中药新药开发研究论文

摘要回顾了中药新药国内外研究开发现状：从加强天然产物活性成分研究，从古方、 验方研究开发新药，加强有效部位的研究，尤其是对复方有效部位中主要药效物质或者主 要药效物质群的研究，应用生物技术开发中药新药，测试分析方法的现代化，中药新药制 剂工艺的现代化，以及中药新药新释药系统的研究等诸方面论述了面向 21 世纪中药新药 研究开发思路与方法。 关键词中药新药研究开发现状方法 21 世纪将是科学技术发展突飞猛进的时代，科学发展的综合化，技术发展的高新化以 及高新科技的产业化是 21 世纪科学技术发展的主要特征，这一趋势将在新药研究开发中 得到充分的体现。本文试论世纪之交中药新药研究开发现状及思考，以期加快中药新药创 新的步伐。 一、现状 美国辉瑞公司生产治疗男性勃起功能障碍的药物——“伟哥"，一些乐观的预测甚至认 为它年销售额能达到创纪录的 110 亿美元。伟哥自 1998 年 3 月获美国 fda 批准以来，风 靡世界，说明新药可获取几乎是无限的高额利润。即使深知一类创新药在发达国家耗时 10 ～12 年，耗资 2 亿美元以上，且高风险，世界各大跨国公司仍然投入其年营业额的 15% ～20%研究开发新药［1，2］。 中药研究开发是国际热门课题：国际市场每年药用植物及制品(包括保健品等)的交易 额超过 300 亿美元。日本是较重视中药研究开发的国家，年销售额达 1500 亿日元。美国 国会 1994 年批准了把草药列为《饮食补充剂》的法案之后，1997 年又制定了“植物药在 美批准法"(草案)，不再要求草药产品是已知结构的单体纯品，而可以是成分固定、疗效稳 定、安全可靠的复方混合制剂。德国在欧洲是传统药年销售额最大国家，达 22 亿美元 ［2］。德国 drschwabe 生产的银杏叶提取物制剂 tebonine(促进脑血管循环)年销售额 超过 1 亿美元，银杏叶及其制剂仅在欧洲市场年销售额就达几亿美元；德国宝灵家大药厂 则是新型植化产品的主要开发者，开发喜树碱系列、莨菪胺类和育享宾等产品；其它德国 公司还在开发山梗菜碱(可帮助戒烟)以及一种可用于合成抗抑郁药和抗老年痴呆症新药的 中间体“槟榔碱"。在东亚国家中印度植物中开发出若干种有药用价值的新成分，胡黄连中 提取的“胡黄连素"，用于治疗漫性乙肝，以及来自巴戟天根的一种新型成分“bacoside"， 作为增智药品，用于提高人的记忆力［3］。 我国的中药新药研究开发已走上科学化、规范化、标准化和法制化的轨道。至今已有 1141 种中药新药通过注册，其中一类新药占 11.5%，二类占 6.5%，三、四类各占 40%，五类占 2%。反映新药研制水平的一二类新药的数量明显偏少；对于三类新药的研 制也多相重复，忽视了发展创新、基础研究及科研水平的提高；研制的整体水平不高，低 水平重复现象严重［4］。尽管如此，新药仍取得了很高的经济效益，占整个药品销售额 10%以上，利润大约在 20%以上，1997 年年销售额超过 1 亿元的中药新药 50 个品种以 上。从野生植物黄花蒿分离抗疟有效成分青蒿素对急性脑疟疗效较好，是新型结构的抗疟 药；为提高抗疟效价，进行了大量结构改造工作，成功地研制出蒿甲醚、双氢青蒿素、青 蒿烷酯等新型衍生物，此药被国际认可，引起了广泛注意。抗早孕药天花粉和男用避孕药 棉酚也受到国内外重视。 中药的发展前景十分广阔，已受到世界的瞩目。中国已向美国 fda 进行了首次的复方 中药注册申请，并分别于 1997 年 12 月和 1998 年 3 月通过了“复方丹参滴丸"和“银杏 灵"新药临床研究(ind)预审，实现了中药的历史性突破［5］，随之而来将会有更多成熟的 中药品种进入世界。二、面向 21 世纪中药新药研究、开发的思考 1.加强天然产物活性成分研究，从中寻找一类新药 1805 年从阿片中分离出吗啡标志着单体化合物作为新药来源时期开始。近年来，从 天然产物中研究开发新药，最引人瞩目的成果当算紫杉醇，1992 年批准上市，作为治疗 卵巢癌的首选药物。