胃癌患者肿瘤组织管理论文

［摘要］目的研究血管内皮细胞生长因子（VEGF）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的在胃癌患者血清及肿瘤组织中的 表达情况，探讨其临床意义。方法应用 ELISA 法对 60 例非肿瘤疾病手术患者和 60 例胃癌 患者术前、术后血清 VEGF 水平进行定量测定，并应用免疫组化法测定肿瘤组织的 VEGF。结果胃癌患者术前血清 VEGF 高于对照组（P＞0.05）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的。两组术后较术前升高，肿 瘤组术后较术前升高（P＜0.05）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的。肿瘤组术前血清 VEGF 水平、肿瘤组织中的 VEGF 与 浆膜受累、淋巴结转移及临床病理分期有关。肿瘤组术后随访 30～36 个月中出现复发转 移和死亡的患者，术前 VEGF 表达较其他患者升高（P＜0.05）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的。结论血清 VEGF 水平及 肿瘤组织中的 VEGF 与胃癌的浸润、转移有关，检测血清 VEGF 及肿瘤组织中的 VEGF 对 胃癌浸润、转移程度和预后的判断有重要意义。 ［关键词］胃肿瘤；微转移；血管内皮生长因子 ExpressionandsignificanceofVEGFinserumandtumortissueingastriccancer ZHOUHai-yin，LIJian，QIAOShiming，etal.DepartmentofGeneralSurgery，TheCentralHospitalofYangpuDistrict，Shangh ai200090，China ［Abstract］ObjectiveToevaluatetheclinicalsignificanceofvascularendothelialgrowthf actor(VEGF)expressioninserumandtumortissueingastriccancerpatients.MethodsThepreoperationalandpostoperationallevelsofserumVEGFweremeasuredbyELISAkitin60casesofgastriccancerand60 casesofnoncarcinomaasthecontrolgroup，theexpressionoftumortissueVEGFwasmeasuredbyimmuno histochemicalassay.ResultsThepreoperationallevelofserumVEGFingastriccancerwashigherthanthatinthecontrolgroup(P＞ 0.05).ThepostoperationallevelofserumVEGFwasincreasedinbothgroups，especiallyinthetumorgroup(P ＜ 0.05).TheexpressionofVEGFinserumandtumortissuewaspositivelycorrelatedwithtumorinv asiondepth，lymph-nodemetastasisandclinicalpathologicalstage.Afollowupof30～ 36monthsrevealsthepreoperationallevelofserumVEGFoftumorrecurrenceanddeathinpatientswashigherthantheoth ersinthetumorgroup(P＜ 0.05).ConclusionTheexpressionofserumVEGFandtumortissueVEGFiscloselycorrelatedwit hinvasionandmetastasisofgastriccancer.SerumVEGFandtumortissueVEGFassaymaybeu sedtopre-operativelypredictinvasionandmetastasisandusedtoevaluateprognosis. ［Keywords］stomachneoplasm;micrometastasis;vascularendothelialgrowthfactor 肿瘤的增殖和转移是血管新生依赖性的。在肿瘤血管生成过程中，血管内皮细胞生长 因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的是目前了解的功能最强大的特异性血管 生长调节因子，各种转化生长因子、表皮生长因子、IL-6、IL-12、野生型 P53 及一些原癌 基因均可上调 VEGF 产生促血管活性［1］，故 VEGF 可能为促血管活性因子的最后共同 道路［2］。本研究通过对胃癌患者手术前后血清 VEGF 的定量测定及肿瘤标本中 VEGF 表达情况，探讨其与临床病理及肿瘤预后的关系。现分析报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料选择我院普外科 2002 年 11 月～2003 年 5 月期间住院接受手术治疗的胃 癌患者 60 例，其中男 33 例，女 27 例，年龄 35～85 岁，中位年龄 68 岁。