山豆根栽培及化学成分研究论文

【关键词】山豆根；栽培；化学成分；药理作用 山豆根 SophorotonkinensisGagnep.为豆科植物，药用部位为根，是临床常用中药， 为《中国药典》所收载［1］。山豆根药材味苦、寒，有毒。具有清热解毒、消肿利咽功 效。用于治疗火毒蕴结，咽喉肿痛，齿龈肿痛、湿热黄疸、湿热带下以及钩端螺旋体病等 症［2］。现代研究证明，从山豆根中离析出多种生物碱，其中的苦参碱（Matrime）、 氧化苦参碱（Oxymatrime）等具有抗癌和抗霉菌作用［3］。山豆根主产于广西的西南 部至西北部，广东、云南和贵州也有少量分布。由于山豆根的地域分布较窄，且零星生长 于石灰岩山区石缝之中，一般海拔高度 500～800m 的地方。目前医药工业用山豆根作为 原料，大量研制开发治疗肝炎的针剂（肝炎灵）、咽喉肿痛的片剂以及抗肿瘤的中成药。 据商家反映每年销往工厂的量由往年 20 万 kg 增加到 30 万～35 万 kg，使年总销量超过 70 万 kg［4］。由于销量的增加，市场需求不断扩大，而上市量却不断减少，常出现供不 应求的局面。野生山豆根资源濒临枯竭。山豆根的资源保护和人工栽培迫在眉睫。 为保护山豆根野生资源和解决用药紧缺问题，科技人员已对山豆根的生态环境、生物 学特性、人工繁殖栽培及化学成分进行研究，并取得了一定的成果。现将山豆根栽培及其 野生与人工栽培的化学成分对比与药理研究综述如下，以供生产参考。 1 本草考证 山豆根始载于《开宝本草》。苏颂《本草图经》［5］云：“山豆根生剑南（今四川 省）山谷，今广西亦有，以忠（今广西南宁）、万（今四川万县）州佳。苗蔓如豆，根以 此为名。叶青，经冬凋，八月采根用……广南者如小槐，高尺余……。”其中“广南如小槐” 就是《中国药典》收载的山豆根，因主产于广西习称广豆根。”初版于 1962 年、再版于 1986 年的《中药材品种论述》已明确记载：商品广豆根的原植物有二［6］：一、越南槐 SophoratonkinensisGagnep.［S.subprostrataChunetT.Chen］。二、多叶越南槐 SophoratonkinensisGagnep.VarpolyphyllaS.Z.HuangetZ.C.Zhou。多叶越南槐与 越南槐的区别在于小枝和花序只被短柔毛；小叶披针形，数目较多，（25～）27～ 33（～39）枚，小叶也较小，长 20～35mm，宽 5～7mm，上面无毛，下面只被短柔 毛，有加厚的边缘；全为总状花序。 2 生物学特征 山豆根为小灌木［7］，直立或平卧，高 1～2m。根圆柱状，少分枝，根皮黄褐色。 茎分枝少，密被短柔毛。奇数羽状复叶，互生；小叶片 11～19，椭圆形或长圆状卵形， 长 1～2.5cm，宽 0.5～1.5cm，顶端小叶较大，先端急尖或短尖，茎部圆形，上面疏被 短柔毛，背面被灰棕色短柔毛，总状花序顶生，长 12～15cm，密被短柔毛；小花梗长约 1cm，被子细毛；花萼阔钟状，外被疏毛，先端 5 裂；花冠黄白色，旗瓣卵圆形，先端凹， 基部具短爪，翼瓣长于旗瓣，基部具三角形耳；雄蕊 10，离生，基部稍宽扁；子房具柄， 圆柱形，密被长柔毛，花柱弯曲，柱头圆形，具长柔毛。荚果长 2～5cm，密被长柔毛， 种子间成念珠状。种子 3～5 颗，黑色，有光泽，随圆形，种脐小。花期 5～6 月，果期 7 ～8 月。 3 山豆根的人工栽培 3.1 山豆根的繁殖 山豆根的繁殖方法有 3 种。 3.1.1 种子繁殖［8］ 每年 10～11 月，当荚果由青绿变为黄色时，及时将荚果采回，脱出种子晾干，可随 采随播或置室内通风干燥处保存至来年春播。 3.1.2 扦插繁殖［9］ 选择 1 年生健壮、无病虫害的茎杆，剪成长 25cm，带 2～3 个节的插条，用 150mg/L 浓度的吲哚丁酸（IBA）浸泡 3h，将插条斜插入沙床，插条 60d 后生根发芽即 可移栽。 3.1.3 组织培养快速繁殖［10］ 在无菌条件下，切取山豆根的顶芽，放入以 MS 为基本培养基，加入不同浓度的植物 激素进行诱导培养，丛生芽的诱导以 MS+6-苄基嘌呤（6BA）2.0mg/L+柰乙酸 （NAA）0.2mg/L 培养基；丛芽继代增殖培养以 MS+6BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L 的培 养基为佳；诱导芽苗生根的培养基用 1/2MS+NAA1.5mg/L 为好。以后将生根发育好的 试管苗用清水洗去根部的培养基即可移栽。 3.2 栽培管理 山豆根是多年生药用植物，以根部入药。因此人工栽培的应选土层深厚、质地疏松、 排水良好的坡地。