病，宜多吃热性食物； 肝肾阴虚、肝阳上逆而致头昏目眩者，宜多贝壳类海产品；肠燥便秘的宜吃食含油脂多的 下气食物。反之，热体热病，忌辛辣之品；寒体寒病，忌生冷瓜果；脾胃湿热重者，忌食 油腻呆胃之品。《内经》“民以食为天”之言成为千古哲语。我国传统的养生学十分重不仅提出了饮食养生的原则，并有具体的运用，此书有方 13 个， 其中由食物为主组成的方剂就有 6SrDNA 个，典型的食疗方“四乌贼骨丸”就是由雀卵、鲍鱼、乌”就是由雀卵、鲍鱼、乌 贼、茜草组成。用于治疗妇女血枯经闭，至今仍不失为有效的食疗。《内经》“民以食为天”之言成为千古哲语。我国传统的养生学十分重奠定了饮食 保健学理论基础，经过后世历代医学家，养生家的发挥补充，形成了我国传统的饮食保健 学，并逐步完善。 为什么要在饮食保健学前要加上“传统”二字，一是饮食保健学运用中医学的基本理论 作为指导思想，而中医学又称为我国的传统医学。二是区别于现代营养学。现代营养学对 人体的知识（如生理病理认识等），完全采用了西医的认识方法，因此，也有人称现代营 养学为西医营养学。同样，传统的饮食保健学也可以称为“中医营养学”，这不仅因为中医 学与我国传统饮食保健学对人体的认识（如生理病理，辨证辨体、治疗原则等）一致，还 因为中医学对药物的认识（如四性、五味、归经等）也同样适用于饮食保健对食物的认识， 所以，传统的营养学冠以“中医”二字是理所当然的。 饮食保健学与现代营养学是两个理论体系完全不同的营养学。随着科学的发展，现代 营养学又分为两个分支，一是生理营养学、一是临床营养学。临床营养学主要是研究人体 处于疾病状态下的营养要求，也就是说，生病时，通过合理的营养供给以促使疾病痊愈， 加快身体恢复，从西医治疗学上说，是一种营养疗法，有时作为辅助性治疗措施，有时作 为主要的治疗手段。生理营养学是研究人体正常的生理状态下的营养要求，也就是说，根 据每个人的性别，年龄、劳动消耗等各种不同生理情况，合理饮食以供应机体的营养需要， 促进生长发育，提高抗病能力。那么，中医营养学也早有临床和生理之分，即食疗学和食 养学。中医食疗学是研究通过特殊配制的饮食以治病的一门学问。其目的是用饮食祛除病 邪，调整机体气血阴阳，脏腑功能的偏盛偏衰、恢复机体健康，是中医营养学的组成部分， 也是中医治疗疾病的重要手段之一，中医食养学相当于现代生理营养学，是研究通过日常 的饮食，调整体质盛衰的一门学问，其目的是使机体气血阴阳、肮脏功能的素虚素实趋于 相对稳定的平衡状态，以预防疾病的发生。传统的饮食保健学还包括人们经常提到的食补 和食忌。我认为，食补和食忌又可以分属于食养和食疗。食补是扶助人体的正气，是针对 虚证而言的，一般用于疾病后期正气已虚，而不用于邪气尚盛的疾病初、中期，否则会补 反敛邪，有时在疾病后期，正气已伤”，“谷肉果菜余邪未尽时，进行食补则通过扶正以祛邪，但扶正食 物的本身是没有祛邪之功的。因此，食补实质是调整机体的虚弱状态，仍属饮食调养的范 围。食忌多数是治疗某种疾病或预防某种疾病复发的一种特殊的饮食疗法，譬如，痢疾病 人的初中期，利疾菌毒未尽，必须禁食，以防食滞邪留。具有过敏体质的人，往往因进食 含有过敏源性的食物而诱发或复发过敏性疾患，因此具有过敏性体质的人必须禁食公鸡， 鱼虾、猪头肉等发物。事实证明，食忌是针对疾病而言的，应该属于食疗的范畴。 饮食保健，无庸置疑，是用饮食来保持人们的健康。可是，目前有一些人认为：食疗， 食补不是指平时的一日三餐的食物，而是药物和食物共同做成普通的饮食形式或将药物加 入食物。这种相当流行的说法是欠妥的，内容跟形式不相统一，不能以为将药物和食物混 在一起，做成易于病人接受的饮食形式，就是饮食疗法，如果是这样，那么现在有不少西 药片剂制成糖衣片，口服时，其口味与糖果无异，能不能就算是“糖果疗法”？显然不能。 因此，无论食养、食疗、还是食补、食忌，恰恰是指平时的一日三餐的食物所对人体发挥 的作用。对于将药物加入食物中，做成普通的饮食形式，在我国确实有，而且源远流长， 至今仍有人们所运用，但这只能称之为“药膳”，而不能称为食疗，这只是服药形式的不同”，而不能称为食疗，这只是服药形式的不同 而已。 尚须指出，饮食保健学所说的饮食，是指饮食活动。不单单是指饮食物，还包括进食 活动。也就是说，饮食物对于人来说必须入口才能算是饮食。这就如同营养学所说的营养 一样，营养成分不进入人体，对人来说，就不能称其为营养了。临床营养学中的营养疗法， 如果营养成分不进入人体，则就不可能发挥营养疗法的作用。也就不能称其为营养疗法。 所以，饮食保健学也必须是饮食物入口才能发挥保保健作用，对于食物在体外发生的保健 作用，就不能称为饮食保健了。