其中Ⅰ期期 8 例， Ⅱ期期 15 例，Ⅲ期期 34 例，Ⅳ期期 3 例。对照组选择同期住院手术的非肿瘤患者 60 例。 1.2 方法 1.2.1 血清标本采集在术前、术后第 7 天和术后 6 个月每月 1 次分别抽取清晨空腹静脉 血 3ml，离心分离血清，置于-20℃冻存待测。 1.2.2 血清 VEGF 定量检测采用双抗体夹心 ELISA 法，样本中的 VEGF 与酶标板上的 抗人 VEGF 单抗结合，再与结合有生物素的抗人 VEGF 抗体结合，经辣根过氧化物酶标记 的 Streptavidin 与生物素结合，与酶底物反应染色，在 492nm 测定与 VEGF 浓度相对应的 OD 值。以标准品的 OD 值画出标准曲线，根据样品 OD 值在该曲线图上查出相应的 VEGF 含量。 1.2.3 肿瘤组织 VEGF 检测肿瘤组织经常规固定、石蜡包埋、切片后，采用 Envision 二步法染色。一抗采用鼠抗人 VEGF 单克隆抗体。肿瘤组织 VEGF 以肿瘤细胞胞质内出现 棕黄色颗粒为阳性。VEGF 判断标准：（-）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的为无瘤细胞着色，（+）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的为着色瘤细胞数＞ 10%。 1.2.4 统计学方法用 SPSS11.0 软件做统计分析，P＜0.05 为差异有显著性。 2 结果 2.1 围手术期血清 VEGF 水平比较围手术期两组血清 VEGF 水平见表 1。从表 1 可见， 术前肿瘤组血清 VEGF 水平虽高于对照组，但差异无显著性（P＞0.05）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的。术后两组血清 VEGF 均较术前明显升高（P＜0.05）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的。肿瘤组术后血清 VEGF 较对照组明显增加，两组 差异有显著性（P＜0.05）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的。 2.2 肿瘤组术前血清 VEGF 与肿瘤临床病理参数的关系肿瘤组术前血清 VEGF 与肿瘤 临床病理参数的关系见表 2。从表 2 可见，肿瘤组织细胞中的 VEGF 表达阳性患者的血清 VEGF 水平虽高于表达阴性者，但差异无显著性（P＞0.05）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的；有淋巴结转移的患者血清 VEGF 水平显著高于无淋巴结转移者（P=0.003）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的；肿瘤侵犯浆膜的患者血清 VEGF 水平 显著高于浆膜未受累者（P=0.037）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的；临床分期为Ⅲ期和Ⅳ期期患者血清 VEGF 水平显著高于 Ⅰ期和Ⅱ期期者（P=0.029）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的。 注：*TNMTNM 分期根据新国际 T.N.M 胃癌分期转换为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期期 2.3 随访术后 60 例均得到随访，5 例Ⅰ期期和 2 例Ⅱ期期患者术后未化疗而未得到术后随 访时的外周血（随访至今均存活）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的，其余 53 例患者有术后 6 个月共 6 次随访的血清检测结 果。随访 30～36 个月，在 53 例患者中 11 例死亡，5 例出现转移和复发，其余 37 例无瘤 存活，死亡及转移复发的患者术前的血清 VEGF 水平高于无瘤存活的患者（见表 3）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的，且 差异有显著性（P＜0.05）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的。死亡 11 例中 7 例术后 VEGF 持续高水平表达，5 例表达量逐 渐升高；5 例出现复发和转移的患者，其中 3 例术后血清 VEGF 水平持续高表达，并且表 达量升高；37 例无瘤存活者中 21 例术后 VEGF 水平持续低表达，6 例升高后转低，10 例 术后 VEGF 水平出现逐渐升高，目前正密切随访中。 3 讨论 VEGF 是一种特异的作用于内皮细胞的多功能因子，作为一个重要的促血管生成因子， 在原位诱导血管生成的作用十分强大［3］。VEGF 作为内皮细胞特异有丝分裂原刺激内皮 细胞增生、促使血管渗漏、刺激细胞迁移，导致纤维蛋白原外渗进入肿瘤间质而促成肿瘤 浸润组织的血管生成，从而形成肿瘤内部高密度的微血管网。VEGF 还能刺激淋巴内皮细 胞增生，增加肿瘤高血源性和高淋巴源扩散的风险［4］。