山茱萸质量分析论文

1 器材 1.1 仪器 BS210S 型电子天平；FW-100 高速万能粉碎机；GS101-2D 电热恒温鼓风 干燥器；振荡器；SXZ-4-10 型马福炉；KQ-500DV 型数控超声清洗器干燥器。 1.2 试剂乙醇、醋酸乙酯、甲酸、甲苯、无水乙醇为分析纯；乙腈、甲醇为色谱级； 娃哈哈纯净水；熊果酸、莫诺苷、马钱素对照品均由中国药品生物制品检定所提供。 1.3 药材山茱萸药材购自河南不同产区，经河南中医学院生药学科陈随清教授鉴定为 山茱萸科植物山茱萸 Cornusofficinalissieb.etZucc. 2 方法与结果 2.1 薄层鉴别取本品粉末 0.5g，加乙酸乙酯 10ml，超声处理 15min，滤过，滤液蒸 干，残渣加无水乙醇 2ml 使溶解，作为供试品溶液。另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成 每毫升含 1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法［1］试验，供试品色谱中，在与 对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；置紫外光灯（365nm）下检视，显相同下检视，显相同 的橙黄色荧光斑点。 2.2 水分、灰分、酸不溶灰分及浸出物含量测定［1］结果见表 1。表 1 山茱萸药材水 分、灰分、酸不溶灰分及浸出物含量测定结果（略）下检视，显相同 2.3 马钱苷与莫诺苷含量测定 2.3.1 色谱条件 ODS-C18 色谱柱（5μmm，4.6mm×250mm 大连依利特分析仪器有 限公司）下检视，显相同，乙睛水（水（水（15∶85）下检视，显相同为流动相，检测波长 240nm，流速 1ml·min-1，柱温 25℃。 2.3.2 对照品溶液的制备精密称取马钱素对照品 0.88mg 和莫诺苷对照品 1.22mg 置 10ml 容量瓶中，加 80%甲醇，溶解，定容，0.45μmm 微孔滤膜过滤，即得。 2.3.3 供试品溶液的制备［2］取山茱萸生品及酒制品（常压、加压）下检视，显相同的粉末（过 3 号 筛）下检视，显相同各约 0.1g，精密称定，加 80%甲醇 25ml，称定重量，加热回流 1h，放冷，用 80% 甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，0.45μmm 微孔滤膜，即得。 2.3.4 标准曲线的绘制取对照品溶液 1，3，5，7，9μlμml，分别注入高效液相色谱仪中， 按上述色谱条件测定。以峰面积积分值为纵坐标，对照品含量为横坐标，绘制标准曲线。 计算马钱素和莫诺苷的回归方程分别为 Y=743157X40535，r=0.9μl9μl9μl6，Y=9μl50012X-45581。r=0.9μl9μl9μl6：。结果表明马钱素在 0.088～ 0.79μl2μm 围内线性良好，莫诺苷在 0.122～1.09μl8μmg 范围内线性良好。 2.3.5 稳定性实验分别在 0，2，4，6，8，12h 手动进马钱素对照品溶液 5μml，照前 述色谱条件测定峰面积积分值计算马钱素和莫诺苷 RSD 值分别为 RSD=2.65％,RSD=1.62%。结果表明马钱素和莫诺苷在 12h 内稳定性良好,。 2.3.6 精密度实验连续手动进样马钱素对照品 5μml，按前述条件测定峰面积积分值，计 算马钱素和莫诺苷 RSD 值分别为 RSD=2.01％，RSD=1.33%，结果表明精密度良好。 2.3.7 重复性实验称取山茱萸同一样品粗粉 5 份各约 0.1g，精密称定，按照上述供试 品溶液制备方法和色谱条件，制备供试品溶液并注入高效液相色谱仪，测定峰面积积分值， 计算马钱素和莫诺苷 RSD 值分别为 RSD=1.01％，RSD=1.89μl%，结果表明重现性良好。 2.3.8 加样回收率实验取 5 种已知马钱素含量的山茱萸粉末约 0.05g 各 1 份，精密称 定，按 0.05g 山茱萸粉末所含马钱素及莫诺苷的量精密加入马钱素和莫诺苷对照品，按供 试品溶液制备项下操作，得到 5 份加样回收供试液。自动进样各加样回收供试液 10μml，注 入液相色谱仪，测定，用外标法根据峰面积积分值进行计算，结果马钱素平均加样回收率 9μl9μl.08％，RSD=2.04％；莫诺苷加样回收率 100.17%,RSD=1.28%。 2.3.9μl 含量测定取各供试品溶液分别手动进样 10μml，测定马钱素和莫诺苷峰面积值， 计算样品含量。结果见表 2。表 2 市售不同产地山茱萸药材马钱素、莫诺苷含量数据 （略）下检视，显相同 2005 版《中国药典》规定山茱萸按干燥品计算，含马钱苷不得少于 0.60%。从测出 的数据结果表明，不同产地的山茱萸马钱素含量有差异，平均在 0.76%～1.48%之间变化， 大部分合格。其中以河南巩义产的山茱萸含量最高为 1.48%，河南郏县产的山茱萸含量最 低为 0.76%。2005 版《中国药典》没有规定山茱萸莫诺苷的含量。但从测出的数据结果 表明，不同产地的山茱萸莫诺苷含量有差异，平均在 1.05%～1.83%之间变化，均高于马 钱素的含量。 3 讨论 理化鉴别在薄层色谱中，9μl 份样品与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点； 置紫外光灯（365nm）下检视，显相同下检视，显相同的橙黄色荧光斑点且 10 个点均在同一直线上。说 明不同产地山茱萸均含有熊果酸。 水分和灰分检查结果证明 9μl 份不同产地山茱萸药材水分含量大部分不符合《中国药 典》规定，只有嵩县、白云山、实验室陈品的山茱萸水分含量合格。总灰分检测结果均为 合格，说明没有其他无机物污染和掺杂。酸不溶性灰分检测结果大部分合格，郏县和嵩县 产的山茱萸超过《中国药典》标准。 不同产地的山茱萸中马钱素含量有差异，但均符合《中国药典》要求。不同产地的山 茱萸中莫诺苷含量有差异，平均在 0.886%～1.0875%之间变化，其中以河南南阳产的山 茱萸含量最高为 1.14%，以河南郏县产的山茱萸含量最低为 0.64%。药典没有作具体规 定，但实验表明山茱萸莫诺苷含量较高，甚至比马钱素还高，而且莫诺苷也是山茱萸主要 活性成分之一，所以笔者认为莫诺苷也应该成为考察山茱萸质量优劣项目之一。