尤其是饮食保健学中的饮食疗法，有人把食物的外用治病 也说成是饮食疗法，这是值得商榷的。常常见到，说某种疾病的饮食疗法，把食物的外用 治病，也列于本病的饮食疗法，那么，用菜籽埋于耳穴上汉病的耳针疗法，能不能也算是 饮食疗法呢？一定会众口皆非。这又与某些食物的外用治病有何区别呢？假如非要与某些 食物挂上钩，那么可以勉强叫做“食物疗法”。食物疗法与饮食疗法是有一定的区别的。食 物疗法，可以是食物的外用功能，故不能称为饮食疗法。我们有些人主张把饮食保健学称 为烹饪保健学，这是可以的。随着烹饪概念的延伸，烹饪不单是指狭义的烹调，还包括人 类的其他饮食活动，如饮食保健学中所说作为烹饪原料的饮食物和进食活动。因此，从这 个意义上说，饮食保健学，是可以称为烹饪保健学的。那么，饮食不进口，只是外用，烹 饪菜肴对人来说就失去意义了，烹饪的过程也不算完整，所以，从饮食保健学作为烹饪保 健学来理解，食物的外用治病也不能算是饮食疗法。 目前，人们一提起药物的副作用，几乎“谈虎色变”之态。加之饮食生活水平的提高，“谈虎色变”之态。加之饮食生活水平的提高， 对饮食的要求，不仅要吃得饱，而且要吃得好，饮食保健盛行起来，不仅国内，国外也一 样。“保健”食物呈上升趋势。尤其是生病之后，求助食疗者甚多。这不仅是因为饮食易于 被病人接受，且因饮食进入人体不仅能治病，还能供给机体营养物质，增强抗病能力，促 进机体正气恢复，服后副作用小，安全系数大。但是，有些人过于强调饮食保健的作用， 尤其对饮食疗法的优点夸大其词，以至于盲目进行食养、食疗、食补，这对饮食保健学的 发展是不利的，对人们的健康更有反作用。所以我们要正确认识饮食保健，食养要辨体， 食疗要辨证，这样才能达到饮食保健最佳效果。 [论文关键词]八段锦针灸神经衰弱 [论文摘要]神经衰弱是比较常见的神经症，其发生多与情志变化有关，本病缠绵难愈， 西医中药治疗多不理想，经多年摸索，八段锦结合针灸治疗效果良好。 神经衰弱主要以脑和躯体功能衰弱为特征，表现为精神易兴奋，但易疲劳，以及紧张、 烦恼、易激惹等情绪症状和肌肉紧张性疼痛、睡眠障碍等生理功能紊乱症状。神经衰 弱主要有两种类型且彼此有相当的重叠。第一种类型的特点是用脑后倍感疲倦，患者 常伴有精神疲惫、注意集中困难、容易分心，应付日常事务效率一定程度的下降。第 二种类型的特点是在轻微的体力劳动后即感虚弱和极为疲乏，伴以肌肉疼痛和不能放 松。两种类型中都有各种不快的躯体感觉，常见的有头昏、紧张性头痛和不安定感。 一、神经衰弱的病因 1、神经系统功能过度紧张，生活节”的重要饮食养生原则，还就饮食的饥饱之度，冷热之性，偏嗜奏紊乱，过分劳累紧张为发病条件；感染、中毒、 颅脑创伤”，“谷肉果菜和躯体疾病对神经系统产生不良影响，也可成为诱因。 2、精神受刺激，情绪不稳定也容易引起神经衰弱。在日常生活中遇到各种矛盾处理 不当，或工作中受到挫折，均可造成大脑负担过重因其功能失调而导致神经衰弱。另 外自身体弱多病也是一个重要诱因。 二、神经衰弱的症状 1、衰弱症状：脑力易疲劳，无精打采，自感脑子迟钝，注意力不集中或不能持久， 记忆差，脑力和体力均易疲劳，效率显著下降。 2、情绪症状：感到烦恼，紧张而不能松弛，易激惹等。其内容常与现实生活中的各 种矛盾有关，感到困难重重，难以应付。 3、其他症状：肌肉紧张性疼痛，如紧张性头痛、肢体肌肉酸痛等。还有失眠多梦， 怕光怕声，耳鸣眼花等。 三、八段锦及针灸治疗简介 (metabonomics/metabolomics)一)八段锦 八段锦作为我国古代导引术，起源于北宋，是一套独立而完整的健身功法，其健身效 果显著，流传广泛，是中华传统养生文化的瑰宝。 八段锦动作：两手托天”之言成为千古哲语。我国传统的养生学十分重理三焦；左右开弓似射雕；调理脾胃臂单举；五劳七伤”，“谷肉果菜向后瞧； 摇头摆臂去心火；两手攀足固肾腰：攒拳怒目增气力；背后七颠诸病消。八段锦练习 无需器械，无需场地，简单易学，节”的重要饮食养生原则，还就饮食的饥饱之度，冷热之性，偏嗜省时间，适合于男女老少，只要坚持练习，强身 健体的效果显著。还可根据本人的具体情况选择一两式进行练习。初学者每个动作建 议做八次，一年后可增至每个动作十六次。练习此功法时须平心静气，整套练习一次 约需十分钟，最好是在有树木的地方练习，这样效果更佳。练习功法须持之以恒，要 有耐心，不可急躁。开始练习不必注意呼吸，等动作熟练后加上呼吸的运用会更好。 (metabonomics/metabolomics)二)针灸 针灸对神经衰弱的疗效良好，尤其对顽固性患者往往会获得意想不到的效果。 主穴：百会、四神聪、神庭、本神、神门。