脑脊 液细胞学检查的 临床研究

 【摘要】目的：分析中枢神经系统感染时，不同病因和同一病因不同时期脑脊液细胞形态学的特征性变化及其临床的应用价值。方法：吸取新鲜适量脑脊液于细胞玻片离心沉淀仪内，制作涂片，每份标本至少制作两张涂片，经瑞-姬染色后在显微镜油镜下进行细胞分类。结果：单纯进行CSF细胞计数尤其是病脑和结脑患者，不能准确鉴别颅内感染性疾病的类型；CSF细胞学检查，通过详细的细胞分类及形态观察，尤其是对那些常规检查正常的标本，往往可发现免疫活性细胞，吞噬细胞等多种病理改变，对疾病的诊断提供客观依据。结论：CSF细胞学检查能可鉴别中枢神经系统感染性质，对疾病具有确诊价值。  　　【关键词】脑脊液；细胞形态；检查；临床应用  　　【中图分类号】R722.12【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）10-0207-01  　　脑脊液细胞学检查是脑脊液中细胞形态学分析，有利于临床的早诊断和早治疗，本文对中枢神经系统感染的脑脊液进行细胞学分析，探讨其在中枢系统疾病中的应用价值。  　　1、研究资料：  　　1.1研究对象：选择2012年至2014年中枢神经系统感染患者155例，其中病毒性脑膜炎44例，结核性脑膜炎53例，细菌性脑膜炎58例；另选择非感染中枢神经系统疾病患者30例为对照组。  　　1.2检测方法：取新鲜适量脑脊液于细胞玻片离心沉淀仪内，制作涂片，每份标本至少制作两张涂片，经瑞-姬染色后在显微镜油镜下进行细胞分类。  　　2、结果：  　　2.1正常脑脊液：小淋巴细胞为主，呈圆形，胞膜完整，边缘光滑，浆少，占细胞总数的60-70%，单核细胞体积较大，核疏松，占细胞总数的30-40%，无中性粒细胞。  　　2.2化脓性脑膜炎：外观混浊，中性粒细胞增多，达90%以上，形态可见中毒性改变，经治疗后，细胞总数迅速下降，可见吞噬细胞，淋巴细胞比例逐渐升高。  　　2.3结核性脑膜炎：外观透明或淡黄色，呈混合细胞学反应，嗜中性粒细胞、淋巴细胞、激活的淋巴细胞、单核细胞、浆细胞并存，这种混合细胞学反应持续时间较长。  　　2.4病毒性脑膜炎：细胞以淋巴细胞增多为主，淋巴细胞>单核细胞>中性粒细胞，很多病例无中性粒细胞。  　　3、讨论：  　　由于中枢神经系统感染病原学检查的特殊困难性，其诊断多无特异性的指标[1]。既往的CSF常规检查，对中枢神经系统疾病仅仅是提供细胞总数，在细胞数大于50*106/L时才进行简单的单个核与多个核分类，在一定程度上远不能为临床提供有价值的资料。而脑脊液细胞学是一门对正常和病理状态下脑脊液细胞成分进行分析的科学，尤其是精确的细胞分类和动态脑脊液检查，对了解中枢神经系统疾病的病理过程具有明显作用，可通过脑脊液中细胞的演变过程的分析来评估治疗效果，这是常规细胞计数分类无法比拟的。  　　脑脊液细胞学检查采用特殊的细胞收集器，可以收集较多保持完整结构的细胞，提高了阳性检出率，为颅内感染性疾病提供了一种简便、直观的检查方法。本组研究对155例中枢神经系统感染患者和30例非中枢神经系统感染患者进行常规检查和细胞学检查，结果表明，许多病例单纯进行CSF细胞计数不能提供有价值的诊断依据，尤其是病毒性脑膜炎和结核性脑膜炎患者，常规检查单纯进行细胞计数不能准确鉴别颅内感染性疾病的类型。而CSF细胞学检查，通过详细的细胞分类及形态观察，尤其是对那些常规检查正常的标本，对疾病的确认常可提供可靠的客观依据。  　　结果显示，在正常脑脊液中，主要存在小淋巴细胞和单核细胞，比例接近7：3，当细胞总数升高、比例异常、或出现病理性细胞（如粒细胞、激活细胞、吞噬细胞、浆细胞）时，则具有诊断意义。  　　结果显示，化脓性脑膜炎分三期，1）渗出期：发病后1-2d，，中性粒细胞90%以上，中性粒细胞出现中毒性改变，单核细胞略高于淋巴细胞，并可见少量嗜酸性粒细胞；2）增殖期：发病开始后3-6d，细胞总数迅速下降，中性粒细胞下降明显，35%-85%，能见吞噬细胞和浆细胞；3）恢复期：第10-15天，单核吞噬细胞持续增高，中性粒细胞消失，中性粒细胞消失为痊愈标志。  　　结果显示，结核分枝杆菌感染后，在局部募集炎性细胞（包括T淋巴细胞、NK细胞和中性粒细胞）引起免疫反应。在结核感染的开始2-6周内，细胞免疫起重要作用，即大量CD4+的T淋巴细胞和活化的巨噬细胞（单核细胞来源）集中到病灶，常见中性粒细胞、激活的淋巴细胞、单核细胞、激活单核细胞和浆细胞的并存，呈混合细胞反应。在结核性脑膜炎，脑脊液的细胞学典型的改变[2]是，在急性期（发病后1-2周）呈中性粒细胞反应，不论抗结核治疗与否，均转向混合型细胞反应，即亚急性期，此期持续时间长，为结核性脑膜炎的特征性反应，经有效治疗后，中性粒细胞下降，趋向修复期，细胞数下降，中性粒细胞逐渐消失。结核发表脑膜炎的脑脊液改变不典型，早期以淋巴细胞为主，晚期持续出现多形核白细胞增多[3]。  　　结果显示，在病毒性脑膜炎的CSF早期以单纯小淋巴细胞比例增多，急生期淋巴细胞比例增高；出现数量不一的激活的淋巴细胞和浆细胞，在重症病例的急性期其改变是以淋巴细胞为主的混合细胞反应为主。由于受病毒损伤的影响，涂片中较多淋巴细胞可出现脑样（激活淋巴细胞）、花瓣状、扭曲、折叠等改变。脑脊液细胞学检查在诊断病毒性脑膜炎方面准确性高，且操作方便易行，又是判断病毒性脑膜炎的可靠指标[4]，因此目前在诊断病毒性脑膜炎中得到了广泛应用。  　　综上所述，CSF细胞学检查能提高中枢神经系统感染性疾病诊的阳性率，其特异性更是对疾病具有确诊价值，而且操作简便易行，投入少，设备简单，易于开展，出结果速度快。因此，对该项检查应予足够的重视。重复穿刺、多次送检可提高检查的阳性率和准确性，减少不必要的漏诊和误诊。  　　参考文献  　　[1]何俊英，孔繁无.临床脑脊液细胞学诊断[M].石家庄：河北科学技术出版社，2007：144-150  　　[2]王宁山，侯熙德.结核性脑膜炎脑脊液实验室指标的监测分析[J].中华呼吸与结核杂志，1994，17（1）：54-54  　　[3]JacobPC，KhanduriD，PrabhakerS.Cerebrospinalfluidcytomorphologyintuberculousmeningitisapreliminaryreport.IndianJPathoMicrobiol，1993，36（2）：398-398  　　[4]柳清梅.常规脑脊液细胞学检查诊断病毒性脑炎130例[J].中国实用医药，2014，9（2）：54-55