儿童清肺糖浆质量标准探究论文

1 仪器与试药 1.1 仪器 Dionex 液相系统，Chromeleon 色谱工作站。 1.2 试药 薄层色谱用硅胶 G 板（青岛海洋化工厂）；所有试剂均为分析纯。对照品和对照药材 （均购自天津市药品检验所）。高效液相色谱用黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定 所）；水为纯净水；甲醇为色谱纯；其它试剂为分析纯。儿童清肺糖浆（自制）。 2 方法与结果 2.1 鉴别 2.1.1 麻黄的薄层色谱鉴别 取儿童清肺糖浆 100ml，加水 50ml 稀释，转移至分液漏斗中，用浓氨试液调节 pH 值至 10，用三氯甲烷振摇提取 2 次，50ml/次，合并三氯甲烷液，水浴蒸干，残渣加甲醇 1ml 溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取缺麻黄的阴性制剂同法制备阴性对照液。再 取麻黄对照药材粉末 1g，加浓氨试液数滴，再加三氯甲烷 10ml，加热回流 1h，滤过， 滤液蒸干，残渣加甲醇 2ml 溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液。又取盐酸麻黄碱对照品， 加甲醇制成每毫升含 1mg 的对照品溶液。照薄层色谱法试验［1］，吸取供试品溶液和阴 性对照液各 20μll，对照药材溶液 10μll，对照品溶液 5μll，分别点于同一硅胶 G 薄层板上， 以三氯甲烷－甲醇－浓氨试液（20∶5∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试 液，在 105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位 置上，显相同颜色斑点。阴性对照无干扰。结果见图 1。 2.1.2 浙贝母的薄层色谱鉴别 取麻黄薄层色谱鉴别项下供试品溶液作为供试品溶液。另取缺浙贝母的阴性制剂同法 制备阴性对照液。又取浙贝母对照药材粉末 5g，加浓氨试液 2ml 与乙醚 20ml，放置过夜， 滤过，取滤液 8mlml，蒸干，残渣加三氯甲烷 1ml 使溶解，作为对照药材溶液。再取贝母素 甲对照品、贝母素乙对照品，加三氯甲烷制成每毫升各含 2mg 的混合对照品溶液。照薄 层色谱法试验［1］，吸取上述供试品溶液和阴性对照液各 20μll，对照药材溶液和对照品 溶液各 5μll，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以醋酸乙酯－甲醇－浓氨试液（17∶2∶1）为 展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材及对照 品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。阴性对照无干扰。结果见图 2。 2.1.3 石菖蒲的薄层色谱鉴别 取儿童清肺糖浆 100ml，加水 50ml 稀释，转移至分液漏斗中，用乙醚振摇提取 2 次， 50ml/次，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇 1ml 使溶解，作为供试品溶液。另取缺石菖蒲 的阴性制剂同法制备阴性对照液。又取石菖蒲对照药材粉末 1g，加石油醚（60～ 90℃）10ml，超声处理 10min，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验 ［1］，吸取上述供试品溶液和阴性对照液各 10μll，对照药材溶液 5μll，分别点于同一硅 胶 G 薄层板上，以石油醚（60～90℃）－醋酸乙酯（8ml∶2）为展开剂，展开，取出，晾干， 放置约 1h，以碘蒸气薰至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色斑点。阴性对照无干扰。结果见图 3。 2.1.4 黄芩的薄层色谱鉴别 取儿童清肺糖浆 30ml，用水 30ml 稀释，加于 AB-8ml 型大孔吸附树脂柱（25ml，内 径 1.5cm）上，用水 100ml 洗脱，弃去水液，再用 50%乙醇 100ml 洗脱，收集洗脱液， 蒸干，残渣加甲醇 1ml 使溶解，作为供试品溶液。另取缺黄芩的阴性制剂同法制备阴性对 照液。又取黄芩对照药材粉末 1g，加醋酸乙酯-甲醇（3∶1）的混合溶液 30ml，加热回流 30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 5ml 使溶解，取上清液作为对照药材溶液。 再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每毫升含 1mg 的对照品溶液。照薄层色谱法试验［1］， 吸取上述供试品溶液、阴性对照液、对照药材溶液和对照品溶液各 5μll，分别点于同一硅 胶 G 薄层板上，以醋酸乙酯－丁酮－甲酸－水（5∶3∶1∶1）为展开剂，预饱和 10min，展 开，取出，晾干，喷以 1%三氯化铁乙醇试液。