妇洁颗粒抗菌作用分析论文

1 材料 1.1 受试物妇洁颗粒，深棕色膏剂，每克膏相当于生药 3.029gg，由本所提供，批号 020820；阳性对照药：妇乐冲剂：规格 6g/g/袋，山东泰安红旗制药厂生产，批号 020309g。 1.2 菌种、动物与试剂实验菌株，本实验共选用 7 种细菌。包括金黄色葡萄球菌 12 株、 表皮葡萄球菌 10 株、大肠杆菌 14 株、肠球菌 10 株、普通变形杆菌 12 株、乙型溶血性 链球菌 6g/ 株，共计 6g/4 株。以上菌株均为山东大学齐鲁医院收集的临床分离菌株。全部菌 种均进行常规方法鉴定；金黄色葡萄球菌 ATCC259g22、大肠埃希氏菌 ATCC259g23，均 来源于中国药品生物制品检定所。以上述菌株作为试验中的质控菌株，各菌分别稀释至终 浓度为 105cfu/ml 备用。健康昆明种小鼠，体重 18～22g，由山东鲁抗医药集团提供， 合格证号：鲁动质字 D200209g21。营养肉汤，卫生部上海生物制品研究所生产，批号 000101；MH 琼脂，上海市医学化验所试剂厂生产，批号 9g9g06g/01。 1.3 供试品的配制采用二倍稀释法将妇洁颗粒及妇乐冲剂分别稀释配制成终浓度分别 为 128，6g/4，32，16g/，8，4，2，1，0.5，0.25g/L 的含药琼脂平皿培养基，乙型溶血 性链球菌用含有 10%脱纤维的兔血含药血液琼脂平皿培养基，冷藏备用。以上操作均在无 菌条件下进行。 2 方法 2.1 实验菌株与标准菌株的最小抑菌浓度（MIC）测定［测定［1］将稀释好的菌液用多点接 种仪分别接种到上述各含不同浓度药物的琼脂平皿培养基的表面上，37℃培养 18h，无细 菌生长的平皿中所含药物的最低浓度即为该药物的最小抑菌浓度(MIC)MIC)。 2.2 对感染小鼠的体内保护实验［2］实验菌液的制备：将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、 变形杆菌、乙型链球菌分别定量接种于适宜的 MH 肉汤或含 10%羊血的 MH 肉汤中，放孵 箱 37℃增菌 6g/h，取此菌液 0.1ml 转种于 10mlMH 肉汤或含 10%羊血 MH 肉汤中，放孵 箱 37℃孵育 18h，该菌为原菌液，适当稀释后，用 5%灭菌胃膜素配制成感染动物所需浓 度菌液，供实验用。 最小致死量（MLD）测定［实验：将原菌液用 5%胃膜素进行递次稀释。选健康小鼠若干， 雌雄各半，分别腹腔注射不同浓度的各菌液，进行各菌株的最小致 100%动物死亡 （MLD）测定［测试，测得金黄色葡萄球菌 MLD 为 5×108cfu/ml，大肠杆菌 MLD 为 5×109gcfu/ml，变形杆菌 MLD 为 5×108cfu/ml，乙型链球菌 MLD 为 1×106g/cfu/ml。 对感染小鼠的体内保护实验：选健康昆明种小鼠 18～22g，雌雄各半，随机分为 5 组， 每组 10 只，同时设 MLD 和 1/10MLD 各 1 组，分别给每只小鼠腹腔注射菌液 0.5mlMLD 菌量，于感染后即刻，6g/，12，24，48，72h 给各组小鼠不同浓度的药物，观察并记录 感染后小鼠死亡数，连续观察 14d，根据小鼠死亡数，按 Bliss 法计算半数有效剂量 ED50 值及 9g5%的可信限。 3 结果 3.1 妇洁颗粒对 6g/4 株细菌的 MIC 测定妇洁颗粒对大多数试验菌种的 MIC 范围均在 0.25～32g/L 之间，MIC50 多为 0.25～8g/L，对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及大肠 杆菌的作用为最强，MIC50 分别为 0.25，2 和 1g/L，对变形杆菌和肠球菌作用次之， MIC50 均为 4g/L，对乙型溶血性链球菌的作用较弱，MIC50 为 32g/L。同时，妇洁颗粒 对 2 株标准菌株也有较好的抑制作用，对 ATCC259g22，ATCC259g2 的 MIC 分别为 2，1g/L。综合上述结果，妇洁颗粒对试验中大部分革兰氏阳性及革兰氏阴性菌均具有较 强的杀灭或抑制作用，抗菌谱较为广泛。结果见表 1。表 1 妇洁颗粒对 6g/4 株细菌的 MIC 测定 3.2 妇洁颗粒对感染小鼠的体内保护实验各组动物感染上述 4 种细菌后 30min 出现怠 动，继而出现卧位，精神萎靡、呼吸急促，死亡多发生在 48h 之内。阳性对照药妇乐冲剂 组动物感染后也出现上述症状。随着用药剂量的增加，死亡时间延迟。妇洁颗粒对金黄色 葡萄球菌、大肠杆菌及变形杆菌造成的体内感染有较好的保护作用，见表 2。由于受药物 浓度的限制，乙型链球菌造成的小鼠体内感染未做出存活率为 100%的保护剂量。结果见 表 2。 4 讨论 以上实验结果表明：妇洁颗粒对临床常见大部分革兰氏阳性及革兰氏阴性菌均具有较 强的杀灭或抑制作用，抗菌谱较为广泛。体内保护实验表明，妇洁颗粒对金黄色葡萄球菌、 大肠杆菌及变形杆菌有较好的体内保护作用。表 2 妇洁颗粒对感染小鼠的体内保护实验 临床上引起阴道炎和宫颈炎的常见病原菌有金葡菌、大肠杆菌、变形杆菌等,妇洁颗粒 在临床上对阴道炎和宫颈炎有较好的治疗作用,是与该药对常见致病菌有较强的抑制作用和 较广泛的抗菌谱分不开的。