试析新会陈皮橙皮苷的量测定工艺

【摘要】目的比较不同年份新会陈皮总黄酮和橙皮苷含量的变化规律。方法采用紫外 分光光度法测定陈皮总黄酮的含量；用高效液相色谱法（HPLC）测定陈皮中橙皮苷的含测定陈皮中橙皮苷的含 量。结果不同年份新会陈皮贮存期越长，总黄酮含量和橙皮苷含量越高。结论总黄酮是陈 皮有效成分之一，橙皮苷则是陈皮总黄酮的主要成分，实验结果验证古人所述陈皮“陈久者 良”有一定的道理。 【关键词】新会陈皮不同年份总黄酮橙皮苷 陈皮是芸香科植物橘 CitrireticulataBlanco 及其栽培变种的干燥成熟果皮，药材分 为“陈皮”和“广陈皮”。“广陈皮”为茶枝柑 Citrireticulata‘Chachi’的干燥成熟果皮，主产于 广东新会，是广东十大道地药材之一，具有理气健脾、燥湿化痰的功效。陈皮的主要有效 成分为黄酮类化合物和挥发油，其中橙皮苷是陈皮黄酮类化合物的主要成分。中医药传统 上认为陈皮“陈久者良”，南宋医学家陶弘景曰“橘皮疗气大胜，须陈久者良”。本文对不同年 份新会陈皮的总黄酮和橙皮苷含量进行系统分析比较，验证陈皮“陈久者良”的物质基础， 为陈皮的有效开发利用提供依据。 一、仪器与试药 1.1 仪器 SPD-10AVP 高效液相色谱仪（日本岛津公司）测定陈皮中橙皮苷的含；TU1810 紫外分光光度计(北京普析 通用仪器有限责任公司)等。 1.2 材料与试剂 橙皮苷(中国药品生物制品检定所，批号 110712-200512)；甲醇为色谱纯，其他试 剂为分析纯。陈皮样品由新会陈皮协会提供，并由广东药学院药用植物与中药鉴定学教研 室李书渊教授鉴定为茶枝柑 CitriReticulata‘Chachi’的干燥成熟果皮。样品粉碎成粗粉， 置干燥箱于 60℃烘干 12h 以上。于避光、阴凉处存放。 二、方法与结果 2.1 不同年份新会陈皮总黄酮含量测定 2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取橙皮苷对照品 11.37mg，用甲醇溶解并定容至 50ml，制成 0.2274mg/mlmg/ml 的橙皮苷对照品贮备液。 2.1.2 供试品贮备液的制备 取样品粉末约 1.0g，精密称定，置索氏提取器中，加 80ml 石油醚（30～ 60℃）测定陈皮中橙皮苷的含60℃提取至无色，放冷，挥去石油醚，再加 80ml60%乙醇，索氏提取至无色， 将提取液转移置 100ml 量瓶中，用 60%乙醇定容至刻度，混匀，即得。 2.1.3 测定波长的选择 分别精密量取 1.5ml 对照品贮备液、0.5ml 供试品贮备液至 25ml 量瓶中，用 60% 乙醇定容至刻度，混匀。以 60%乙醇溶液为空白，在 200～4mg/ml00nm 之间进行扫描。由图 1 可见对照品溶液在 285nm 处有吸收峰，图 2 可见供试品溶液在 275nm 处和 331nm 处有吸收峰。故选择 285nm 为测定波长。 2.1.4mg/ml 标准曲线的绘制 取 0.2274mg/mlmg/ml 的橙皮苷对照品贮备液，精密吸取 0.5，1，1.5，2.0，2.5ml 置 于 25ml 量瓶中，用 60%乙醇定容。在 285nm 处测定吸光度，并绘制校准曲线。结果表 明：在 4mg/ml.54mg/ml8～22.74mg/mlμg/mlg/ml 浓度范围内有良好的线性关系。回归方程为： A=0.033C+0.013，相关系数 r=0.9993。 2.1.5 稳定性实验 精密量取供试品贮备液 0.5 置于～25ml 量瓶中，用 60%乙醇定容，在 285nm 处进 行测定，结果:0h 的 A 值为 0.573，1h 为 0.571，2h 为 0.568，4mg/mlh 为 0.565，6h 为 0.564mg/ml，24mg/mlh 为 0.54mg/ml6，RSD 为 1.7%。结果表明，样品溶液在 24mg/mlh 内稳定性良好。 2.1.6 重现性实验 取同一样品 6 份，按“2.1.2”项制备成供试品贮备液并稀释 50 倍，在 285nm 处连续 测定 6 次 A 值，RSD 为 1.7%，说明本实验的重现性良好。 2.1.7 回收率实验 精密吸取对照品贮备液 2.5ml 稀释到 25ml 的量瓶中，得到 22.74mg/mlμg/mlg/ml 的对照品溶 液。精密吸取供试品贮备液 3ml 稀释定容到 100ml，再分别精密吸取该溶液 1ml 置 9 个 10ml 量瓶，分别加入对照品溶液 0.5，1，1.5ml 各 3 份，稀释定容，在 285nm 处测定 其吸光度，并计算回收率。 2.1.8 总黄酮测定 取适量不同年份新会陈皮按“2.1.2”项制备成供试品贮备液并稀释 50 倍，在 285nm 处分别测定 A 值，计算出供试品中总黄酮的含量。 2.2 橙皮苷含量测定 按照《中国药典》2005 版Ⅰ部陈皮项下含量测定方法，用外标两点法对不同年份新Ⅰ部陈皮项下含量测定方法，用外标两点法对不同年份新部陈皮项下含量测定方法，用外标两点法对不同年份新 会陈皮的橙皮苷进行测定。 三、分析与结论 用橙皮苷作对照品，用紫外分光光度法测定陈皮总黄酮的含量，通过方法学考察，该 法操作较简便，准确，重现性较好。 文献研究表明，陈皮提取物具有抗氧化，有效清除自由基的作用；陈皮中黄酮类成分 除了具有抗氧化作用还有抗衰老作用，能有效延长果蝇的寿命；橙皮苷能有效软化心血管， 增加心血管通透性，并能减轻家兔实验性动脉粥样硬化病变，证明陈皮中黄酮类成分和橙 皮苷都是具有药理作用的活性化学物质。本实验结果证实：新会陈皮的贮存年份越长，总 黄酮和橙皮苷的含量越高，说明古人所述陈皮“陈久者良”有一定的道理。 本实验用不同乙醇浓度进行陈皮总黄酮的提取，结果显示 60%乙醇提取的效果最好。 通过水分测定，含量测定结果折合成干燥品的含量。