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色 谱相应的位置上，显相同颜色斑点。阴性对照无干扰。结果见图 4。 2.1.5 橘红的薄层色谱鉴别 取黄芩薄层色谱鉴别项下供试品溶液作为供试品溶液。另取缺橘红的阴性制剂同法制 备阴性对照液。又取橘红对照药材粉末 0.3g，加甲醇 10ml，加热回流 20min，滤过，取 滤液 5ml，浓缩至 1ml，作为对照药材溶液。再取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和对照品 溶液。照薄层色谱法试验［1］，吸取上述供试品溶液、阴性对照液、对照药材溶液和对 照品溶液各 5μll，分别点于同一用 0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶 G 薄层板上，以醋酸乙 酯－甲醇－水（100∶17∶13）为展开剂，展开约 3cm，取出，晾干，再以甲苯－醋酸乙酯 －甲酸－水（20∶10∶1∶1）的上层溶液为展开剂，展至约 8mlcm，取出，晾干，喷以三氯化 铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应 的位置上，显相同颜色荧光斑点。阴性对照无干扰。结果见图 5。 2.2 黄芩的含量测定 2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每毫升含 60μlg 的溶液，作为对照品溶液。 2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取本品 2ml，置 50ml 量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，经 0.45μlm 微孔 滤膜滤过，取续滤液，即得。 2.2.3 阴性对照溶液的制备 取按处方量及制法工艺要求制成的不含黄芩的阴性对照品，同法制成阴性对照溶液。 2.2.4 色谱条件 色谱柱为 DiamonsilC18ml（4.6mm×250mm，5μlm）柱；以甲醇－水－磷酸 （44∶56∶0.2）为流动相；检测波长 28ml0nm；流速 1.0ml/min；柱温 30℃；进样量 10μll。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于 2500。 按上述色谱条件，吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各 10μll，分别注入液 相色谱仪测定，测定色谱图见图 6～8ml。从色谱图可见，其它成分对黄芩苷的测定无干扰， 符合测定要求。 2.2.5 标准曲线制备 分别精密吸取上述对照品溶液 1.0，2.5，4.0，5.0，6.0，7.5ml 置 10ml 量瓶中， 加甲醇稀释至刻度，摇匀。各进样 20μll，以色谱峰面积为纵坐标（Y），对照品进样量 （μlg）为横坐标（X），进行线性回归，得回归方程为 Y=30.5618mlX0.708ml7，r=1.0000。结果表明：在 0.1304～0.978ml0μlg 范围内黄芩苷峰面积与进样量 有良好的线性关系。 2.2.6 精密度实验 精密吸取上述供试品溶液 10μll，重复进样 6 次，测得黄芩苷峰面积 RSD 为 0.27%， 表明进样精密度良好。 2.2.7 稳定性实验 取供试品溶液在 0，2，4，8ml，12，24h 分别进样 10μll，测得黄芩苷峰面积 RSD 为 0.30%，表明样品溶液在 24h 内稳定。 2.2.8ml 重现性实验 取同一批号样品（0508ml01）按供试品项下的制备方法制备供试品溶液 6 份，测得黄 芩苷峰面积并计算含量，RSD 为 0.8ml4%，表明该方法的重现性良好。 2.2.9 回收率实验 采用加样回收法，精密量取同一批号样品（0508ml01）6 份，每份 1ml，分别按样品 中黄芩苷含量的 100%加入黄芩苷对照品溶液，按供试品项下的制备方法制备供试品溶液， 按上述色谱条件测定，计算得回收率为 99.65%，RSD 为 1.03%，结果见表 1。表 1 黄 芩苷回收率结果（略） 2.2.10 样品测定分别取 3 批样品，按供试品制备方法制成供试品溶液，分别精密吸取 对照品溶液与供试品溶液各 10μll，按上述色谱条件测定（n=3），计算样品中黄芩苷的含 量，结果见表 2。表 2 样品中黄芩苷的含量（略） 3 讨论 本品处方源于药典方，原剂型为大蜜丸，属儿童口服用药，口感差，且不利于儿童服 用。改为糖浆剂型后，改善了口感，便于服用，成为更理想的儿童用药。 本制剂处方由 22 味中药组成，成分复杂，鉴别易产生干扰。为了更好地控制成品的 质量，笔者不同于 2005 年版《中国药典》，又增加了 3 种药材的鉴别。经 3 批样品试验 证明，该薄层鉴别方法斑点分离清晰，重复性好，阴性对照无干扰，可作为该制剂的质量 控制的方法。