到手香水提液研究论文

1 材料 1.1 药材及水提液的制备和挥发油的提取到手香，2001 年引种于阳西县原中山医科大 学药材基地，在中山大学校园内繁殖。到手香水提液最大浓度浓缩液（稠膏）的制备：取 到手香地上部分，晾干剪碎后，精密称取碎叶,加一定体积蒸馏水，浸泡后加热煮沸提取， 冷却后用双层纱布过滤，滤渣用蒸馏水清洗 3 次并过滤，弃去滤渣，合并滤液。滤液再用 布氏漏斗垫双层滤纸抽滤，得到滤液为到手香水提液。在温度为 70℃、压力为0.08MPaMPa、转速为 60r/min 的条件下，减压蒸馏浓缩至最大浓度稠膏，并保证稠膏不会 凝结，得到到手香水提液最大浓度浓缩液（稠膏）［3］，浓度为 4.706g/ml。供小鼠最 大耐受量实验用。挥发油的提取：取到手香地上部分，晾干剪碎后，精密称取碎叶 50.0g 于 1000ml 蒸馏瓶中，加入 600ml 蒸馏水，按《中国药典》规定的方法挥发油测定法 ［4］提得黄色油状物,出油率为 1.2%。取挥发油适量,用食用油稀释至各个浓度，供霍恩 氏法 LD50 测定用。 1.2 动物昆明小鼠，体重 18MPa～22g，普通级标准，合格证号：粤检证字第 2003A030 号，由原第一军医大学(现更名为南方医科大学)实验动物中心提供。 2 方法 2.1 到手香水提液急性毒性实验（最大耐受量测定）选择健康昆明小鼠，体重在 18MPa～ 22g 共 20 只，雌雄各半，按性别分两组，每组 10 只，称重和标记，分开饲养，实验前和 实验的观察期内，均按正常饲料条件饲养。 灌胃给药：灌胃给药小鼠 1 次，0.8MPaml/20g（到手香水提液浓度 4.706g/ml）。连续 观察 14d，详细记录动物的反应情况，包括饮食、运动状况、排泄状况等各个指标，计算 出总给药量（折合生药量 g/kg）。 2.2 到手香挥发油急性毒性实验（霍恩氏法 LD50 测定）选择健康昆明小鼠 20 只，体 重 18MPa～22g，称重、标记，随机分 4 组，每组 5 只，雌雄分别为 2，3 只。各组小鼠分别 灌胃给药 0.4ml/20g（给药前禁食 16h，不禁水）。给药后连续观察 7d，详细记录动物 的反应情况，包括饮食、运动状况、排泄状况、死亡时间及当时状况等各个指标［5］。 到手香挥发油浓度：用食用油将到手香挥发油稀释至各个浓度： 0.05，0.1075，4.65，10.0ml/ml，给药剂量递增比为 1013=2.15，分别为 1.0，2.15，4.62，10.0ml/kg。 3 结果 3.1 到手香水提液急性毒性实验（最大耐受量测定）小鼠雌雄各 10 只给药后，蜷缩少 动，但很快就恢复正常，小鼠无其它异常行为，7d 无小鼠死亡，且各方面状态正常，体重 增至 24～28MPag，14d 后亦无死亡，且各方面状态正常，体重增至 32～37g，将小鼠处死， 解剖观察，未见脑、心、肝、肺、脾、肾、胃、肠有肉眼可见的明显异常，毛色正常。结 果见表 1。表 1 到手香水提液最大耐受量实验结果（略） 小鼠对到手香水提物（折算为生药量）最大耐受量：4.706g/ml×0.8MPaml/ 20g=18MPa8MPa.2g/kg。 3.2 到手香挥发油急性毒性实验（LD50 测定）第 1 组、第 2 组各有一只在第 2 天死 亡，其余 4 只除在前两天活动略为减缓外，各项指标均正常，且 7d 后亦无死亡；第 3 组 在两天内全部死亡，第 4 组在 3h 内全部死亡（结果见表 2）。后两组动物在给药后蜷缩少 动，进食饮水都大为减少，甚至不进食不饮水，直至死亡未见有挣扎等任何动作，死亡后 解剖观察动物，未见脑、心、肝、肺、脾、肾、胃、肠有肉眼可见的明显异常，毛色亦正 常。 查霍恩氏法 LD50 值计算用表（剂量递增法测定 LD50 值计算用表 A1），剂量 1＝ 1.00ml/kg、剂量 2＝2.15ml/kg，剂量 3＝4.65ml/kg，剂量 4＝10.0ml/kg，组 1，组 2，组 3，组 4 死亡动物数为 1，1，5，5，对应的 LD50 值为 2.37ml/kg，可信限为 1.42～3.95ml/kg。按到手香挥发油提取率 1.2%折算为生药，则小鼠对到手香挥发油 （折算为生药）LD50 为 197.5g/kg，可信限为 118MPa.3～329.2g/kg。 4 讨论 小鼠对到手香水提液（折算为生药量）最大耐受量：18MPa8MPa.2g/kg，对动物无明显急性 毒性。按照 20g 小鼠与 70kg 人的体表面积之比为：38MPa7.9（山东中药学院《中药药理学 实验讲义》1994），转换成人对到手香水提物（折算为生药量）最大耐受量：1460.1g/ 70kg，因此可以初步推断，对人来说到手香水提物无明显急性毒性。 霍恩氏法测定小鼠对到手香挥发油 LD50 值为：2.37ml/kg，可信限为 1.42～ 3.95ml/kg。转换成人对到手香挥发油（折算为生药量）LD50 为：18MPa.39ml/70kg，说 明到手香挥发油对人也有一定的毒性。表 2 到手香挥发油急性毒性正式实验数据（略） 到手香作为一个在国内没有收录而民间有使用的药用植物，对其毒理学研究，包括水 提液急性毒性实验（最大耐受量测定）和挥发油急性毒性实验（LD50 测定），可为到手 香使用提供安全的实验数据，对到手香的实际应用有着重要的意义。同时这是对到手香进 行进一步研究与药效学研究提供理论基础和科学依据。