近 70 年来，我国先后研制出 70 余种高特新药广泛应用于临床，其中， 两个举世公认的具有划时代意义的麻黄素和青蒿素，都是从我国常用中药发掘出来的。对 天然药物进行深入的化学与生理活性的研究，从而发现临床上有用的原型药物，存在着极 大的机遇，发现具有开发前景的新类型结构化合物作为先导化合物，经结构修饰和改造， 寻找疗效更高、结构更为简单，并且便于大生产的、安全有效的候选化合物，再经临床验 证判断这个化合物是否能成为新药而上市。据报道，现在临床用药一半来自天然产物及其 衍生物。如吗啡研究发展了异喹啉类生物碱的研究，导致了镇痛药杜冷丁的发现。我国学 者从实践中总结了宝贵经验，归纳上升到理论(1)生物同型基取代说，(2)活性成分相结合， (3)受体假说，(4)药物潜伏化，(5)中草药有效化学成分配位化学学说，并获得一些成果。 总之，从以上多种途径拓展了由中草药有效成分创新的广阔领域，成功率高。它是当今摆 脱我国西药研究以仿制为主的被动局面的出路所在。此外，有关近代生物转化和生物合成 理论和技术，也应认真汲取，以开阔新药研制思路［6］。 2.进行新药的二次开发 对过去研究方面得出的一些不太成熟的成果进行系统的学习和总结，选择有潜力的苗 头进行二次开发。从分离出混合组分作为药物的可以进一步把各个单体分开，分别检验其 疗效，然后或者单用，或者用化学单体组方。如抗感染的双黄连和抗风湿性关节炎的白芍 总甙［1］。又如最近报道的常用中药黄芪通过系统成分分析，从黄芪总皂甙分离出 21 种 成分，其中黄芪皂甙ⅲ、ⅳ、ⅵ治疗心力衰竭有效，以黄芪皂甙ⅳ疗效最佳，可能成为新治疗心力衰竭有效，以黄芪皂甙ⅳ疗效最佳，可能成为新 型的非洋地黄类强心药物。又据最近信息，美、韩从高丽参发现一种全新成分人参甙 rf， 可能作为新型非成瘾性高效止痛剂［6］。 3.从古方、验方研究开发中药新药 古方、验方通常是千百年来临床经验总结，许多方剂疗效确切，这是我国的优势，是 新药研究的前提。从临床、药理证明青黛是治疗慢性粒细胞白血病“当归芦荟丸"的有效单 味药，从中分得有效成分靛玉红，再经结构改造合成了“异靛甲"，其疗效更高，毒性更小。 陈竺教授等对民间用于治疗淋巴结核、皮肤癌等有效的验方(含砒霜、轻粉、蟾酥)逐一筛 选，从复方到单味中药砒霜，又到化学纯三氧化二砷，终于研制成功“以毒攻毒"的“癌灵一 号"注射液，创造了白血病临床治疗的“人间奇迹"。 4.加强中药有效部位研究，提高中药新药研制水平 中药有效部位研究，可为相关学科的融合渗透提供新的增长点和新领域，创造有中国 特色的新医药学。 中医临床用药的主要形式是中药复方，它是中医理法方药的具体运用，体现了中医治 疗重视扶正祛邪，标本兼治等整体观、系统论和辨证施治的法则，是多系统、多靶点和多 层次发挥全方位药效作用的治疗方法，所有这些都非单一成分所能概括达到的。根据中医 理论和临床经验，开发中药复方的有效部位能较好地显示这种优势和特色［4］。 乔延江等从化学的角度对有效中药复方研究进行了全面的探讨［7］。因为复方药效 不仅与药效物质或药效物质群有关，而且与辅助成分也有关。因此，越来越多的人开始进 行所谓的多模式、多指标控制体系的研究工作。化学模式识别被认为是较理想的方法之一， 用化学计量学的方法关联化学数据阵与药效数据阵，确定可用于复方质量控制的模式，并 对未知样本进行识别。直接试验方法应用于中药复方全方筛选、优化研究取得了可喜的结 果；直接试验设计运用蒙托卡洛方法，在规定的实验域内随机模拟取点，结合药效实验， 经分析、整和、比较、评价等操作，最终确定“最优"复方。 确定复方有效部位，探讨有效部位的主次(即有效部位的君、臣、佐、使)，建立复方 量效关系，对有效部位中主要药效物质基础或者主要药效物质群的研究是中药复方化学研 究的重点，也是探明中药复方配伍规律、药效作用机制的基础。只有这样才能不断推出组 方合理、工艺先进、高效安全、体现中医药特色的中药新药，推动中药走向世界。 5.将生物技术应用于中药新药的研究 应用生物技术特别是基因工程，对于开发新药有重要的指导意义。