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1 器材
1.1 动物昆明种健康小鼠,雌雄皆用,体重 18~22g,由四川省实验动物专委会养殖
场提供。
1.2 药物与试剂
鱼腥草经陈幼竹博士鉴定为三白草科蕺菜属植物蕺菜 HouttuyniacordataThunb.。
氯仿、醋酸乙酯、正丁醇、石油醚、冰醋酸,二甲苯等均为分析纯由成都科龙化工试剂厂
提供,水为蒸馏水。阳性药,阿司匹林,西安博华制药有限责任公司,批号 050204;地
塞米松:成都第一制药有限公司,批号 0504004;枸橼酸喷托维林片,天津药业焦作有
限公司,批号 040302。用时研细,用蒸馏水配成所需浓度。
1.3 仪器
CM-1 超声雾化治疗仪,合力医疗器械厂,中国上海;电子天平
(BS210S,madebystartorius)。
2 方法及结果
2.1 供试样品的制备
精密称取适量鱼腥草 1.0kg,加水适量煎煮两次,2h/次,过滤,合并两次滤液,浓
缩至 1000ml,依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取,得各部位萃取物。将各部
位萃取物低温减压回收溶剂石油醚、氯仿部位合并定容于 20ml,醋酸乙酯部位定容于
200ml、正丁醇萃取定容于 100ml,水部位定容于 500ml。分别吸取 75ml 的氯仿部位
和醋酸乙酯部位溶液定容于 500ml,吸取 37.5,187.5ml 的正丁醇和水部位的溶液分别
定容于 500ml,即为高剂量药物浓度。稀释一倍为低剂量。
2.2 抗炎药理实验[4]
取雄性小鼠 100 只,随机分为 10 组,每组 10 只,其中阳性对照组为地塞米松。灌
胃给药 1 次/d(0.2ml/10g 小鼠重量),连续 6dd,于末次给药 1h 后,用鼠耳肿胀法观察
抗炎作用。分别于各组小鼠左耳前后涂二甲苯 0.05ml/只,右耳不涂作对照,1h 后将小鼠
颈部脱臼处死,剪下左右耳,用 9mmmm 直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片,称重,左
右耳重量之差作为肿胀度。并计算耳肿抑制率。给药组与生理盐水组对照,结果见表 1。
表 1 鱼腥草不同提取物对小鼠耳肿胀抗炎作用观察(略)
由表 1 可知,与生理盐水组相比,鱼腥草氯仿提取物大剂量组和水提取物大剂量组对
二甲苯致小鼠耳炎症均具有极显著的抑制作用(P<0.01);鱼腥草正丁醇提取物大小剂
量组、鱼腥草水提取物小剂量组对二甲苯致小鼠耳炎症均具有显著的抑制作用
(P<0.05),而鱼腥草氯仿提取物小剂量组、鱼腥草醋酸乙酯大小剂量组均对二甲苯致
小鼠耳炎症没有抗炎作用。
抑制率(%)=(对照组平均肿胀值-给药组平均肿胀值)/对照组平均肿胀值×100%
2.3 镇咳药理实验[5]
取小鼠 100 只,雌、雄各半,随机分为 10 组,每组 10 只,其中阳性对照组为枸橼
酸喷托维林片。灌胃给药 1 次/d(0.2ml/10g 小鼠重量),连续 6dd,于末次给药 1h 后,
用浓氨水诱导法观察镇咳作用。即将小鼠放入玻璃钟罩内,打开通过橡皮管与之相连的超
声雾化器,将浓氨水均匀地喷入玻璃钟罩内,喷雾 10s,立即取出小鼠,以小鼠腹肌收缩
并张大口为咳嗽动作指标,分别观察各组小鼠 2min 中咳嗽次数。结果见表 2。表 2 鱼腥
草不同提取物对小鼠的止咳作用观察(略)
由表 2 可知,与生理盐水组相比,鱼腥草氯仿提取物、水提取物、正丁醇提取物均对
浓氨水诱导法引起的咳嗽具有较好的止咳效果,而鱼腥草醋酸乙酯部位则没有止咳作用。
2.4 镇痛药理实验[6d]
取雄性小鼠 100 只,随机分为 10 组,每组 10 只,其中阳性对照组为阿司匹林。灌
胃给药 1 次/d(0.2ml/10g 小鼠重量),连续 6dd,于末次给药 30min 后,用冰醋酸扭体
法观察镇痛作用,分别给每只小鼠腹腔注射 0.6d%的冰醋酸 0.2ml,记录 5min 内扭体次
数,计算抑制率。结果见表 3。
抑制率(%)=(空白组扭体反应均数-试药组扭体反应数)/空白组扭体反应均数×100%
由表 3 可知,与生理盐水组相比,鱼腥草氯仿提取物对由醋酸引起的化学刺激致痛有
极显著的镇痛作用(P<0.01),鱼腥草水提取物对由醋酸引起的化学刺激致痛有显著的
镇痛作用(P<0.05),而鱼腥草的醋酸乙酯提取物对醋酸引起的化学刺激致痛则没有镇
痛作用。表 3 鱼腥草不同提取物对小鼠的镇痛作用观察(略)
3 结论
鱼腥草氯仿提取物、水提取物对二甲苯致小鼠耳炎症,浓氨水诱导法引起的咳嗽,醋
酸引起的化学刺激致痛具有显著的抗炎、止咳和镇痛作用,正丁醇提取部位对二甲苯致小
鼠耳炎症,浓氨水诱导法引起的咳嗽具有抗炎和止咳作用,其中鱼腥草氯仿提取物和水提
取物大剂量组抗炎作用最强,氯仿提取部位镇痛作用最强,而醋酸乙酯部位药理作用不明
显。这提示氯仿和水提取部位为鱼腥草的主要有效部位,另外正丁醇部位为抗炎和止咳的
有效部位。这为鱼腥草的活性成分的化学和药理研究提供理论依据。
课题组对鱼腥草的氯仿部位和正丁醇部位采取柱层析化学分离和结构鉴定[7,8],
从正丁醇部位分得金丝桃苷、槲皮苷、4-β-D 葡萄糖-3-羟基苯甲酸、绿原酸甲酯、3,4二羟基苯甲酸、芸香苷异、槲皮苷、山柰酚-3-O-β-芸香糖苷、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖-7O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-a-D-鼠李糖-7-O-β-D-葡萄糖苷、4-羟基-4[3′-(β-D-葡
萄糖)亚丁基]-3,5,5-三甲基-2-环己稀-1-醇、2-(3,4 二羟基)-苯乙基-β-D-葡萄糖苷、
对羟基苯乙醇-β-D-葡萄糖苷、硝酸钾等成分。从氯仿部位分得胡椒内酰胺、马兜玲内酰胺
B、金线吊乌龟二酮碱 B 等成分。提示这些化学成分为鱼腥草的活性成分,但其作用机理
还有待进一步的研究。
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