VEGF 还可通过诱导 Bcl-2 的表 达、激活有丝分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activatedproteinkinase，MAPK）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的和抑制 cJNK(c-jun-NH3-kinase）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的而抗肿瘤细胞凋亡。 本研究结果显示，肿瘤侵犯浆膜、有淋巴结转移、临床分期较晚的患者血清 VEGF 水 平显著升高，提示血清 VEGF 水平在一定程度上反映肿瘤进展的程度。Lissoni 等研究指出， 晚期恶性肿瘤伴有 VEGF 内源性分泌增加，提示血清 VEGF 水平升高，则预后较差。 Hyodo 的研究发现，在胃肠肿瘤中，有远处转移患者的血清 VEGF 较无远处转移的患者明 显增高，且转移患者化疗前 VEGF 水平低者化疗效果及生存期较升高者好。Kumar 等的研 究发现，结直肠癌淋巴结阳性患者的血清 VEGF 比阴性者明显升高。Fujisaki 发现血清 VEGF 水平与 Duke’s 分期显著相关。Celen 等报道诊断结直肠肿瘤 VEGF 的敏感性高于 CEA 等肿瘤标志物［5］。 术前肿瘤组血清 VEGF 水平虽高于对照组，但无统计学意义，术后两组血清 VEGF 均 较术前升高，但肿瘤组较非肿瘤组更为明显，这可能与手术创伤、术后伤口生长及创面修 复有关。在随访血清 VEGF 水平变化中，我们发现出现复发、转移及死亡组术前的血清 VEGF 较无瘤存活组明显升高，可以反映肿瘤病变的严重程度。复发、转移及死亡组围手 术期的血清 VEGF 水平有升高，但差异无显著性，这可能为术前除原发肿瘤以外，微转移 灶分泌入循环血中的 VEGF 占较大比例，手术清除了原发灶，但对于微转移灶无效，手术 创伤及术后修复使 VEGF 水平升高，又促进了微转移灶的进一步发展，因此我们认为血清 VEGF 是特异性较高的微转移检测指标。 肿瘤组织中 VEGF 阳性表达率亦随肿瘤侵犯浆膜、淋巴结转移、临床分期进展而增加。 本研究显示，血清 VEGF 水平和肿瘤组织中 VEGF 阳性表达率两者之间无显著相关，这可 能与血清 VEGF 反映全身组织的 VEGF 水平，而肿瘤组织中 VEGF 阳性表达率仅反映局部 肿瘤组织中 VEGF 有关。尽管如此，无论是术前血清 VEGF 水平或肿瘤组织中 VEGF 阳性 表达都与肿瘤的转移、分期及预后密切相关。故检测血清 VEGF 是判断肿瘤分期和预报胃 癌术后肿瘤复发及生存的独立指标之一［6］，定期检测血清 VEGF 水平的变化还可以对 肿瘤治疗效果及肿瘤复发转移提供依据。 随着对 VEGF 研究的深入，可以设想通过 VEGF 和 VEGF 受体抗体的功能阻断，阻止 肿瘤血管生成，可能成为抑制肿瘤生长和预防肿瘤转移的生物靶点之一。 【摘要】目的评价国产硝苯地平控释片治疗高血压病（EH）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的的临床疗效和不良反应。 方法采用随机对照研究高血压病病人 120 例，60 例给予国产硝苯地平控释片(试验组)，另 外 60 例服用进口硝苯地平控释片（对照组）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的，均 30～60mg，qd×8 周。治疗前后做人工 血压测定、24h 动态血压测定（ABPM）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的、血生化检验、血常规、尿常规及心电图。结果 国产与进口硝苯地平控释片总有效率分别为 95％和 97％，显效率为 78％和 82％，2 组比 较差异无显著性（P＞0．05）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的；2 组服药前、服药后 8 周的 24h、白昼和夜间的平均收缩 压、舒张压明显下降，差异有显著性（P<0.01）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的，国产与进口硝苯地平控释片服药后 8 周 各时点收缩压和舒张压均较服药前下降，差异有显著性（P<0.01）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的。2 组不良反应均轻微。 试验组和对照组的不良反应发生率分别为 13.3％和 11.7％，撤药率分别为 1.7%和 3.3% （P＞0.05）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的，组间比较无统计学差异。结论国产硝苯地平控释片与进口硝苯地平控释片 一样治疗高血压病有效、安全，不良反应少，而且有良好的耐受性，是轻、中度高血压满 意的降压药物。 