心舒片葛根素含量分析论文

［摘要］目的建立反相高效液相法测定心舒片中葛根素含量的方法。方法采用十八烷 基硅烷键合硅胶柱，流动相为乙腈∶水（10∶90）；检测波长为 250nm。结果葛根素在 0.079~1.185μgg 范围内呈良好的线性关系；平均回收率为 96.21%，RSD=1.10%。结 论该方法不仅操作简单、准确，且重复性好，可用于心舒片的质量控制。 ［关键词］反相高效液相法；心舒片；葛根素；含量测定 ContentdeterminationofpuerarininXinshupian ［Abstract］ObjectiveTostudyaRPHPLCmethodsthatdeterminedthepuerarincontentinXinshupian.MethodsPuerari nwasseparatedcompletelyonanC18column，usingamixtureofacetonitrileandwa ter（10∶90）wasmobilephase，withUVdetectionat250nm.ResultsPuerarinhasb etterlinearcorrelationbetween0.079μggand1.185μgg，theresultsalsohaveshownt herecoveryratewas96.21%，RSD1.10%.ConclusionThemethodsisverystablean daccurate，andhasgoodreappearance.ItcanbeusedforqualitycontrolofXinshupi an. ［Keywords］RP-HPLC；puerarin；Xinshupian;contentdetermination 心舒片是本院的院内制剂，由葛根、毛冬青、红花、益母草等 9 味中药组成，具有活 血化瘀的功效，用于心脉瘀阻所致的胸痹心痛、冠心病、心绞痛、冠状动脉供血不全，临 床应用多年，疗效确切。为了更好地保证临床疗效，本文建立反相高效液相色谱法（RPHPLC）测定心舒片中葛根素的含量，控制心舒片的质量。 1 仪器与试剂 1.1 仪器 日本岛津 LC-10A 高效液相色谱仪，SPD-10AV 紫外检测器；CT-100 恒温箱。上海 必能信 CQ-250 型超声波清洗器。BP211DAG 电子天平（德国 Sartorius）。 1.2 试剂 乙腈为色谱醇，水为重蒸水。葛根素（中国药品生物制品检定所，批号：110752200209）；心舒片（本院制剂室生产）。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 （1）色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱 KromasilC18（250×4.6mm，5μgm） （天津市琛航科技仪器有限公司）。（2）流动相：乙腈∶水（10∶90）。（3）检测波长： 250nm。（4）流速：1.0ml/min。（5）柱温：40℃。 2.2 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷干燥 12h 的葛根素对照品，加 50%的乙醇制成每 1ml 含 0.05mg 的溶液，即得。 2.3 供试品溶液的制备 取心舒片 10 片，除去糖衣，精密称定，研细，取细粉约 0.1g，精密称定，置锥形瓶 中，精密加入 50%的乙醇 25ml，称定重量，超声处理（功率 250W，频率 50kHz）30min，放冷，再称定重量，以 50%的乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即 得。 2.4 阴性对照溶液的制备 按处方比例称取除葛根的其他药材适量，依照心舒片的制备工艺和供试品溶液的制备 方法制备阴性对照溶液。 2.5 线性关系的考察 分别精密吸取葛根素对照品溶液（浓度为 0.079mg/ ml）1μgl、2μgl、6μgl、10μgl、15μgl，注入液相色谱仪，测定，以葛根素的进样量（μgg）为 横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程为 Y=1E+07X+196030（r=0.9999）。结果表明葛根素在 0.079~1.185μgg 范围内具有 良好的线性关系。 2.6 精密度试验 精密吸取葛根素对照品溶液 10μgl（0.039mg/ml），重复进样 6 次，峰面积积分值分 别为 4682219、4622176、4671835、4712194、4666457、4622364，RSD=0.76% ，表明本法精密度良好。 2.7 重复性试验 取同一批心舒片（批号：060321），除去糖衣，研细，取细粉 5 份，每份约 0.1g， 精密称定，按 2.3 项下的方法制备样品，进行含量测定。结果分别为 5.503mg/片、 5.511mg/片、5.547mg/片、5.378mg/片、5.322mg/片，平均为 5.452mg/片，RSD 为 1.78%。表明本方法具有较好的重复性。 2.8 稳定性试验 取重复性试验项下试验号 5 的供试品溶液，每 2h 进样 1 次，每次 10μgl，连续进样 6 次，结果表明在 10h 内峰面积积分值基本稳定，RSD 为 0.48%。 2.9 回收率试验 贮备溶液：精密称取葛根素对照品 7.9mg，置 10ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀， 制成每 1ml 中含葛根素 0.79mg 的溶液。 取已知含量（5.452mg/片）的心舒片小试样品（批号：060321），除去糖衣，研 细，取细粉约 0.05g（6 份），精密称定，1 号、2 号分别精密加入贮备溶液 0.61ml，3 号、4 号分别精密加入贮备溶液 1.0ml，5 号、6 号分别精密加入贮备溶液 1.4ml，水浴 蒸干，按供试品溶液制备方法进行制备并测定含量，计算回收率，结果平均回收率为 96.21%，RSD 为 1.10%。见表 1。表 1 回收率试验结果（略） 2.10 样品测定 按拟定的含量测定方法测定三批心舒片中葛根素的含量，结果见表 2。表 2 含量测定 结果（略） 3 讨论 通过对提取溶媒、提取时间进行了考察（见图 1~3），结果以加入 50%的乙醇、超 声处理 30min 为佳。干扰试验结果表明，葛根的阴性对照样品无干扰。该方法不仅操作 简单、准确，且重复性好，可用于心舒片的质量控制。根据测定的结果，并考虑到药材的 产地、采收、加工等因素，暂定每片心舒片含葛根以葛根素（C21H20O9）计不得少于 3.0mg。