起畦宽 70cm，高 15～20cm、畦长视地形而定，每公顷施基肥 30000～45000kg 腐熟的堆肥，株行距 40cm 以品字形开穴栽种［8］。种植后每年施 2 次复合肥，每株 25g，第 1 次在 3～4 月份除完草后施，第 2 次在秋季 9 月份。山豆根主 要有两大病害：根腐病和白绢病。根腐病发病初期以百菌清兑水 800 倍灌根。白绢病发病 初期用多菌灵兑水 800 倍灌根或喷雾。虫害有 4 种：蛀茎螟用乐斯本兑水 800 倍喷雾或 从蛀口灌入。豆荚螟用敌百虫兑水 800～1200 倍喷雾。红蜘蛛发病初期用吡虫啉 1200 ～1500 倍喷雾。蚧壳虫可用敌敌畏兑水 1200～1500 倍喷雾。 山豆根种植 3 年可采收，但最好是 4 年以后采收。秋季八九月份将根部挖起，剪去地 上部分，把根部泥沙洗净，晒干或烘干即成商品。 4 化学成分 山豆根含的生物碱主要是苦参碱（Matrine）和氧化苦参碱（Orymatrine）、臭豆碱 （Anagyrine）和甲基金雀花碱（Methylcytisine）［2］。黄亚非等［11］采用 HPLC 法分析广西不同产地山豆根主要有效成分苦参碱和氧化苦参碱，结果表明广西不同产地的 山豆根均含有氧化苦参碱和苦参碱，因产地不同含量有差异。覃文流等［12］用薄层层析 法对室外栽培前后的山豆根组培苗植株与野生引种植株的药用有效成分苦参碱和氧化苦参 碱对比分析表明，组培苗具有正常生物合成苦参碱和氧化苦参碱的能力，组织培养条件并 没有影响有效成分的生物合成，而且从斑点颜色的深浅来看，组培苗的有效成分含量不比 野生植株的含量低，因此，山豆根组培苗可作为人工栽培的种源加以推广应用。杨东爱等 ［13］采用紫外光谱法对引种栽培的山豆根及野生山豆根不同部位的苦参碱及氧化苦参碱 进行分析，引种栽培的山豆根与野生山豆根不同部位的苦参碱及氧化苦参碱二者含量无明 显差异，引种栽培山豆根不影响药材质量，可进行人工大面积栽培。实验同时还做了山豆 根（越南槐）及多叶越南槐的有效成分苦参碱及氧化苦参碱含量对比分析，它们大致相同； 多叶越南槐在产区收购使用已有几十年的历史［14］，《广西中药材标准》1990 年版将 两者等同使用，所以多叶越南槐与山豆根（越南槐）继续等同使用。 5 药理作用 5.1 抗肿瘤作用 姚仲青等［15］报道，在山豆根的总生物碱抗肿瘤作用研究中，通过建立小鼠 S180，H22，ESC 肿瘤模型，从整体水平上观察山豆根总生物碱对肿瘤生长的影响，结 果山豆根总生物碱有一定的抗肿瘤活性，但抑瘤率低、毒性大。肖正民等［16］报道中药 山豆根（SSCC）提取物以不同的时间处理人肝癌 SMMC-7721 细胞，用噻唑蓝（MTT） 法测 SSCC 提取物对人肝癌细胞线粒体活性的影响，以细胞记数法观察其对细胞增殖的影 响，结果显示：①经 SSCC 提取物处理 48h，其 A570 光吸收降为对照组的 62.1%，72h 为 9.64%；② SSCC 提取物处理 7d 后，人肝癌细胞数明显低于对照组；③ SSCC 提取物 处理 24h 后，在更换为正常培养基恢复培养过程中，细胞数呈现缓慢生长；④ SSCC 提取 物作用 24h 后，人肝癌细胞有效分裂指数分别为小牛血清（FCS）对照组的 50.6%和无 FCS 对照组的 69.7%。河南医科大学报道［17］，应用杀伤效应、酶活性测定及 Fulgen-DNA 法显示分裂指数，分析山豆根对体外培养人食管癌细胞株（Eca-109）的作 用，结果表明 100，200mg/ml 浓度对细胞的杀伤能力随药物作用时间延长而增强， 50mg/ml 浓度维持在 3%左右。100，200mg/ml 实验，在加药第 3 天对细胞分裂指数 抑制率接近或达到 100%，山豆根水提物能使谷氨酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶和乳酸脱氢酶 活性下降，直至阴性反应。 5.2 体外抑菌作用 丁凤荣等［18］报道，用 K-B 纸片扩散法，100%山豆根浸出液滤纸片对大肠杆菌、 金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌抑菌作用进行研究。结果山豆 根对以上细菌均有明显抑菌作用。尤其对甲型链球菌、乙型链球菌抑菌效果更明显。 5.3 消炎镇痛作用 谢瑞金等［19］用小鼠为实验对象，口服法给药，以醋酸所致扭体反应为镇痛指标， 二甲苯所致耳廓肿胀为消炎指标，研究复方山豆根口服液治疗咽炎的药效学作用，结果表 明，大中小剂量组均有镇痛作用，大剂量组与消炎组相当，各剂量组均有明显的消炎镇痛 作用。