高一生物复习方法：微生物的实验室培养知识点梳理

高一生物复习方法：微生物的实验室培养知识点梳理 知识背景： 1 培养基的种类包括固体培养基和 液体 培养基等。 思考 1：琼脂的化学成分是什么？在配制培养基中时的作用是？ 【补充】培养基的类型及其应用： 标准 培养基类型 配制特点 主要应用 物理性质 固体培养基 加入琼脂较多 菌种分离,鉴定,计数 半固体培养基 加入琼脂较少 菌种保存 液体培养基 不加入琼脂 工业生产，连续培养 化学组成 合成培养基 由已知成分配制而成，培养基成分明确 菌种分类、鉴定 天然培养基 由天然成分配制而成，培养基成分不明确 工业生，产降低成本 目的用途 鉴别培养基 添加某种指示剂或化学药剂 菌种的鉴别 选择培养基 添加（或缺少）某种化学成分 菌种的分离 2 培养基的化学成分包括水、 无机盐 、 碳源 、 氮源 四类营养成分。 思考 2：从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分? 【补充】碳源：如 CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物， 并提供能量。 氮源：如 N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮 代谢物等。含有 C、H、O、N 的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。 3 培养基除满足微生物生长的 pH、 特殊营养物质和氧气等要求。 思考 3：牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么营养物质? 思考 4：培养乳酸杆菌时需要添加 什么物质? 培养霉菌和细菌时分别需要怎样调节 pH? 【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机 小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。 阅读无菌技术，讨论回答下列问题： 4 获得纯净培养物的关键是什么? 5 无菌技术包括哪些? 6 比较消毒和灭菌(填表) 比较项 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 较为温和 部分生活状态的微生物 不能 灭菌 强烈 全部微生物 能 思考 5：无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是? 7 消毒方法： (1)日常生活经常用到的是煮沸消毒法; (2)对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法(作简要介绍);(3)对接种室、接种箱或超 净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果，然后使用紫外线进行物理消毒。 (4)实验操作者的双手使用酒精进行消毒; (5)饮水水源用 氯气 进行消毒。 8 灭菌方法： (1)接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法; (2)玻璃器皿、金属用具等使用 干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱; (3)培养基、无菌水等使用 高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸 汽灭菌锅 。 (4)表面灭菌和空气灭菌等使用 紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。 思考 6：对接种环灭菌时要用酒精灯的哪一个层火焰灼烧可能伸入试管或培养皿的部 位? 思考 7：利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么? 思考 8：物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空 气，其目的是? 【补充】培养基的配制原则： ①目的要明确 ②营养要协调 ③ pH 要适宜