解放军文职招聘考试异丙醇试验

 异丙醇试验

1.原理    非极性溶剂异丙醇，会使不稳定血红蛋白分子内氢键结合减弱，稳定性下降。正常血红蛋白在40min内保持稳定。不稳定血红蛋白在加入异丙醇后5min内即变混浊，20min形成絮状沉淀。

2. 试剂

（1） 0.1mom/LTris缓冲液：Tris1.21g，溶于20ml水中，用1mol/LHCl（约8ml）调pH至7.4，加水至100ml。

（2） 17%异丙醇- Tris缓冲液：取异丙醇17ml，加0.1mom/LTris缓冲液至100ml，摇匀，室温可保存1周。

3. 方法

（1） 取小试管2支，各加入17%异丙醇- Tris缓冲液1ml，加塞，于37℃水浴中预温5min。

（2） 分别加入新鲜正常Hb液和待检Hb液0.1ml，混匀，计时，若在37℃水浴中5min出现混浊，40min出现沉淀，则为阳性。

4. 正常参考值

  正常Hb在40min内保持稳定不出现混浊。

5. 质量保证

（1）Hb液要新鲜，否则会因Hb自动氧化为高铁Hb，肽链结合力减弱，出现假阳性结果。

（2）异丙醇浓度和温度要严格控制，pH不能低于7.2。

（3）Hb溶液中HbF>4%，即可发生假阳性。

（4）若正常对照管出现混浊，则要求重作此实验。

6.临床意义 

（1） 不稳定血红蛋白的患者该试验常于5分钟时出现混浊，20分钟开始出现绒毛状沉淀。

（2） 在HbF、HbH、HbE含量>4%、G6PD缺乏、a珠蛋白合成障碍性贫血时均可出现阳性结果。