中药化学成分代谢 关键酶的基因调控、发酵培养条件的调控，可以大大增加有效成分的含量，在研制开发中 药新药的过程中，对活性成分的分离纯化，构效关系的研究，定向诱导有效活性成分的生 成，新剂型、新工艺的研制等都可应用生物技术［8］。 6.测试分析方法的现代化是提高中药新药研制水平的保证 长期以来检测中药及其制剂是以 tlc、hplc 等为主，这些手段所提供的参数，如 rf 值、 tr 值等都不是绝对的，而是仪器设备依存的；作为标准参数，尚存在一定困难。从分析仪 器发展的趋势来看，联用技术将会逐渐替代独立的分离和分析仪器。气质联用(gc/mc)或 气相色谱傅里叶变换红外光谱联用傅里叶变换红外光谱联用傅里叶变换红外光谱傅里叶变换红外光谱联用联用(gc/ftir)或气相色谱傅里叶变换红外光谱联用傅里叶变换红外光谱联用傅里叶变换红外光谱傅里叶变换红外光谱联用傅里叶变换红外光谱联用质谱傅里叶变换红外光谱联用联用 (gc/ftir/ms)用于中药挥发性样品分析。电喷雾(esi)或离子喷雾技术以及近期发展起来的 大气压离子化技术能够把极性强、不挥发和热不稳定的化学成分的离子从溶液中蒸发出来， 进行质谱傅里叶变换红外光谱联用分析，从指纹鉴定的角度来看它是远较色谱傅里叶变换红外光谱联用优越，如质荷比，是一个物理参数， 不会受仪器和实验条件不同变化，容易建立标准谱傅里叶变换红外光谱联用图库；质谱傅里叶变换红外光谱联用仪提供的分子量是指示成分 化学属性的重要参数；对于一些非极性成分可以应用大气压化学电离(apci)。除上述优点 外，还提供液相色谱傅里叶变换红外光谱联用傅里叶变换红外光谱联用质谱傅里叶变换红外光谱联用(lc/ms)以及液相色谱傅里叶变换红外光谱联用傅里叶变换红外光谱联用质谱傅里叶变换红外光谱联用傅里叶变换红外光谱联用质谱傅里叶变换红外光谱联用(lc/ms/ms)联用等技术，亦可 与新兴的分离技术如毛细管电泳(ce)相结合，使成分分离的能力大大提高；ce/ms 和 ce/ ms/ms 是研究中药复杂体系，尤其是复方的有力工具。此外超临界色谱傅里叶变换红外光谱联用(sfc)和高速逆流 色谱傅里叶变换红外光谱联用(hsccc)在中药分析中颇为有用。 上述的高新科技仪器无疑会在中药研究和质量析方面产生突破性的冲击，这些高效率 和高信息量的分析方法将不可避免地成为质量分析方法的主流［9］。 7.制剂工艺现代新技术新方法的应用 如微波萃取、超临界萃取、液滴逆流萃取、超声波萃取等和分离技术中的层离技术、 大孔吸附技术、凝胶分子筛选技术、模分离技术、超速离心技术等，以及干燥技术的喷雾 干燥、冷冻干燥等。此外，尚有新辅料、固体分散技术和 β傅里叶变换红外光谱联用环糊精包合等技术的应用 ［4，10］。 8.其它 重视中药新药新释药系统(drugdeliverysystem,dds)的研究和海洋药物［6］及中药 非处方药的研究开发。 开发恶性肿瘤，艾滋病，心脑血管疾病，肝病，感染性疾病，风湿及类风湿病，老年 性常见病如前列腺肥大、骨质疏松、更年期综合症、糖尿病、老年性痴呆等，抗衰老及调 节机体免疫功能的补益类等具有高效、低毒、速效、长效的中药新药，将有很好的前景 ［11］。 三、结语 总之，中药新药的研究开发必须坚持以中医药理论和经验为基础，采用现代科学技术 的方法，开展中西医药学相结合的研究方向，多学科的渗透与协作，推行国际规范，走真 正创新之路，中药新药在 21 世纪必将创造辉煌! 提要本文报道了我国道地药材牡丹皮的原植物药用牡丹的生长习性、繁殖方法、种植、 病虫害防治、采收及产地加工技术。 关键词药用牡丹栽培技术 牡丹皮是一种常用中药，有清热凉血、活血化瘀的功效，可用于治疗温毒发斑、吐血 衄血、夜热早凉、无汗骨蒸、经闭痛经、痈肿疮毒及跌打伤痛。据研究，安徽铜陵县凤凰 山和南陵县丫山产的药用牡丹 PaeoniaostiiT.HongetJ.X.Zhangssp.lishizhenensisB.A.Shen 的干燥根皮，为我国传 统道地药材“凤丹皮”。在全国牡丹皮药材中，其质量最佳，产量最大。据唐代《四声本 草》记载药用牡丹曰：“今出合州者佳，白者补，赤者利；出和州、宣州者并良。”