【关键词】硝苯地平控释片；高血压病；药物评价 Domesticvsimportednifedipinecontrolledreleasetabletsintreatmentofessentialhyperte ntion 【Abstract】ObjectiveToevaluatetheclinicalefficacyandadversereactionsofdomesticni fedipinecontrolledreleasetabletsinthetreatmentofessentialhypertent5HZ〗MethodsOnehu ndredandtwetypatientswithEHwereincluded.Astudyrandomizedwasconducted.Sixtypatient sweretreatedwithdomesticnifedipinecontrolledreleasetablets(Testgroup)，30～60mg/ dandanothersixtypatientsweretreatedwithimportednifedipinecontrolledreleasetablets(Cont rolgroup)30～60mg／ dfor8wk.Bloodpressureweretakenbeforeandafterdomesticvsimportednifedipinecontrolledr eleasetabletstreatment.24hourambulancebloodpressure，bloodandurineroutine，bloodbi ochemics，ECGwereexaminedbeforeandaftertreatment.ResultsThetotaleffectiverateofdo mesticnifedipinecontrolledreleasetabletswas95%，remarkableeffectiverateofdomesticnife dipinecontrolledreleasetabletswas78%； whilethoseofimportednifedipinecontrolledrelessetabletswere97%and82%，therewasnosig nificantdifference(P＞ 0.05).Bloodandurineroutine，bloodbiochemicswereunchangedbeforeandaftertreatment； theadversereactionsweremild.Attheendofthe8thweek，thetwogroupthemeanSBP/ DBPof24h，day-timeandnighttimewereobviouslydecreasedandhadsignificantdifferencebeforeandaftertaken(P<0.01).SB PandDBPweredecreasedandhadsignificantdifferenceateverytimepointof24hABPMintreatment(P<0.01).Theadversereactionratesintestandcontrolgroupswere13.3%an d11.7%，respectively，andthewithdrawalrateswere1.7%and3.3%，respectively.Nostatist icalsignificantdifference(P>0.05)betweenthepatientsintestandcontrolgroupswerefound.Co nclusionDomesticnifedipinecontrolledrelessetabletsaswellasimportednifedipinecontrolledr elessetabletsiseffective，safeandwelltoleratedinmildtomoderatehypertensivepatients. 【Keywords】nifedipinecontrolledrelessetablets；hypertention；drugevaluation 硝苯地平（nifedipine）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的作为最早的 1、4 双氢吡啶类钙通道阻滞药，具有阻止钙离子 进入细胞膜，直接舒张血管平滑肌细胞，而起到扩张血管、降血压的作用。与其他钙通道 阻滞药相比，该药具有生物利用度高、降压疗效显著肯定的特点，但其半衰期短，达峰后 持续时间较短［1］。自进口硝苯地平控释片（nifedipinecontrolledrealeasetablets）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的上市 来，已在 40 余国家及地区使用，主要适应证为高血压、心绞痛，其克服了硝苯地平片的缺 点，疗效较为满意，不良反应较少［2～4］。上海现代制药股份有限公司，在国内首先成 功生产了国产硝苯地平控释片［3，4］，现与进口硝苯地平控释片进行临床治疗对比研究， 评价其治疗原发性高血压的临床疗效、不良反应及安全性。 1 临床资料 1.1 病例人选标准门诊及住院病例诊断为高血压病Ⅰ期级和Ⅱ期级的病人，血压水平在以 下范围：舒张压为 90～110mmHg 并且收缩压<180mmHg，同时 ABPM 平均舒张压 85mmHg。病例年龄 35～80 岁。同意停用其他抗高血压药物及影响血压的药物，并且与 医生配合。 