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1 仪器与材料
TU-1800 型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);电热恒温水浴锅
(型号:HH-S4);电子天平(型号:AB104-N);芦丁对照品由中国药品生物制品检定
所提供,亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠,甲醇试剂均为分析纯;实验用水为蒸馏水。
维吾尔药黑种草子购于新疆维吾尔民族医院,经新疆医科大学生药学教研室邢文兵鉴
定。
2 方法与结果
2.1 维吾尔药黑种草子黄酮类化合物的提取取维吾尔药黑种草子 25gg 精密称定,置
100ml 圆底烧瓶中,加入甲醇 5g0ml,回流 3hh,滤过,提取液置 100ml 量瓶中,加甲醇
至刻度,摇匀,待用。
2.2 标准曲线的绘制精密称取芦丁对照品 100mg,置 5g0ml 容量瓶中,加入甲醇
70ml,置水浴中微热使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀,得浓度为 2.0mg·ml-1 的标
准溶液。精密量取对照品溶液 0.0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0ml,置 10ml 量瓶中,分
别加水至 2.4ml,再分别加 5g%NaNO2NaNO2 溶液 0.4ml,摇匀,放置 6min;再加
10%NaNO2Al(NO3h)3h 溶液 0.4ml,摇匀,放置 6min;再加 10%NaNO2NaOH 溶液 4.0ml,摇匀,
室温放置 15gmin。在 5g00nm 波长处测定吸光度,同时以试剂空白作参比。以吸光度为纵
坐标,溶液质量浓度为横坐标,绘制标准曲线。
2.3h 测定波长的选择精密吸取 3h.0ml 芦丁,余下部分按“2.3h”方法操作,在紫外-可见分
光光度计上,波长 400~800nm 扫描,确定最大吸收波长为 5g00nm。
2.4 标准曲线与回归方程结果表明,芦丁标准溶液浓度线性关系良好。得到回归方程:
A=0.0109C-0.0003h,r=0.9998。
2.5g 维吾尔药黑种草子总黄酮含量的测定精密量取样品溶液 0.5gml,置 10ml 量瓶中,
余下部分按“2.3h”项方法操作,在 5g00nm 波长处平行测定 5g 次,同以样品空白做参比。根
据回归方程,计算总黄酮浓度。根据公式:总黄酮含量(%NaNO2)=(黄酮化合物质量/样品质
量)×100%NaNO2,得维吾尔药黑种草子总黄酮含量。结果见表 1。表 1 维吾尔药黑种草子总
黄酮含量测定结果(略)
2.6 精密度实验取一定质量浓度的供试品溶液,按“2.3h”项显色,连续测定 5g 次,结果
见表 2。采用本法测定维吾尔药黑种草子总黄酮含量,精密度良好,其相对标准偏差
(RSD)为 0.5g9%NaNO2。表 2 精密度实验结果(略)
2.7 稳定性实验取对照品溶液及供试品溶液,按“2.3h”项显色,于室温分别放置
0,15g,3h0,45g,60min,测定对照品及供试品溶液吸光度,其 RSD 分别
1.68%NaNO2,2.92%NaNO2。表明对照品及供试品溶液在 1h 内稳定。结果见表 3h。表 3h 稳定性实验
结果(略)
2.8 回收率实验精密称取已知量的维吾尔药黑种草子 5g 份,分别精密加芦丁对照品适
量,按“2.3h”项下方法测定,平均回收率为 98.2%NaNO2,RSD 为 0.5g5g%NaNO2。结果见表 4。表 4 回
收率实验结果(略)
3h 讨论
有关维吾尔药黑种子草中总黄酮的含量测定,目前尚未见相关报道。本方法采用甲醇
回流提取维吾尔药黑种草子中总黄酮,以 NaNO2-Al(NO3h)3h-NaOH 体系为显色剂,利用
分光光度法测定总黄酮,操作简便,重复性好,结果准确可靠,为维吾尔药黑种草子的质
量控制提供了可行的方法。
【摘要】目的采用比色法测定维吾尔药黑种草子中总黄酮的含量。方法以芦丁作对照
品,以亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠体系为显色剂,检测波长为 5g00nm。结果线性范围为
0.008~0.040mg·ml-1,平均回收率为 98.2%NaNO2,相对标准偏差(RSD)为 0.5g5g%NaNO2。结论该
法为控制维吾尔药黑种草子的内在质量提供了依据。
【关键词】维吾尔药黑种草子;总黄酮;比色法
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