据笔者 考证，今铜陵县凤凰山和南陵县丫山，在唐代均为宣州辖境。由此可见，早为一千多年前 的我国唐代宣州曾有过野生药用牡丹分布。后来由于受到《四声本草》的宣传影响，加上 牡丹皮为常用中药，野生资源不能满足人们的药用需求量而逐渐转为大面积人工栽培。据 笔者调查研究，安徽省铜陵县凤凰山和南陵县丫山一带的自然条件非常适宜药用牡丹生长， 并且以种子繁殖，其原植物形态特征稳定。 1 植物形态 药用牡丹与原变种杨山牡丹 PaeoniaostiiT.HongetJ.X.Zhang 主要区别在于叶为一 至二回羽状复叶，二回羽状复叶，小叶长达 14cm，宽达 8cm；小叶柄长达 35mm；花 较大，直径 14─20cm，花瓣长７─10cm；骨突果 5─８，长 3.5─4.5cm；种子长 9─12mm。 2 生长习性 药用牡丹耐寒（－12℃）、耐旱、怕水渍，无论阴坡、阳坡，凡是土壤肥沃、土层深 厚、土质疏松、排水和通气性能良好的中性或微酸性砂质壤土均可栽种。强酸性土壤、盐 碱地、粘土、低湿地及树荫下则不宜栽种。 3 繁殖方法 药用牡丹的根通常单一，极少分叉，而其果实中有较多发育良好的成熟种子。因此， 在其道地药材产区通常采用种子繁殖生产。 3.1 种子采集与处理 药用牡丹在定植后第二年春季一般有 70％植株开花结果，第三年春季开始进入盛花期， 每株开１─３朵花，第四至第六年春季每株可开５─15 朵花，每朵花的果实内有种子 30─70 粒。７月下旬种子成熟时，采回摊放室内，其厚度以 20cm 为宜。室内不要过于通 风，以保持一定的湿度。若天气过于干燥，宜喷洒少量水，每天翻动１─２次，以免发热， 待 10─15 天后，果实自行裂开，即可除去果壳，收集种子，当年进行秋播。播种前，种子 需用湿砂进行层积贮藏。 3.2 播种育苗 ８月下旬至 11 月中旬均可播种，以９月中、下旬为最佳播种时期。选择籽粒饱满、 黑色光亮的种子进行播种。播种前用 45℃温水浸种 24 小时。一般采用穴播或条播。苗畦 宽度以 1.3─２ m 为宜。 3.2.1 穴播 行距 30cm，株距 20cm，穴位呈品字形排列。挖圆穴，穴深约 12cm，直径约５ cm，穴底要平坦。每穴施入适量的饼肥末、过磷酸钙作为基肥，上覆３ cm 厚的细土，压 实整平。然后每穴下种子 20 粒左右，种子在穴内应分布均匀，保持相距２─３ cm。每亩 用种量约 150kg。 3.2.2 条播 按行距 25cm，播幅宽 10─20cm，横向开６ cm 深的播种沟。将种子均匀播入沟内。 每亩用种量为 100kg 左右。 穴播或条播后即行封土，使畦面平整无凹陷，再加盖茅草。第二年２月下旬至３月上 旬幼苗即出土生长，两年后可移栽定植。 药用牡丹除上述种子繁殖生产以外，也可进行分根繁殖，产区习称“打老蔸”。一般选 ３─4 年生植株，挖取其全株，将主根切下供药用，截取茎基与根头部交接处带侧根的一 段（长约 12─15cm）作为种根，尽量保留细根，顺着其自然生长的形态进行栽种。田间 管理同种子繁殖。分根繁殖系数极小，不适宜大规模药材生产。目前产区通常已不采用此 法生产。4 种植技术 4.1 选地与整地 一般选择地势较高、土层深厚、阳光充足、排水良好的坡地，坡度在 10─45°均可。 以 15─20°的荒山缓坡为佳。选好荒山地块后，冬季或初春将杂草荆棘砍倒，就地铺平， 待稍干后进行焚烧。这样既消灭了越冬虫卵，又疏松了荒地，便于挖地。在定植前６─８ 月份，每月要深翻一次地，共翻三次。第一次挖 60─75cm 深，土块不宜敲碎，以便晒地。 第二次要细翻，深度同前，边翻边清除草根等杂物，尤其是白茅根务必除尽。第三次要细 翻，深度为 50─60cm 即可，整平做成高畦，畦面应修整为龟背形，以便排水防渍，畦宽 1.5─２ m，沟深 30cm，宽 40cm，沟底要平整。 4.2 定植 一般在 10 月前后，将二年生种苗挖起进行移栽。按行株距 35cm 挖穴，穴深 20─35cm，以种苗放入穴内不弯曲为准，穴中施入适量基肥（每亩地施 150kg 菜籽饼 肥）。每穴栽入粗壮种苗２株或细苗３株。放苗时应使种苗呈扇形展开排列于穴内。当填