1.2 病例排除标准收缩压＞180mmHg 或舒张压＞110mmHg；高血压合并视网膜 3 级 及以上病变（K－W 氏分级法）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的、脑病、脑血管病（6 个月之内发病）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的、心肌梗死（6 个月 之内发病）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的、心力衰竭、器质性心脏病、糖尿病肾病；继发性高血压：主动脉狭窄、原发 性醛固酮增多症、肾脏病变、嗜铬细胞瘤、皮质醇增多症；大动脉瘤或夹层动脉瘤；妊娠； 胃肠病变或胃肠手术后有可能影响药物吸收；肝、肾功能受损：血清胆红素在正常值上限 的 1.5 倍及以上；AST 或（和）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的ALT 在正常值上限 2 倍及以上；肌酐在正常值上限 1.5 倍 及以上；对二氢吡啶类钙通道阻滞药过敏；精神性疾病病人，无自知力，不能确切表述病 情；试验期间同时服用可能影响血压的其他药物者。 1.3 病例剔除标准未按设定要求服药，无法判定疗效；服用禁用药；由于不良反应而 终止用药。 1.42 组治疗前基本情况入选病例共 120 例，随机分为 2 组。国产硝苯地平控释片组 60 例，男 40 例，女 20 例，年龄（56±8）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的岁；体重（67±9）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的kg，高血压病程(9±6)年，治疗 前收缩压(150±11.2)mmHg，舒张压（102±4.5）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的mmHg；进口硝苯地平控释片组 60 例， 男 36 例，女 24 例，年龄（58±9）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的岁；体重（66±10）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的kg，高血压病程(8±7)年，治疗前收 缩压（156±9.8）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的mmHg，舒张压（98±6）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的mmHg。治疗前心率以及伴有冠心病、糖尿病 和高脂血症的比例均无统计学差异。 2 研究方法 2.1 试验设计采用随机对照试验进行研究，国产硝苯地平控释片组给予受试药物国产 硝苯地平控释片(商品名：欣然)，为上海现代制药股份有限公司研制生产，生产许可证号 为：国药准字 X20000079，进口硝苯地平控释片组给予进口硝苯地平控释片(商品名：拜 新同)，为德国拜耳公司生产，生产许可证号为：国药准字（2001）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的J－31 号。试验开始前 若已服用降压药物的受试者，需停服原降压药，口服安慰剂 2 周后，进人临床试验期；近 2 周内未服用降压药的受试者可直接进人临床试验期。 2 组均在每日晨醒后起床前服药，开始剂量为 30mg（1 片）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的，qd，周 2 未达效者，周 3 起加量至 60mg（2 片）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的，每日最大剂量不超出 60mg。总疗程为 8 周。 2.2 临床观察项目和指标治疗前后进行常规体检。血常规、尿常规、血生化及心电图 检查。血压由固定医生测试，血压单位 mmHg，采用水银柱血压计，受试者测量前 30min 内不喝浓茶或咖啡，受试者应先至少休息 15min，肌肉放松，呼吸自然。测量时受试者体 位为座位，右上臂测量共 3 次，取舒张压相差不超过 4mmHg 的 2 次，取其平均值作为血 压记录，舒张压以消音点（KorotkoffphaseV）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的为准。血压测定时间：治疗前血压是指停用 原降压药后，服用安慰剂周 2 内 3 次血压的平均值；治疗期血压是指周 1，2，4，6 内在服 药后 3～4h 测量所得的血压值；治疗结束血压是指疗程最后 1 周所测 3 次血压平均值。在 测血压的同时观察记录症状、心率、心律变化。24Habpm：仪器设备使用无创性动态血压 监测仪。服药前及服药后 8 周末行 ABPM 各 1 次。ABPM 设置为白昼（5：00～23：00）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的 每 30min 测 1 次；夜间（23：00～5：00）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的每 45min 测 1 次；两组均自 9：00AM 开始至 次日 9：00AM 结束。